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生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題
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【高頻考點(diǎn)匯編】
考點(diǎn)一、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用
1.培養(yǎng)基
（1）營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。
（2）培養(yǎng)基類(lèi)型
①按培養(yǎng)基物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種，其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定、菌落計(jì)數(shù)等。而液體培養(yǎng)基常用于科研或工業(yè)生產(chǎn)等。
②按培養(yǎng)基的功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。
③按照人們對(duì)培養(yǎng)基中成分的了解程度可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩種。
說(shuō)明代謝類(lèi)型不同的微生物，對(duì)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的要求不同，如自養(yǎng)型微生物可以利用無(wú)機(jī)碳源，而異養(yǎng)型微生物則必須利用有機(jī)碳源。不論代謝類(lèi)型如何，微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求都包括碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子五類(lèi)。
2.關(guān)于無(wú)菌技術(shù)
（1）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化學(xué)藥劑消毒。對(duì)不同的對(duì)象需采用不同的消毒或滅菌方法。
（2）在微生物培養(yǎng)時(shí)，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵。無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)，主要包括四方面的內(nèi)容：
①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。
③為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。
④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲废嘟佑|。
3.菌種的純化
（1）利用不同的菌體的菌落特征不同分離菌種，常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種：
①平板劃線法是同一接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，以形成標(biāo)準(zhǔn)菌落。②稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尦潭鹊木悍謩e涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，以形成標(biāo)準(zhǔn)菌落。
（2）選擇培養(yǎng)，利用不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)需要的不同或?qū)Νh(huán)境要求的不同，將不同微生物分開(kāi)。
考點(diǎn)二、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的注意事項(xiàng)
1.果酒、果醋制作的注意事項(xiàng)
（1）材料的選擇與處理
選擇新鮮的葡萄，榨汁前應(yīng)先沖洗，再除去枝梗，以避免去除枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。
（2）防止發(fā)酵液被污染
需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。為避免雜菌污染：榨汁機(jī)要洗凈并晾干，發(fā)酵裝置要洗凈并用70%的酒精消毒；若用簡(jiǎn)易的發(fā)酵裝置，每隔一定時(shí)間排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。
（3）控制發(fā)酵條件
果酒 果醋
溫度 20℃左右，最適合繁殖；18～25℃，酒精發(fā)酵 30～35℃，最適合生長(zhǎng)
氧氣 前期通O2，然后控制無(wú)O2 氧氣充足
其他 時(shí)間：10～12天；pH:5.0～6.0 時(shí)間：約7～8天
2.腐乳制作的注意事項(xiàng)
（1）影響腐乳品質(zhì)的條件：水、鹽、酒、溫度、發(fā)酵時(shí)間等。
①水的控制：含水量約70%，用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳，不易成形。
②鹽的控制：鹽濃度過(guò)高，會(huì)影響腐乳的口味，濃度過(guò)低，腐乳易腐敗變質(zhì)。
③酒的控制：酒精含量一般控制在12%左右。酒精含量過(guò)高，使腐乳成熟期延長(zhǎng)。酒精含量過(guò)低，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗。
④溫度的控制：溫度為15～18℃,適合毛霉生長(zhǎng)。發(fā)酵時(shí)間易控制在6個(gè)月左右。
（2）防止雜菌污染
①用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。
②裝瓶時(shí)，操作要迅速小心。加放鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí)，最好將瓶口通過(guò)酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。
（2）腌制條件的控制：腌制過(guò)程中要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。發(fā)酵時(shí)間受到溫度的影響：18～20℃，腌制15天左右。溫度高，時(shí)間短一些。溫度過(guò)高、食鹽用量不足10%、腌制時(shí)間過(guò)短，都容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。
考點(diǎn)三、植物的組織培養(yǎng)技術(shù)
1.植物組織培養(yǎng)原理
植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性。不同細(xì)胞的全能性不一樣。生物體的所有細(xì)胞全能性大小比較如下：
①受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞；②體細(xì)胞中：幼嫩植物組織（如芽尖）>成熟組織細(xì)胞。
2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥培養(yǎng)技術(shù)的異同
植物組織培養(yǎng)技術(shù) 花藥培養(yǎng)技術(shù)
相同點(diǎn) 理論依據(jù) 植物細(xì)胞的全能性
基本過(guò)程 無(wú)菌技術(shù)及接種操作基本相同
影響因素 選材、營(yíng)養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等
不同點(diǎn) 選材 體細(xì)胞 生殖細(xì)胞（精子）
3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)、微生物培養(yǎng)技術(shù)和無(wú)土栽培技術(shù)比較
植物組織培養(yǎng)技術(shù) 微生物培養(yǎng)技術(shù) 無(wú)土栽培技術(shù)
概念 在無(wú)菌條件下，將離體的植物體器官或組織接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整植株 在無(wú)菌條件下，在適宜的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件下對(duì)微生物的培養(yǎng) 將植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中所需各種礦質(zhì)元素按一定比例配成營(yíng)養(yǎng)液，并利用這種營(yíng)養(yǎng)液栽培植物
培養(yǎng)基成分 水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、有機(jī)添加物和植物激素等 水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等 水、必需礦質(zhì)元素
特殊操作要求 嚴(yán)格控制無(wú)菌操作，在培養(yǎng)過(guò)程中要更換培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例 嚴(yán)格控制無(wú)菌操作，整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程無(wú)需更換培養(yǎng)基 適宜的環(huán)境條件，基質(zhì)墊底并固定幼苗，不需要保證無(wú)菌條件
考點(diǎn)四、探究不同種類(lèi)加酶洗衣粉的洗滌效果實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意的事項(xiàng)
1.實(shí)驗(yàn)原理
酶的催化作用具有專(zhuān)一性，復(fù)合酶洗衣粉加入的酶制劑種類(lèi)較多，與單一加酶洗衣粉相比，對(duì)各種污漬都有較好的洗滌效果。
2.實(shí)驗(yàn)變量
(1)自變量：加酶洗衣粉。
(2)無(wú)關(guān)變量：其他條件相同且適宜（如溫度、 pH等）。
3.實(shí)驗(yàn)步驟
步驟 燒杯編號(hào)
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
注入自來(lái)水 500 mL 500 mL 500 mL
加入物質(zhì)（等量） 奶漬布 奶漬布 奶漬布
控制水溫 37℃ 37℃ 37℃
加入洗衣粉（等量） 蛋白酶洗衣粉 復(fù)合酶洗衣粉 脂肪酶洗衣粉
用玻璃捧攪拌 5 min 5 min 5 min
觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
4.實(shí)驗(yàn)時(shí)注意事項(xiàng)
（1）在比較普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗滌效果的實(shí)驗(yàn)中，自變量為洗衣粉的種類(lèi)，設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循單一變量原則、對(duì)照原則，有效控制其他變量，如水的用量、污染物的量、所用實(shí)驗(yàn)的布的質(zhì)地和大小、兩種洗衣粉的用量、攪拌及洗滌時(shí)間等。
（2）在使用加酶洗衣粉時(shí)不但要考慮最佳洗滌效果的條件，如最適溫度、pH，還要考慮衣物的承受力，如蛋白酶洗衣粉不能洗滌絲綢類(lèi)衣物；也要考慮洗滌成本問(wèn)題，因污漬的成分比較復(fù)雜，一般選擇復(fù)合加酶洗衣粉，以減少用量。
（3）該實(shí)驗(yàn)探究多種加酶洗衣粉對(duì)同一污漬的洗滌效果，也可以探究同一種加酶洗衣粉對(duì)于不同污漬的洗滌效果。
考點(diǎn)五、固定化酶與固定化細(xì)胞
1.固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)。
2.將酶或細(xì)胞固定化的方法
（1）包埋法：將酶或細(xì)胞包埋在不溶于水的多孔性載體中。
