資源簡介

實驗九 探究酵母菌的呼吸方式P91
1 原理: 酵母菌在有氧條件下進行有氧呼吸,產生二氧化碳和水：
　　C6H12O6 + 6O2 + 6H2O 6CO2 + 12H2O + 能量
在無氧條件下進行無氧呼吸,產生酒精和少量二氧化碳：
　　C6H12O6 2C2H5OH + 2CO2 + 少量能量
2、裝置：(見課本)下圖為“探究酵母菌細胞呼吸的方式”的實驗裝置圖，請據圖分析
　　甲：有氧呼吸裝置　　　　　　 乙：無氧呼吸裝置
3 A瓶加入的試劑是NaOH，其目的是：使進入B瓶的空氣先經過NaOH處理，排除空氣中CO2對實驗結果的干擾。
4 C瓶和E瓶加入的試劑是澄清石灰水(或溴麝香草酚藍水溶液)，其作用是 ： 檢測CO2的產生
D瓶應封口放置一段時間后，再連通E瓶，其原因是：D瓶應封口放置一段時間后，酵母菌會將瓶中的氧氣消耗完。再連通E瓶，就可以確保通入澄清石灰水(或溴麝香草酚藍水溶液)的CO2是酵母菌的無氧呼吸所產生的
3、檢測：
　　(1)檢測CO2的產生：使澄清石灰水變渾濁，或使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。
　　(2)檢測酒精的產生：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發生反應，變成灰綠色。實驗六 探究影響酶活性的因素
原理：淀粉遇碘后，形成藍色的復合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麥芽糖，麥芽糖遇碘后，不形成藍色的復合物。
　　1、材料：新配置的淀粉酶溶液，新鮮肝臟研磨液，可溶性淀粉溶液，過氧化氫溶液等。
　　2、步驟：
　　(1)探究溫度對酶活性的影響
　　溫度對酶活性的影響
　　在溫度對酶活性的影響的實驗中，三支試管的條件，除溫度外均相同。3號試管處在60℃的溫度條件下，酶活性最大，試管中的淀粉被分解，滴入碘液后不會變藍。2號試管的溫度條件是100℃， 這樣高溫度條件下，淀粉酶已失去活性，1號試管的溫度條件是O℃，低溫抑制淀粉酶的活性。所以2號和1號試管中的淀粉都沒有被分解，滴上碘液后都會變藍，此實驗可以證明;酶的催化作用需要適宜的溫度條件，溫度過高和過低都將影響酶的活性。
　　(2)探究pH對酶活性的影響
　　實驗1 過氧化氫(H2O2)在過氧化氫酶的催化作用下，可以分解成水和氧氣，可以放入帶火星的木條，看能否復燃來檢測是否有氧氣產生。
步驟 項目 試管1 試管2 試管3
1 加入過氧化氫溶液 2mL 2mL 2mL
2 加入蒸餾水 1mL — —
3 加入鹽酸溶液 — 1mL —
4 加入NaOH溶液 — — 1mL
5 滴加肝臟研磨液 2滴 2滴 2滴
6 37℃水浴 5min 5min 5min
7 檢
驗 放入帶火星的木條 復燃 不復燃 不復燃
試管內氣泡產生量 有氣泡產生 沒有氣泡產生 沒有氣泡產生
2號試管內加入了鹽酸，溶液的pH較低，3號試管內加入了氫氧化鈉，溶液的pH較高，在過低或過高pH環境中，過氧化氫酶失去活性，不能使過氧化氫分解，沒有氧氣產生而1號試管沒有加入酸或堿，溶液近似中性，過氧化氫酶將過氧化氫分解成水和氧氣，使木條復燃。實驗四 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體 P47
1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細胞臨時裝片
　　2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色,球形或橢球形。
　　用健那綠染液染色后的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色,細胞質接近無色。

步驟 操作方法 目的與作用
（1）取材 ①新鮮的蘚類的葉
②菠菜葉下表皮略帶一些葉肉 ①蘚類葉為單層細胞
②下表皮容易撕取,要略帶些葉肉
（2）制片 注意葉片不能太干了，保持有水的狀態 以免影響細胞活性
（3）觀察 葉綠體呈橢圓形，可隨細胞質的流動而流動。葉綠體在弱光下以最大面積（長軸）轉向光源，在強光下以最小面積（短軸）轉向光源。
（1）取材 漱口，口腔內側壁上輕刮幾下
（2）染色 將口腔細胞放在健那綠液滴上
（3）觀察 蓋上蓋玻片，顯微鏡下觀察，線粒體被染成藍綠色
問題 1、為什么不用植物細胞來觀察線粒體？
植物線粒體相對較少，葉綠體顏色易掩蓋線粒體被染成的藍綠色。
2、如果觀察發現染色不足，如何補色？
在蓋玻片一側滴加健那綠液，另一側用吸水紙吸

步驟 項目 試管1 試管2 試管3
1 加入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL
2 放置在不同溫度環境下5分鐘 0℃ 100℃ 60℃
3 加入新配置的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL
4 滴入碘液 2滴 2滴 2滴
5 觀察結果 變藍 變藍 不變藍實驗十 觀察細胞的有絲分裂P115
1、材料：洋蔥根尖(蔥，蒜)
2、步驟：
　　(一)洋蔥根尖的培養
　　(二)裝片的制作
　　制作流程：解離→漂洗→染色→制片
　　1. 解離: 藥液: 質量分數為15%的鹽酸,體積分數為95%的酒精(1 : 1混合液).