（2）化學(xué)結(jié)合法：將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上。
（3）物理吸附法：將酶分子吸附在載體的表面上。
注：酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定，而細(xì)胞多采用包埋法固定。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大，而酶分子很小，個(gè)大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出。
3.固定化細(xì)胞常用的載體材料
常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。
4.固定化酶的優(yōu)點(diǎn)：（1）易接觸；（2）易分離；（3）反復(fù)利用。
考點(diǎn)六、DNA的粗提取與鑒定
1.原理、方法和目的
基本原理 方法 目的
DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低 溶于NaCl溶液中并稀釋 ①NaCl溶液為2 mol/L時(shí)，DNA溶解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析而生成沉淀，通過(guò)過(guò)濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于NaCl溶液的雜質(zhì)②當(dāng)NaCl溶液稀釋至0.14 mol/L時(shí)，DNA析出，過(guò)濾可除去溶于NaCl中的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)
DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質(zhì)
DNA不溶于酒精溶液 加入冷卻酒精（95%） DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)
DNA可被二苯胺染成藍(lán)色 加入二苯胺，并沸水浴 鑒定DNA
2.實(shí)驗(yàn)材料
（1）動(dòng)物
（2）植物：新鮮菜花、蒜黃、菠菜等。
人和哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核,也沒(méi)有DNA，不適于作DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。
3.鑒定
比較 加入物質(zhì) 結(jié)果 圖示
實(shí)驗(yàn)組 均加入：①4 mL二苯胺試劑②2 mol/LNaCl溶液5 mL 絲狀物(DNA) 溶液逐漸變藍(lán)
對(duì)照組 —— 不變藍(lán)
4.注意事項(xiàng)
①制備雞血細(xì)胞液時(shí)，要在取雞血的同時(shí)加入檸檬酸鈉，靜置后上層是血清，下層為所需要的血細(xì)胞。
②兩次加蒸餾水的目的不同。
③鑒定DNA時(shí)需沸水浴加熱。
考點(diǎn)七 PCR擴(kuò)增技術(shù)和DNA復(fù)制的比較
DNA復(fù)制 PCR擴(kuò)增技術(shù)
場(chǎng)所 細(xì)胞核內(nèi) 生物體外
原理 堿基互補(bǔ)配對(duì) 堿基互補(bǔ)配對(duì)
酶 DNA聚合酶、解旋酶 耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）
條件 模板、ATP、引物鏈（RNA）、常溫 模板、ATP、引物鏈（DNA及RNA片段）、溫度變化（90~95℃→55~60℃→70~75℃）
原料 四種脫氧核苷酸 四種脫氧核苷酸
特點(diǎn) 形成的是整個(gè)DNA分子，一個(gè)細(xì)胞周期只復(fù)制一次 短時(shí)間內(nèi)形成大量目的基因DNA片段，呈指數(shù)增長(zhǎng)——2n
考點(diǎn)八、血紅蛋白的提取和分離
1.蛋白質(zhì)分離的依據(jù)
蛋白質(zhì)各種特性的差異，如分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力等，可以用來(lái)提取和分離不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)。
2.方法及原理
（1）凝膠色譜法原理
蛋白質(zhì)比較 相對(duì)分子質(zhì)量大 相對(duì)分子質(zhì)量小
凝膠內(nèi)部 不能進(jìn)入 能進(jìn)入
運(yùn)動(dòng)方式 垂直向下 垂直向下和無(wú)規(guī)則擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)
經(jīng)過(guò)路程 較短 較長(zhǎng)
洗脫次序 先流出 后流出
凝膠色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過(guò)大造成洗脫液體積大，樣品稀釋度大；凝膠色譜柱的高度與分離度有關(guān)。
（2）凝膠電泳法原理
凝膠電泳法的原理是不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場(chǎng)中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)方向和運(yùn)動(dòng)速度不同。
考點(diǎn)九、蒸餾、壓榨和萃取三種方法的比較
提取方法 水蒸氣蒸餾 壓榨法 有機(jī)溶劑萃取
實(shí)驗(yàn)原理 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái) 通過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油 使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油
方法步驟 （1）水蒸氣蒸餾（2）分離油層（3）除水過(guò)濾 （1）石灰水浸泡、漂洗（2）壓榨、過(guò)濾、靜置（3）再次過(guò)濾 （1）粉碎、干燥（2）萃取、過(guò)濾（3）濃縮
適用范圍 適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油 適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取 適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中
優(yōu)點(diǎn) 簡(jiǎn)單易行，便于分離 生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能 出油率高，易分離
局限性 水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問(wèn)題 分離較為困難，出油率相對(duì)較低 使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響芳香油的質(zhì)量
注： ①水蒸氣蒸餾要適當(dāng)延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間，溫度不能太高。
②用于萃取的有機(jī)溶劑必須事先精制，除去雜質(zhì)。
③壓榨時(shí)原料必須要浸透，這樣壓榨時(shí)不會(huì)滑脫，出油率高，不堵塞篩眼；使用石灰水充分浸泡原料，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率。
【2011高考真題之－－生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題】
1、(2011江蘇卷)下列果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述，正確的是
A．腐乳制作所需要的適宜溫度最高
B．果醋發(fā)酵包括無(wú)氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵
C．使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌種都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA
答案：D
解析：果酒制作酵母菌繁殖適宜溫度20度左右，酒精發(fā)酵時(shí)適宜溫度在18~25度，果醋制作適宜溫度30~35度，腐乳制作適宜溫度15度~18度，所以A選項(xiàng)錯(cuò)誤；醋酸菌為好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)，所以B選項(xiàng)錯(cuò)誤；果酒、果醋和腐乳制作使用的菌種分別是是酵母菌、醋酸菌、毛霉等。所以C選項(xiàng)錯(cuò)誤；D選項(xiàng)正確。
2.（2011江蘇卷）下列有關(guān)酶的制備和應(yīng)用的敘述，正確的是
A．酶解法和吸水漲破法常用于制備微生物的胞內(nèi)酶
B．透析、電泳和酸解等方法常用于酶的分離與純化
C．棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進(jìn)行洗滌
D．多酶片中的胃蛋白酶位于片劑的核心層
3.（2011江蘇卷）下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是
A．愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞
B．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株
C．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子
D．植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得
答案：D
解析：愈傷組織是處于未分化的狀態(tài)，所以沒(méi)有特定結(jié)構(gòu)和功能，所以A選項(xiàng)錯(cuò)誤；二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到的植株是單倍體，高度不育，所以B選項(xiàng)錯(cuò)誤；人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子，所以C選項(xiàng)錯(cuò)誤；可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)淘汰不耐鹽個(gè)體，篩選出耐鹽個(gè)體，所以D選項(xiàng)正確。
4、（2011江蘇卷）在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)敘述正確的是
A．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L，濾去析出物
B．調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)
C．將絲狀物溶解在2mol/NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色
D．用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同
答案：B
解析：用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L，析出物就是DNA，不能濾去，所以A選項(xiàng)錯(cuò)誤；B選項(xiàng)正確；將絲狀物溶解在2mol/NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后需水浴加熱才呈藍(lán)色，所以C選項(xiàng)錯(cuò)誤；雞血細(xì)胞可直接加入蒸餾水使細(xì)胞破裂釋放DNA，而菜花做材料時(shí)需加入洗滌劑溶解細(xì)胞膜，使DNA釋放，所以D選項(xiàng)錯(cuò)誤。
5.（2011廣東卷）以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是
A.洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂
B.豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少
C.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè)
D.在凝膠色譜法分離過(guò)程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動(dòng)慢
答案C:
解析：本題考查血紅蛋白的提取，屬于對(duì)識(shí)記、理解層次的考查。在凝膠色譜柱中，分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動(dòng)快，分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長(zhǎng)，流動(dòng)慢，血紅蛋白比分子量小的雜蛋白移動(dòng)快，D錯(cuò)誤。A正確，洗滌的目的是去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分離純化，加入的是生理鹽水，緩慢攪拌10min，低速短時(shí)間離心，重復(fù)洗滌三次，直至上清液不再呈現(xiàn)黃色，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。B正確，哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核與眾多的細(xì)胞器，提純時(shí)雜蛋白較少。C正確，血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液（如果操作都正確，能清楚的看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出）。這使得血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀，簡(jiǎn)化了操作。
6.（2011山東卷）研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白質(zhì)）均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。
（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，該過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)___________除去其中的固體雜質(zhì)。
（2）篩選乳酸菌A時(shí)可選用平板劃線法或____________接種。對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是_______________。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行____________處理。
（3）培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長(zhǎng)提供______________。電泳法純化乳酸菌素時(shí)，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越大，電泳速度___________。
（4）抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿(mǎn)致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈。可通過(guò)測(cè)定透明圈的______________來(lái)比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
7.（2011新課標(biāo)全國(guó)卷）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從含原油的土壤中篩選出高效降解原油的菌株。回答問(wèn)題：
（1）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基土，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。
（2）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即 和 。
（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周?chē)纸馊Φ拇笮。纸馊φf(shuō)明該菌株的降解能力 。
（4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 。無(wú)菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行，以避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染。
答案：（1）原油 選擇 （2）平板劃線法 稀釋涂布平板法 （3）強(qiáng)
（4）干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰
解析：本題綜合考查了微生物的培養(yǎng)、篩選等相關(guān)知識(shí)。（1）選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某一化學(xué)物質(zhì)或改變某一理化性質(zhì)，使某一微生物正常生長(zhǎng)，而其他微生物則
被殺滅或抑制，從而選出所需要的微生物；本小題就是利用該細(xì)菌能高效降解原油的特性，用選擇培養(yǎng)基將其篩選出來(lái)的。（2）純化菌種的方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法。（3）（4）見(jiàn)答案。
【2010高考真題之－－生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題】
1、（10廣東卷）小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進(jìn)行試驗(yàn)（見(jiàn)圖10），恰當(dāng)?shù)淖龇ㄊ?br/>A．加入適量的酵母菌 B．一直打開(kāi)閥b通氣
C．一直關(guān)緊閥a，偶爾打開(kāi)閥b幾秒鐘
D．把發(fā)酵裝置放到4℃冰箱中進(jìn)行試驗(yàn)
【答案】AC
【解析】本題主要考查學(xué)生的理解能力。果酒的制備過(guò)程中先讓酵母菌在有氧條件下迅速擴(kuò)增，再讓酵母菌在無(wú)氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生酒精。
2、（10江蘇卷）右圖表示果酒和果醋制作過(guò)程中的物質(zhì)變化過(guò)程，下列敘述正確的是
A.過(guò)程①和②都只能發(fā)生在缺氧條件下
B.過(guò)程①和都③只發(fā)生在酵母細(xì)胞的線粒體中
C.過(guò)程③和④都需要氧氣的參與
D.過(guò)程①~④所需的最適溫度基本相同
【答案】C
【解析】本題考查果酒果醋制作過(guò)程的反應(yīng)條件等的區(qū)別。①過(guò)程有氧無(wú)氧條件均可以發(fā)生，②過(guò)程只能發(fā)生在無(wú)氧條件下，A項(xiàng)錯(cuò)誤。①在酵母菌細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行，③在酵母菌線粒體內(nèi)進(jìn)行，B項(xiàng)錯(cuò)誤。③為有氧呼吸第二、三階段，需要氧氣參與，④需要氧氣參與，C項(xiàng)錯(cuò)誤。過(guò)程①、②、③為酵母菌的呼吸作用，最適宜溫度約為20°C左右；④的最適宜溫度為30—35°C，D項(xiàng)錯(cuò)誤。
3、（10北京卷）在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí)，正確的操作是
Ａ．讓發(fā)酵裝置接受光照 Ｂ．給發(fā)酵裝置適時(shí)排氣
Ｃ．向發(fā)酵裝置通入空氣 Ｄ．酵母菌裝置放在45℃處
【答案】B
【解析】本題考查果酒制作的知識(shí)。此考點(diǎn)在高考中出現(xiàn)的次數(shù)較少。在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵，發(fā)酵裝置不需要接受光照，發(fā)酵時(shí)也不能通入空氣，一般將發(fā)酵溫度控制在18～25℃。
4、（2010山東高考理綜）生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類(lèi)對(duì)化石燃料的消耗，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油（如下圖）。
用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易發(fā)揮，宜選用_____、_____方法從油料作物中提取。
（2）篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選擇培養(yǎng)基中的添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供____，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是____法。
（3）測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用_____法直接計(jì)數(shù)；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)______，以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)技術(shù)，可利用______技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的_____技術(shù)。
【答案】（1）壓榨；萃取。（注：兩空順序無(wú)先后）
（2）碳源；高壓蒸汽滅菌
（3）顯微鏡直接計(jì)數(shù)；酶活性（或：酶活力）
固定化梅（或：固定化細(xì)胞）
（4）PCR（或：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）
【解析】(1）因?yàn)橹参镉筒粨]發(fā)，所以不適合采用蒸餾法提取，應(yīng)用壓榨法或萃取法提取。
（2）植物油中不含礦質(zhì)元素，只為微生物提供碳源。培養(yǎng)基適合用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。
（3）測(cè)定微生物的數(shù)量，可以用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。分離出的脂肪酶要對(duì)其活性進(jìn)行檢測(cè)，以確定其實(shí)用價(jià)值。可以利用酶固定技術(shù)重復(fù)使用脂肪酶。
（4）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增基因。
5、（10海南卷）葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生葡萄酒，請(qǐng)利用相關(guān)的知識(shí)回答問(wèn)題：
（1）利用葡萄制作葡萄酒的過(guò)程中，發(fā)揮作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）該微生物通過(guò)無(wú)氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，產(chǎn)生的終產(chǎn)物是＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。