　　時間: 3~5min .目的: 使組織中的細胞相互分離開來.
　　2. 漂洗: 用清水漂洗約3min. 目的: 洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色.
　　3. 染色: 用質量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~ 5min
　　目的: 使染色體著色,利于觀察.
　　4. 制片: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片. 然后用拇指輕輕地按壓載玻片.
　　目的: 使細胞分散開來,有利于觀察.
　　(三)觀察
　　1、先在低倍鏡下找到根尖分生區細胞：細胞呈正方形，排列緊密,有的細胞正在分裂。
　　2、換高倍鏡下觀察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時期細胞內染色體形態和分布的特點)。其中，處于分裂間期的細胞數目最多。實驗七 觀察植物細胞的質壁分離和復原P61
原理：①細胞液濃度>細胞外溶液濃度時，細胞吸水;細胞液濃度<細胞外溶液濃度時，細胞失水
　?、诩毎谂c原生質層的伸縮能力不同。
　　1、條件：細胞內外溶液濃度差，活細胞，大液泡
　　2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞(具紫色大液泡)，質量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。
　　3、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片→觀察→蓋玻片一側滴蔗糖溶液,另一側用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質層與細胞壁分離)→蓋玻片一側滴清水, 另一側用吸水紙吸引→觀察(質壁分離復原)
　　4、結論: 細胞外溶液濃度 > 細胞內溶液濃度，細胞失水 質壁分離
　　細胞外溶液濃度 < 細胞內溶液濃度，細胞吸水 質壁分離復原
　　植物細胞質壁分離和復原
　　1.原理：成熟(有明顯液泡)的植物細胞能夠與外界溶液組成一個滲透系統，通過滲透作用的方式吸水或失水。
　　2.方法步驟：
　　應用：1、可以用于測定細胞液的濃度 2、可以用于判斷細胞的死活
　　注意問題：
　　1、細胞發生質壁分離后，細胞壁與細胞膜之間的空隙充滿的是0.3mg/mL蔗糖溶液。
　　2、動物細胞能發生滲透作用但不會發生質壁分離。
　　例題：下面是一組用新鮮洋蔥表皮進行的實驗處理和結果，請分析回答：
實驗分組 處理方法 實驗結果
第1組 ①將材料置于30%蔗糖溶液中 ①發生質壁分離
②然后將材料移至蒸餾水中 ②發生質壁分離復原
第2組 ③將材料置于60%蔗糖溶液中 ③迅速發生質壁分離
④然后將材料移至蒸餾水中 ④質壁分離不能復原
第3組 ⑤將材料置于7%的尿素溶液中 ⑤開始發生質壁分離，然后逐漸自動復原
第4組 ⑥將材料放入100℃熱水中3min后取出，重復第1組實驗 ⑥不發生質壁分離
(1)洋蔥表皮細胞在第1、2、3組實驗中均發生了質壁分離現象，其內部結構基礎和外在條件分別是 。
(2)比較第1和第2組實驗結果的差異，說明 。
(3)比較第1和第3組實驗結果，出現實驗結果差異性的原因是 。
(4)比較第1和第4組實驗結果，出現實驗結果差異性的原因是 。
答案：(1)內部結構基礎是有原生質層和原生質層內外兩個溶液體系的存在;外在條件是原生質層內外兩個溶液體系存在濃度差
(2)高濃度溶液加快質壁分離現象的出現，但由于引起細胞過度失水，導致細胞死亡，使質壁分離復原不能發生
(3)尿素是可能被細胞主動吸收的小分子物質，隨著尿素分子不斷的進入細胞內部，當細胞內外濃度趨于一致時，質壁分離就會自動復原
(4)高溫致使細胞死亡，死亡的細胞原生質層失去選擇透過性，不能發生質壁分離
注意問題
　　1、選材：選取紫色洋蔥鱗片葉外表皮。其細胞液為紫色，在顯微鏡下與無色透明的細胞壁容易區分，觀察到的質壁分離和復原效果明顯。
另外，取新鮮水綿、黑藻葉、南瓜表皮也可以做這個實驗。
2、試劑：選用0.3g/ml 蔗糖糖溶液。濃度過高，細胞質壁分離速度雖然很快，但不久就會將細胞殺死，細胞不能進行質壁分離復原;若濃度過低，則不能引起細胞質壁分離或速度太慢。
另外，8% 食鹽溶液、5%的硝酸鉀溶液、一定濃度的尿素、甘油……也可使用，但后面三者在引起質壁分離后可自動復原。