（3）甲、乙、丙三位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵，如圖所示。發(fā)酵過(guò)程中，每隔一段時(shí)間均需排氣一次。據(jù)圖分析，甲和丙同學(xué)的操作有誤，其中甲同學(xué)的錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異常現(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同學(xué)的錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿＿，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異常現(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述發(fā)酵過(guò)程結(jié)束后，甲、乙、丙同學(xué)實(shí)際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。
（4）在上述制作葡萄酒的過(guò)程中，假設(shè)乙同學(xué)的某一步驟操作錯(cuò)誤導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開(kāi)，該操作錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
【答案】（1）酵母菌 （2）葡萄糖　　乙醇　CO2
（3）未夾住發(fā)酵瓶的充氣管　　發(fā)酵液從充氣管流出，發(fā)酵液變酸
瓶中發(fā)酵液過(guò)多，淹沒(méi)了排氣管在瓶?jī)?nèi)的管口　　　葡萄醋（或果醋） 　葡萄酒（或果酒）　　
葡萄酒（或果酒） （4）未及時(shí)排氣
【解析】本題考查制作果酒所用的微生物、發(fā)酵裝置和發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題。從葡萄酒生產(chǎn)所用的微生物的代謝特點(diǎn)、發(fā)酵過(guò)程中裝置充氣口和放氣口的控制入手解答該題。酵母菌無(wú)氧呼吸可以產(chǎn)生酒精和CO2，是葡萄酒制作過(guò)程中發(fā)揮作用的微生物。酵母菌只有在無(wú)氧條件下，才能進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；甲裝置的充氣口始終開(kāi)放，不能創(chuàng)造瓶?jī)?nèi)無(wú)氧環(huán)境，不能用來(lái)生產(chǎn)果酒；在有氧條件下，醋酸菌可以能利用葡萄糖產(chǎn)生醋酸。酵母菌在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的CO2導(dǎo)致乙裝置中氣壓升高，要定期打開(kāi)排氣管進(jìn)行放氣。丙裝置瓶中發(fā)酵液過(guò)多，淹沒(méi)了排氣管在瓶?jī)?nèi)的管口，不利于放氣；同時(shí)導(dǎo)致瓶?jī)?nèi)氧氣過(guò)少，不利于發(fā)酵前期酵母菌的大量繁殖。
6、（10江蘇卷）右圖1表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作，圖2是利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵的示意圖．下列敘述正確的是
A．剮溶化的海藻酸鈉應(yīng)迅速與活化的酵母菌混合制備混合液-
B．圖1中X溶液為溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠
C．圖2發(fā)酵過(guò)程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸
D．圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中
【答案】BCD
【解析】本題考查了固定化細(xì)胞技術(shù)的操作過(guò)程。熔化的海藻酸鈉應(yīng)冷卻后與活化的酵母細(xì)胞混合，A項(xiàng)錯(cuò)誤；圖1中氯化鈣溶液可使海藻酸鈉形成凝膠珠，B項(xiàng)正確；圖2中要進(jìn)行攪拌以使培養(yǎng)液與細(xì)胞充分接觸，C項(xiàng)正確；圖1中制備的凝膠珠要以過(guò)洗滌再移到圖2裝置中，D項(xiàng)正確。
7、（10新課標(biāo)）下列是與芳香油提取相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答：
（1）玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液 (是、不是)純的玫瑰精油，原因是 。
（2）當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過(guò)程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和 。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢(shì)是 。
（3）如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，則精油提取量會(huì) ，原因是 。
（4）密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度 的地方，目的是 。
（5）某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的變化趨勢(shì)如圖所示。提取精油時(shí)采摘花的最合適時(shí)間為 天左右。
(6)從薄荷葉中提取薄荷油時(shí) (能、不能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是 。
【答案】⑴易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定 ；不是；玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，所得到的是油水混合物；（2）蒸餾溫度 在一定時(shí)間內(nèi)提取量隨蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，一定時(shí)間后提取量不再增加；（3）下降 部分精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流失；（4）較低 減少揮發(fā)；（5）a；（6）能 薄荷油和玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似
【解析】本題以曲線圖為信息載體，考查植物芳香油的提取方法及影響出油率的因素，及識(shí)記、理解、分析判斷、應(yīng)用和獲取有效信息的能力。從圖形中能獲取有效信息、能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解答實(shí)際問(wèn)題是正確解答該題的關(guān)鍵。（1）植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等，具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定。而水蒸氣蒸餾法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)，形成油 INCLUDEPICTURE "http://211.94.188.149:8003/quesFile/gzsw/2010-06-09/32cb840f-4725-4e8d-88f2-7ad3124a074b/ques.files/CvOqUPAHMaC/DOCUME~1.png" \* MERGEFORMATINET 水混合物，冷卻后，混合物又會(huì)重新分出油層和水層。玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，所以運(yùn)用水蒸氣蒸餾法提取，收集到的蒸餾液為油水混合物。（2）蒸餾時(shí)許多因素都會(huì)影響產(chǎn)品的品質(zhì)，如蒸餾溫度、時(shí)間等。在一定范圍內(nèi)隨著蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)，精油的提取量會(huì)增加，但因原料量等條件一定，故超過(guò)一定時(shí)間后，提取量不再增加。(3)蒸餾過(guò)程中要冷卻，讓混合物重新分出油層和水層。若不冷卻則會(huì)有部分玫瑰精油隨水蒸氣揮發(fā)而流失，使精油提取量下降。（4）因玫瑰精油易揮發(fā)，故密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰油玫瑰油應(yīng)存放在溫度較低的地方，以減少玫瑰精油的揮發(fā)。（5）提取精油時(shí)采摘花的最適時(shí)間為花中精油的相對(duì)含量最高的時(shí)間，即a天左右。（6）因薄荷油和玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似，易揮發(fā)、難溶于水等；故也可用于玫瑰精油相同的方法提取。
8、（10浙江自選模塊）題號(hào)：17 科目：生物“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分）
請(qǐng)?jiān)跇?biāo)有序號(hào)的空白處填空，并將序號(hào)及相應(yīng)答案寫(xiě)在答題紙上，每空1分，共10分。某同學(xué)進(jìn)行蘋(píng)果汁制作實(shí)驗(yàn)，工藝如下圖所示。
（1）圖中用的溶液浸泡蘋(píng)果的目的是______①___________。黑曲霉提取液中含有的_____②____可水解果膠，從而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通過(guò)____③______方式將酶固定化，酶被固定在用蒸餾水洗滌固定化柱是為了除去________④_________。
（2）實(shí)驗(yàn)中，操作流程A和B的先后順序?yàn)開(kāi)________⑤________。在蘋(píng)果汁澄清過(guò)程中，應(yīng)關(guān)閉的流速調(diào)節(jié)閥是_______⑥__________。要測(cè)定從固定化柱流出的蘋(píng)果汁中式否還有果膠，可取一定量的果汁與等量的_______⑦_(dá)_______混合，如果出現(xiàn)_______⑧________現(xiàn)象，說(shuō)明果膠還沒(méi)有被完全水解。為使果膠完全水解，應(yīng)將流速調(diào)____⑨______。 試驗(yàn)后，將洗滌過(guò)的固定化柱在低溫環(huán)境中保存若干天，該固定化柱仍可用于蘋(píng)果汁制作實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明固定化酶可被__⑩_____使用。
【答案】（1）①消毒 ②果膠酶 ③吸附 ④未被固定的酶等 （2）⑤AB ⑥閥1 ⑦乙醇 ⑧渾濁（沉淀） ⑨ 慢
【解析】本題考查蘋(píng)果汁制作過(guò)程的反應(yīng)條件注意事項(xiàng)，操作過(guò)程中需注意的細(xì)節(jié)。需要學(xué)生對(duì)課本知識(shí)熟悉，培養(yǎng)學(xué)生學(xué)以致用的學(xué)習(xí)態(tài)度，從現(xiàn)在生物學(xué)在生活中的應(yīng)用區(qū)激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。在制作工藝中必須對(duì)原材料消毒，這樣才能保證后續(xù)試驗(yàn)的成功。KMnO4是強(qiáng)氧化劑，可以起到對(duì)蘋(píng)果的消毒作用。
9.(2010江蘇卷)某生物興趣小組開(kāi)展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下：
材料處理：稱(chēng)取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份l0g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于一20℃條件下保存24 h。
DNA粗提取：
第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入l5 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過(guò)濾。取濾液備用。
第二步：先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。
第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol／L NaCl溶液溶解上述絮狀物。
DNA檢測(cè)：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑。混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。
材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃
20℃ + + + + + +
-20℃ + + + + + + + + +
分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程，回答下列問(wèn)題：
(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱(chēng)是 。
(2)第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少 。
(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。
①結(jié)論1：與20℃相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在-20℃條件下保存，DNA的提取量較多。
結(jié)論2： 。
②針對(duì)結(jié)論I．請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專(zhuān)? 。
(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是： ，然后用體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精溶液使DNA析出。
【答案】（1）探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響 （2）DNA斷裂 （3）①等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的DNA量最多 ②低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢 （4）將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混和，靜置一段時(shí)間，吸取上清液
【解析】本題以實(shí)驗(yàn)過(guò)程和結(jié)果為載體，考查DNA粗提取與鑒定的基本原理、過(guò)程及實(shí)驗(yàn)的分析能力。熟記實(shí)驗(yàn)原理、能從表格中獲取準(zhǔn)確信息是正確解答該題的關(guān)鍵。（1）從表格可以看出，該實(shí)驗(yàn)有兩個(gè)自變量：材料和溫度。所以該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱(chēng)為探究不同材料和不同溫度對(duì)DNA提取量的影響。低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢，提取的DNA較多。（2）第二步中用玻璃棒攪拌的目的是獲取DNA絮狀物，所以若速度快，易造成DNA斷裂。（3）本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論可從兩個(gè)方面來(lái)考慮：①相同材料在不同溫度下的結(jié)論；②不同材料在相同溫度下的結(jié)論。（4）氯仿能使蛋白質(zhì)變性，而對(duì)DNA影響極小，所以可將第三步獲得的溶液與氯仿混合，又氯仿密度大于水，所以蛋白質(zhì)沉淀位于溶液下部，DNA位于上清液中。
【2009高考真題之－－生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題】
1.（09江蘇生物）23．下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有（多選）21世紀(jì)教育網(wǎng)
A．提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞21世紀(jì)教育網(wǎng)
B．用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)21世紀(jì)教育網(wǎng)
C．蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA21世紀(jì)教育網(wǎng)
D．蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化21世紀(jì)教育網(wǎng)
【答案】BD
【解析】本題考查DNA 和蛋白質(zhì)提取實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié)．A 選項(xiàng)中，如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞則需研磨：用2 mol / L 的Nacl容液溶解DNA ，然后過(guò)濾出蛋白質(zhì)，再降低NaCI 溶液的濃度，析出DNA 。 DNA 和蛋白質(zhì)樣品都是帶負(fù)電荷的，從負(fù)極向正極移動(dòng)，移動(dòng)的距離都和樣品的分子量有關(guān)。C中透析用以除去小分子物質(zhì)，而DNA 是大分子物質(zhì)。
2.（09江蘇生物）22．加工橘子罐頭，采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)，可減少污染。下列生長(zhǎng)在特定環(huán)境中的4類(lèi)微生物，可以大量產(chǎn)生所用酶的有 （多選）
A．生長(zhǎng)在麥麩上的黑曲霉 B．生長(zhǎng)在酸奶中的乳酸菌
C．生長(zhǎng)在棉籽殼上的平菇 D．生長(zhǎng)在木屑上的木霉
【答案】ACD
【解析】由于橘絡(luò)的主要成分是纖維素，根據(jù)酶的專(zhuān)一性，可知要分解橘絡(luò)需要的酶是纖維素酶。麥麩、棉籽殼、木屑的主要成分是纖維素，所以生長(zhǎng)它們上面的黑曲霉、平菇、木酶能產(chǎn)生纖維素酶，可以利用。由于乳酸菌的培養(yǎng)基為酸奶，其主要成分是蛋白質(zhì)，不含纖維素，所以乳酸菌不能產(chǎn)生纖維素酶。
3.（09江蘇理綜）31. 酶解法制備原生質(zhì)體的原理是利用酶溶液對(duì)細(xì)胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛（以植物為食）消化腺中提取；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實(shí)驗(yàn)小組取無(wú)菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題。
試管編號(hào)項(xiàng)目 I Ⅱ Ⅲ Ⅳ V Ⅵ
蒸餾水（mL） 2 O 1 1 1 1
緩沖液（mL） 0 2 1 0.5 0.5 0.5
果膠酶液（mL） O 0 O 0.5 O 0
蝸牛酶液（mL） O 0 O O 0.5 0
纖維素酶液（mL） 0 O 0 O 0 0.5
實(shí)驗(yàn)結(jié)果（綠色深淺程度） － － － +++ ++++ ++
（注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無(wú)顯著變化）
（1）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需要輕搖試管，其目的是 ，使原生質(zhì)體從葉小片中游離出來(lái)，以便觀察懸浮液綠色的深淺。
（2）從綠色的深淺可推測(cè)：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有 等多種酶。該實(shí)驗(yàn)中 是空白對(duì)照組，其設(shè)置意義是 。
（3）用網(wǎng)篩過(guò)濾原生質(zhì)體到離心管內(nèi)，離心后收集沉淀物，并用 洗滌。
（4）原生質(zhì)體是否符合要求還需進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)的方法是 。
【答案】（1）為了使細(xì)胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果
（2）果膠酶和纖維素酶 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 排除無(wú)關(guān)變量的干擾
（3）等滲溶液
（4）低滲漲破法
【解析】本題考查有關(guān)酶的催化效率的實(shí)驗(yàn)，（1）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需要輕搖試管，可以使細(xì)胞壁與酶充分接觸，可以提高酶解效果（2）蝸牛以植物為食，所以唾液酶中含有果膠酶和纖維素酶，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ沒(méi)有添加酶溶液為空白對(duì)照組。其目的是排除無(wú)關(guān)變量的干擾。（3）離心后收集沉淀物，并用等滲溶液清洗，目的是保持細(xì)胞正常形態(tài)。（4）要用低滲漲破法來(lái)檢驗(yàn)原生質(zhì)體是否符合要求，若沒(méi)有細(xì)高胞考壁資則可源以網(wǎng)漲破，有則不能漲破。
4.（09上海生物）9．存在于鹽湖和熱泉中的兩類(lèi)細(xì)菌都具有的特征是
A. 在極端環(huán)境下進(jìn)行遺傳物質(zhì)的復(fù)制
B. 對(duì)利福平敏感
C. 在極端環(huán)境下都不進(jìn)行分裂生殖
D. 都沒(méi)有細(xì)胞壁
【答案】A
【解析】?jī)深?lèi)細(xì)菌既然能在鹽湖和熱泉生存，必定適應(yīng)了環(huán)境，一定會(huì)進(jìn)行遺傳物質(zhì)的復(fù)制和分裂生殖；革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)利福平效果較為敏感；細(xì)菌是有細(xì)胞壁的。
5.（09上海理科綜合能力）16. 在光照下，將等細(xì)胞數(shù)量的衣藻和大腸桿菌分別接種到只含無(wú)機(jī)鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，結(jié)果是（虛線和實(shí)線分別表示大腸桿菌和衣藻的生長(zhǎng)曲線）
【答案】C
【解析】衣藻和大腸桿菌分別為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型，沒(méi)有有機(jī)物，大腸桿菌不能生長(zhǎng)繁殖。
6.（09廣東文基）72．嫩肉粉是以蛋白酶為主要成分的食品添加劑，就酶的作用特點(diǎn)而言，下列使用方法中最佳的是
A．炒肉的過(guò)程中加入
B．肉炒熟后起鍋前加入
C．先用沸水溶解后與肉片混勻，炒熟
D．室溫下與肉片混勻，放置一段時(shí)間，炒熟
【答案】D
【解析】本題考查酶的使用方法，酶的活性容易受到溫度，酸堿度影響而失活，所以要保持酶的活性，才能使之發(fā)揮作用。ABC在反應(yīng)之前都經(jīng)高溫處理了，所以酶失去活性，只有D，先讓酶反應(yīng)，后炒熟，不影響酶的作用發(fā)揮。
7.（09廣東A生物）38．（1）商品化植酸酶主要來(lái)自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過(guò)程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生 ，可根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進(jìn)一步測(cè)定植酸酶活性。活性測(cè)定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時(shí)間 表示。
（2）利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖：
Ⅰ中的主要成分為 ；Ⅱ中包含多種酸酶等多種蛋白質(zhì)。請(qǐng)寫(xiě)出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。