3、時間的控制：做好質壁分離的實驗后，不久就要做質壁分離復原實驗。避免使質壁分離的細胞長時間處于較高濃度的外界溶液中，細胞過度失水而導致死亡。從而觀察不到質壁分離復原的現象。實驗一 觀察DNA和RNA在細胞中的分布
實驗原理：DNA 綠色，RNA 紅色
　　實驗步驟：
步驟 器材與試劑 作用與原理
（1）制片 ①將牙簽刮下的口腔上皮細胞置于載玻片上0.9%的NaCl溶液滴
②載玻片烘干 1 0.9%的NaCl溶液防止細胞破裂
2 維持細胞形態
3 烘干使細胞固定在載玻片上
（2）水解 8%HCl中30℃保溫5分鐘 鹽酸能改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色體中的DNA與蛋白質分離。
（3）沖洗 用蒸餾水緩流沖洗10分鐘
（4）染色 2滴吡羅紅甲基綠染色5分鐘 甲基綠使DNA染上綠色
吡羅紅使RNA染上紅色
（5）觀察 顯微鏡下觀察
　　實驗結果：細胞核呈綠色,細胞質呈紅色.
　　分布：真核生物的DNA主要分布在細胞核中，線粒體和葉綠體內也含有少量的DNA；RNA主要分布在細胞質中。實驗八 葉綠體色素的提取和分離
1、原理：( 1 )葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑無水乙醇(或丙酮)中，所以用無水乙醇可提取葉綠體中的色素。( 2 )不同的色素在層析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得快，溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得慢，因而可用層析液將不同色素分離?！　?br/>　　3、結果分析：①從色素帶的寬度可知色素含量的多少依次為：葉綠素a >葉綠素b >葉黃素>胡蘿卜素; ②從色素帶的位置可知色素在層析夜中溶解度大小依次是：胡蘿卜素>葉黃素>葉綠素 a >葉綠素 b ; ③在濾紙上距離最近的兩條色素帶是葉綠素a 與葉綠素b ，距離最遠的兩條色素帶是胡蘿卜素與葉黃素。
　　4、注意事項：(1)裁取定性濾紙時，注意雙手盡量不要接觸紙面，以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。 (2)根據燒杯的高度制備濾紙條，讓濾紙條長度高出燒杯1cm ，高出的部分做直角彎折。
　　(3)畫濾液細線時，用力要均勻，速度要適中。
　　(4)研磨要迅速、充分。 a.因為丙酮容易揮發; b.為了使葉綠體完全破裂.從而能提取較多的色素;
　　c.葉綠素極不穩定，能被活細胞中的葉綠素酶水解而被破壞。
　　(5)制備濾紙條時，要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴散均勻,便于觀察實驗結果。
　　5、實驗創新：在本實驗中在圓形濾紙中央點上葉綠體色素的提取液進行層析，會得到近似同心的四個色素環，由內到外依次是黃綠色、藍綠色、黃色、橙黃色。實驗二 檢測生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質 P18
實驗原理：
還原糖 ________________磚紅色
　　脂肪________________紅色
　　蛋白質________________紫色
　　1、還原糖的檢測
　　什么是還原性糖：
　　還原性糖：有還原性基團——游離醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖。
　　非還原性糖：淀粉、纖維素、蔗糖、糖元。
　　(1)材料的選取：還原糖含量高，白色或近于白色，如蘋果，梨，白蘿卜。
　　(2)試劑：斐林試劑(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，現配現用。
　　(3)步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(淺藍色→棕色→磚紅色)
　　2、脂肪的檢測
　　(1)材料的選?。汉玖吭礁叩慕M織越好，如花生的子葉。
　　(2)步驟：制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央
　　 ↓
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
　　 ↓
制作裝片(滴1～2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)
　 　↓
鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)