（3）為建設(shè)基因工程菌，可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應(yīng)包含多次循環(huán)，每次循環(huán)包括三步： 。反應(yīng)過(guò)程中打開(kāi)模板DNA雙鏈的方法是 。
【答案】（1）透明圈 植酸鈉的消耗量（肌醇和磷酸的生成量）
（2）小分子雜質(zhì)
凝膠色譜法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間分子大小，吸附性質(zhì)等差異進(jìn)行純化。（或電泳法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷，分子大小等差異進(jìn)行純化。）
（3）變性，復(fù)性，和延伸 加熱
（4）蛋白酶，脂肪酶，纖維素酶
【解析】本題考查對(duì)微生物的分離和培養(yǎng)，蛋白質(zhì)的純化，酶活性鑒定等知識(shí)，結(jié)合實(shí)際應(yīng)用。
8.（09全國(guó)理綜Ⅰ卷）3.下列關(guān)于通過(guò)發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸的敘述，錯(cuò)誤的是
A.發(fā)酵時(shí)需要不斷通入無(wú)菌空氣，否則會(huì)積累乳酸
B.發(fā)酵時(shí)常采用的培養(yǎng)基為液體天然培養(yǎng)基
C.從自然界分離的野生型菌株可直接用于生產(chǎn)
D.當(dāng)菌體生長(zhǎng)進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí)，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物可提高谷氨酸產(chǎn)量
【答案】C
【解析】發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸，溶氧不足，會(huì)產(chǎn)生乳酸或琥珀酸；培養(yǎng)基通常有豆餅的水解液、玉米漿、尿素、磷酸氫二鉀、氧化鉀、硫酸鎂、生物素等配制而成，呈液體狀態(tài)，因此是液體天然培養(yǎng)基；從自然界分離的野生型菌株，產(chǎn)量一般都比較低，不能滿(mǎn)足工業(yè)上的需要，通常都要用人工誘變的方法處理，使菌種產(chǎn)生突變，再?gòu)闹泻Y選出符合要求的優(yōu)良菌種，才能用于生產(chǎn)。當(dāng)菌體生長(zhǎng)進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí)，要及時(shí)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物以滿(mǎn)足菌體的營(yíng)養(yǎng)需求以提高谷氨酸的產(chǎn)量。故C不正確。
9.（09山東理綜）34.人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：
請(qǐng)回答：
（1）配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行 。接種前，要對(duì)人參根進(jìn)行 。
（2）用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做 。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于 污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于 污染。
（3）用少量 酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。
（4）人參皂苷易溶于水溶性（親水性）有機(jī)溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用 方法，操作時(shí)應(yīng)采用 加熱。
【答案】（1）滅菌 消毒 （2）外植體 真菌（霉菌） 細(xì)菌 （3）果膠 （4）萃取 水浴
【解析】山東理綜生物試題選修Ⅰ試題歷年來(lái)，立足課本，主要考察課本的基礎(chǔ)知識(shí)，題目較簡(jiǎn)單。今年仍然立足課本，以植物組織培養(yǎng)為材料背景考察了植物組織培養(yǎng)過(guò)程中涉及到的的培養(yǎng)基及消毒滅菌的相關(guān)的知識(shí)，及污染后的菌落特征的比較。同時(shí)考查了選修一中關(guān)于物質(zhì)的提取和鑒定的專(zhuān)題，跨度較大，考查的知識(shí)面較廣。
（1）接種前，要對(duì)材料進(jìn)行消毒（不能填滅菌，滅菌時(shí)是采用強(qiáng)烈的因素殺菌），，配制培養(yǎng)基并分裝后要用滅菌鍋滅菌。
（2）比較菌落特征：真菌污染：有顏色的絨毛狀菌落；細(xì)菌污染：有光澤的黏液狀菌落
（3）利用果膠酶處理愈傷組織可以獲得單個(gè)的細(xì)胞
（4）人參皂苷易溶于親水性有機(jī)溶液，故而采用萃取的方法可以從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜。
10.（09上海物）36．回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問(wèn)題。
（1）用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱(chēng)為_(kāi)_______。
（2）組織培養(yǎng)中的細(xì)胞，從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)_______。
（3）在再分化階段所用的培養(yǎng)基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細(xì)胞群的變化情況如下圖所示，據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系：
1）當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時(shí)，______________________________；
2）________________________________________________________；
3）________________________________________________________；
（4）若植物激素Y是生長(zhǎng)素，在植物組織培養(yǎng)中其主要作用是________；則植物激素X的名稱(chēng)是________________。
（5）生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性狀，其原因是________________________________。
【答案】（1）外植體 （2）去分化（脫分化）
（3）1）未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織；
2）當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時(shí)，未分化細(xì)胞群分化形成芽；
3）當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時(shí)，未分化細(xì)胞群分化形成根。
（4）促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)（伸長(zhǎng)）、分裂和分化 細(xì)胞分裂素
（5）組織培養(yǎng)形成試管苗的過(guò)程屬于無(wú)性生殖，后代不發(fā)生性狀分離。
【解析】本題主要考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)。21世紀(jì)教育網(wǎng)
（1）植物組織培養(yǎng)的材料叫外植體；
（2）植物組織培養(yǎng)的核心過(guò)程是脫分化與再分化，脫分化指由分化狀態(tài)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)，再分化指由未分化狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)；
（3）仔細(xì)分析所給示意圖，可知植物激素X與植物激素Y濃度比為1時(shí)，利于愈傷組織的形成，大于1時(shí)利于細(xì)胞群分化出芽，小于1時(shí)利于細(xì)胞群分化出根；
（4）生長(zhǎng)素在植物組織培養(yǎng)中主要作用是促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂和分化，植物組織培養(yǎng)過(guò)程中除需要生長(zhǎng)素外還必需細(xì)胞分裂素，二者共同起作用；
11.（09海南生物）25．請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)的問(wèn)題：
（1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、_____和_____。
（2）芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于_____，易溶于_____，因此可用_____作為提取劑來(lái)提取芳香油。
（3）橘子果實(shí)含有芳香油，通常可用_____作為材料提取芳香油，而且提取時(shí)往往選用新鮮的材料，理由是_____。
（4）對(duì)材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是_____。
（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時(shí)間后，芳香油將分布于液體的_____層，原因是_____。加入氯化鈉的作用是_____。
（6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無(wú)水硫酸鈉，此劑的作用是_____。
【答案】（1）蒸餾法 萃取法 （2）水 有機(jī)溶劑 有機(jī)溶劑
（3）橘子皮 芳香油含量較高 （4）過(guò)濾
（5）上 油層的密度比水層小 增加水層密度，使油和水分層
（6）吸收芳香油中殘留的水分（3分）
【解析】本題考查實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)知識(shí)，屬于對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的考查。熟記有關(guān)知識(shí)是正確解答該題的關(guān)鍵。（1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、蒸餾法、萃取法。（2）見(jiàn)答案。（3）一般采用新鮮的橘子皮來(lái)提取橘皮精油，因?yàn)樾迈r的含有芳香油多。（4）除去液體中的固體常用方法是過(guò)濾。（5）芳香油密度比水小，且不溶于水，會(huì)浮在液體的表面。加入氯化鈉會(huì)增加水層密度，使油和水分層。（6）無(wú)水硫酸鈉的作用可以吸收芳香油中殘留的水分。
12.（09遼寧寧夏理綜）40. （1）在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。
（2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。
（3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_______。
（4）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。
（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_________。
（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。
【答案】（1）溫度 酸堿度 易培養(yǎng) 生活周期短
（2）滅菌 消毒 損傷DNA的結(jié)構(gòu)
（3）比例合適
（4）鑒定(或分類(lèi))
（5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.
（6）滅菌
【解析】（1）大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短
等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。
（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒， 紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。
（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。
（4）對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。
（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。
（6）因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。
13.（09上海理科綜合能力）39.氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，原因不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案（圖1）篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培養(yǎng)基配方如表1。
（1）配制Ⅱ號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的____________。
（2）培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)PH的先后順序是____________。
（3）從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基和Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基分別屬于____________培養(yǎng)基和____________培養(yǎng)基。在Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是____________。
（4）在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體會(huì)變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱(chēng)為
____________。
（5）將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長(zhǎng)曲線（如圖2）。從圖2可知SP1菌在____________培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，其原因是____________。
【2011最新模擬題之－－生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題】
1.（2011河南平頂山）下列常用的無(wú)菌操作中錯(cuò)誤的是 ( )
A．無(wú)菌操作不要求殺死培養(yǎng)基中的一切細(xì)菌
B．用酒精擦拭雙手方法對(duì)操作者進(jìn)行消毒
C．實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行
D．玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭
【答案】D
【解析】本題考查微生物培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌操作。應(yīng)從無(wú)菌操作的概念和基本方法入手解答本題，要注意對(duì)不同的對(duì)象，要用不同的消毒或滅菌方法。無(wú)菌技術(shù)是用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物，而不是殺死培養(yǎng)基中的一切細(xì)菌，A正確。對(duì)操作者應(yīng)用較溫和的方法進(jìn)行消毒，B正確。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基，C正確。對(duì)無(wú)菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌的方法徹底消滅其中的微生物，用酒精擦拭不能達(dá)到目的，D錯(cuò)誤。
2.（2011山東模擬）苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 （ ）
A.圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源
B.如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法
C.若圖中④為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源
D.使用平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落
【答案】C
【解析】本題以“從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株”為載體，考查用選擇培養(yǎng)基分離微生物的基本方法。解題時(shí)，應(yīng)從所分離微生物與其他微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)或理化條件的異同、實(shí)驗(yàn)各個(gè)過(guò)程的原理入手進(jìn)行分析。用苯酚作為選擇培養(yǎng)基的特殊的碳源，也是微生物的能源物質(zhì)，所以會(huì)影響其生長(zhǎng)。測(cè)定培養(yǎng)液中細(xì)菌數(shù)目多用稀釋涂布平板法。若④為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則④應(yīng)含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚作為唯一碳源。使用稀釋涂布平板法或平板劃線法都可以在⑥上獲得單菌落。
3.（2011山西汾陽(yáng)月考）分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是( )
A．經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上
B．富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)纖維素分解菌少
C．可通過(guò)定時(shí)測(cè)定葡萄糖產(chǎn)量的變化來(lái)衡量纖維素分解菌培養(yǎng)液中的纖維素酶產(chǎn)量
D．對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上
【答案】A
【解析】本題考查對(duì)土壤中分解纖維素的微生物的分離過(guò)程。從實(shí)驗(yàn)的原理、基本流程入手來(lái)解答該題。經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋?zhuān)拍軐悠吠坎嫉借b別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)可省略；在纖維素酶的作用下，纖維素能被水解成葡萄糖。所以可通過(guò)定時(shí)測(cè)定葡萄糖產(chǎn)量的變化來(lái)衡量纖維素分解菌培養(yǎng)液中的纖維素酶產(chǎn)量；設(shè)置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。
4.（2011新課標(biāo)單元卷）下列探究某種加酶洗衣粉需要的最適溫度的實(shí)驗(yàn)正確的是
A．取一系列不同溫度、其他條件相同的水，加入相同的污物及等量加酶洗衣粉，看哪一個(gè)溫度中酶的效果最好
B．在不同溫度的水中，加入不等量洗衣粉，看哪種效果好
C．將加酶洗衣粉加入30℃水中發(fā)現(xiàn)不如加到45℃水中洗滌效果好，說(shuō)明45℃為最適溫度
D．將加酶洗衣粉與普通洗衣粉分別加入37℃的水中洗滌同樣的污物，發(fā)現(xiàn)加酶洗衣粉效果好，說(shuō)明加酶洗衣粉的最適溫度為37℃
【答案】A
【解析】本題考查探究某種加酶洗衣粉需要的最適溫度的實(shí)驗(yàn)。解題時(shí)，在區(qū)分好自變量、因變量和無(wú)關(guān)變量基礎(chǔ)上，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則，對(duì)其進(jìn)行科學(xué)的控制。 本實(shí)驗(yàn)的自變量為溫度，在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中，除了要觀察的變量外，其他變量都應(yīng)保持相同，B選項(xiàng)錯(cuò)誤；C選項(xiàng)可以說(shuō)明加酶洗衣粉在45℃時(shí)比30℃時(shí)洗滌效果好，但不能說(shuō)明45℃為最適溫度，錯(cuò)誤；D選項(xiàng)只能比較加酶洗衣粉與普通洗衣粉的洗滌效果，不能得出加酶洗衣粉的最適溫度，錯(cuò)誤。
5．（2011浙江十校聯(lián)合體）某同學(xué)進(jìn)行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果比較”課題研究。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A．設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，分別使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶洗衣粉
B．洗衣粉用量、污漬種類(lèi)和冼滌溫度等無(wú)關(guān)變量全部相同且適宜