　　3、蛋白質的檢測
　　(1)試劑：雙縮脲試劑(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液)
　　(2)步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化(紫色)實驗三 用顯微鏡觀察多種多樣的細胞 P7
1、顯微鏡的使用：取鏡→安放→對光→壓片→觀察→收放。
　　(1)低倍鏡使用：(觀察任何標本都必須先用低倍鏡，且標本應透明)
　　(2)高倍鏡使用：
　　先使用低倍鏡確定目標→移動裝片，使目標位于視野中央→轉動轉換器，換用高倍鏡→
　　調焦(轉動細準焦螺旋)(視野較暗,可調反光鏡或光圈)
　　2、顯微鏡使用注意事項：
　　(1)成像特點：放大倒立的虛像。
　　(2)放大倍數計算：物鏡的放大倍數×目鐿的放大倍數。放大倍數指的是物體的長或寬。
　　(3)物像的移動方向與裝片的移動方向相反。
　　(4)低倍鏡下成像特點：物像小、細胞數目多、視野亮。
　　高倍鏡下成像特點：物像大、細胞數目少、視野暗。
　　(5)物鏡和目鏡的判斷方法：物鏡有螺紋，目鏡無螺紋。
　　(6)放大倍數的判斷方法：
　　目鏡：鏡頭長放大倍數小，鏡頭短放大倍數大。
　　物鏡：鏡頭長放大倍數大，鏡頭短放大倍數小。
　　物鏡與裝片之間的距離：距離近放大倍數大，距離遠放大倍數小。
　　(7)顯微鏡的有關性能參數。最重要的性能參數是分辨率，而不是放大倍數。
　　1.高倍鏡的使用時注意
　　(1)低倍鏡使用過程中，下降鏡筒時必須雙眼側視鏡筒，防止鏡頭撞到玻片。
　　(2)低倍鏡找到物像后，換上高倍鏡時，觀察過程中只能使用細準焦螺旋。實驗十一 模擬探究細胞表面積與體積的關系P110
原理: NaOH和酚酞相遇呈紫紅色
　　當與瓊脂相遇時，其中酚酞變成紫紅色，因此，從顏色上的變化就知道NaOH
　　擴散得有多遠。在一定時間內，NaOH在瓊脂塊的每一側擴散的距離大致相同。
　　步驟: 將含酚酞瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、2cm、1cm的正方體, 放入燒杯內,加入
　　NaOH溶液,10min后取出,用紙巾吸干,用塑料刀將瓊脂塊切成兩半.觀察切面,測量每一塊上NaOH擴散的深度.
　　分析: 瓊脂塊的表面積與體積之比(相對表面積)隨著瓊脂塊的增大而減小, NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比也隨著瓊脂塊的增大而減小.
　　結論：細胞體積越大，其相對表面積越小，細胞的物質運輸的效率就越低。細胞表面積限制了細胞的長大。
　　1.細胞為什么要分裂 或細胞為什么這么小
　　(1)增大細胞膜表面積與體積比，有利于物質的運輸(營養吸收與廢物排出)以保證細胞正常生命代謝需要。
　　(2)保證適宜的核質關系，使細胞質能在細胞核的控制范圍內。
　　2.卵細胞是一種特殊的細胞，因為它含有許多供胚胎發育的營養物質——卵黃，而使細胞體積增大了許多倍。但卵細胞一般與外界交換物質少，故表面積與體積的比例特殊。實驗五 通過模擬實驗探究膜的透性
用帶有一個小孔的隔板把水槽分成左右兩室，把磷脂分子引入隔板小孔，使之成為一層薄膜，水槽左室加人鉀離子濃度較低的溶液，右室加入鉀離子濃度較高的溶液。
　(1)在左、右兩室分別插入正、負電極，結果發現鉀離子不能由左室進入右室，原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
　(2)若此時在左室加入少量纈氨霉素(多肽)，結果發現鉀離子可以由左室進入右室，原因是 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
　(3)若此時再將電極取出，結果鉀離子又不能由左室進入右室，原因是 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
　　(4)上述實驗證明 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
　　答案(1)磷脂膜上沒有載體，鉀離子不能通過主動運輸由左室進入右室
　?、柒涬x子利用纈氨霉素載體，并由電極板提供能量，通過主動運輸由左室進入右室
　?、侨鄙倌芰?，不能進行主動運輸
　?、戎鲃舆\輸的特點是需要載體，消耗能量，物質從低濃度到達高濃度

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