C．可根據(jù)污漬完全洗凈所需時(shí)間的差異得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論
D．應(yīng)設(shè)計(jì)一個(gè)既不用加酶洗衣粉洗滌也不用普通洗衣粉洗滌的對(duì)照
【答案】A
【解析】本題考查加酶洗衣粉洗滌效果的實(shí)驗(yàn)問(wèn)題。在解答本題時(shí)，首先應(yīng)弄清楚實(shí)驗(yàn)的目的。本實(shí)驗(yàn)的目的是比較加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果，自變量為洗衣粉的種類(lèi)（即加酶洗衣粉和普通洗衣粉），而A選項(xiàng)給予的都是加酶洗衣粉，錯(cuò)誤。除了自變量，凡是影響該實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)的因素（如洗衣粉用量、污漬種類(lèi)和冼滌溫度等）全是無(wú)關(guān)變量，各組應(yīng)保持無(wú)關(guān)變量相同且適宜，B正確。污漬完全洗凈所需時(shí)間越長(zhǎng)，說(shuō)明洗滌效果不明顯；污漬完全洗凈所需時(shí)間越短，說(shuō)明洗滌效果越明顯，C正確。應(yīng)該設(shè)置一空白對(duì)照來(lái)說(shuō)明洗衣粉的作用，D正確。
6．（2011江蘇泰州9月月考）下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)操作注意事項(xiàng)或應(yīng)用的敘述中，正確的是
A．在進(jìn)行果酒發(fā)酵過(guò)程中要定期“放氣”，并注意防止外界細(xì)菌進(jìn)入發(fā)酵瓶
B．果醋制作時(shí)需要經(jīng)過(guò)先通氣發(fā)酵后密封發(fā)酵兩個(gè)主要階段
C．可以利用DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小的特點(diǎn)將DNA與雜質(zhì)分離
D．電泳法可以用于蛋白質(zhì)、DNA、RNA等生物大分子的分離
【答案】ACD
【解析】醋酸桿菌為好氧性生物；制作果醋時(shí)，要始終給發(fā)酵罐通入氧氣。
7．（2011安徽“江南十校”聯(lián)考）有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述，不正確的是（ ）
A．用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，可以用相同的培養(yǎng)基
B．若將加酶洗衣粉設(shè)計(jì)為加酶搓衣板，會(huì)提高酶的利用率，減少污染物的排放
C．誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成器官過(guò)程需要無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境
D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分一樣
【答案】D
【解析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基成分復(fù)雜，其中含有動(dòng)物血獎(jiǎng)、血清；而植物培養(yǎng)基成分簡(jiǎn)單，無(wú)動(dòng)物血獎(jiǎng)、血清。
8．（2011江蘇南京金陵中學(xué)）下列實(shí)驗(yàn)裝置可用于生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，相關(guān)敘述不正確的是(　　)
A. 裝置甲可用于果酒或腐乳的制作
B. 裝置乙可用于血紅蛋白提取和分離過(guò)程中對(duì)裝于Ⅱ中的樣品的處理
C. 裝置丙可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作
D. 使用裝置丁進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離時(shí)，Ⅱ中為待分離的樣品
【答案】D
【解析】使用裝置丁進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離時(shí)，待分離的樣品在Ⅰ中。
9．（2011黑龍江哈三中月考）下面是果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程和某同學(xué)設(shè)計(jì)的果酒和果醋的發(fā)酵裝置。根據(jù)圖示回答下列問(wèn)題：
（1）完成圖1中的實(shí)驗(yàn)流程，則矩形框內(nèi)應(yīng)為 。
（2）果酒和果醋的制作分別利用了 和 （填生物名稱(chēng)）兩種微生物的發(fā)酵原理。由果酒轉(zhuǎn)變成果醋的制作時(shí)，需要改變的環(huán)境條件是 和 ，主要原因是 （答出兩點(diǎn)）。
（3）圖2裝置中的充氣口在 過(guò)程中要關(guān)閉，而排氣口在該過(guò)程中應(yīng)開(kāi)放，目的是用來(lái)排出 產(chǎn)生的 。 排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是 。
（4）果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用 來(lái)檢驗(yàn)，在酸性條件下呈現(xiàn) 色證明有酒精產(chǎn)生。
（5）葡萄是否需要滅菌？為什么？ 。
【答案】（1）醋酸發(fā)酵
（2）酵母菌；醋酸菌；氧氣；溫度30—35℃。醋酸菌是好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足，才能進(jìn)行旺盛的生命活動(dòng)；醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30—35℃。（2分）
（3）酒精發(fā)酵；酵母菌無(wú)氧呼吸；二氧化碳；避免空氣中其它微生物進(jìn)入發(fā)酵裝置（防止空氣中的微生物污染） （4）重鉻酸鉀、灰綠色 （5）不需要，在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中，起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。滅菌會(huì)殺死葡萄皮上附著的酵母菌，使發(fā)酵不能進(jìn)行（2分）
【解析】本題考查果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)裝置、流程、條件控制。解題時(shí)同學(xué)們要充分運(yùn)用酵母菌的代謝特征去分析題目給出的問(wèn)題。用酵母菌制作果酒的后期（酒精生成階段），充氣孔應(yīng)關(guān)閉，創(chuàng)造一個(gè)無(wú)氧環(huán)境；果醋制作過(guò)程中要不斷補(bǔ)充氧氣，要把沖氣孔打開(kāi)。果酒、果醋制作使用的裝置，裝置中的排氣口與一彎曲的膠管連接，可以防止空氣中的微生物進(jìn)入裝置造成污染。酵母菌在無(wú)氧環(huán)境中通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，所以排氣孔排出的氣體中只有二氧化碳；醋酸菌是在有氧環(huán)境條件下產(chǎn)生醋酸的，所以果醋發(fā)酵時(shí)排出的氣體中除了含二氧化碳，還有氧氣。
10．（2011寧夏銀川一中一模）“每天喝一點(diǎn)，健康多一點(diǎn)”，這是 “寧夏紅”率先提出的消費(fèi)理念，將積淀了千百年的枸杞藥食文化和中國(guó)紅文化完美結(jié)合起來(lái)，更增添了品牌的文化魅力和優(yōu)勢(shì)。下圖為“寧夏紅”枸杞果酒生產(chǎn)工藝流程簡(jiǎn)圖，據(jù)圖回答：
選料 → ？ → 粉碎 → 滅菌 → 接種 → 發(fā)酵 → ？ → 果酒
（1）流程中？處的內(nèi)容應(yīng)為_(kāi)____________、________________。
（2）制作果酒時(shí)，溫度應(yīng)該控制在________________，果酒釀造過(guò)程中如果果汁滅菌不合格，含有醋酸桿菌，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸桿菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？說(shuō)明理由。_______、 _________________________________________________________。
（3）果酒制作離不開(kāi)酵母菌，與醋酸桿菌相比，酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是___________________________________________________________________。
（4）枸杞果酒制作過(guò)程中，接種完成后要先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無(wú)菌空氣，目的是_____________。
（5）若要提高果酒的產(chǎn)量，發(fā)酵過(guò)程中關(guān)鍵要控制好哪些條件？___________________
_____________________________。
（6）果酒制作是否成功，需發(fā)酵后用__________________來(lái)鑒定，在___________條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)_____________色。
【答案】（1）沖洗 過(guò)濾 （2）18-25℃ 不能 因醋酸桿菌是好氧型細(xì)菌，而果酒發(fā)酵是無(wú)氧環(huán)境(或因醋酸桿菌需要在有氧且溫度是30～35℃條件下，才能將糖轉(zhuǎn)化成醋酸，而此時(shí)發(fā)酵罐中的條件是無(wú)氧且溫度是18～25℃) （3）在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，增加數(shù)量
（4）有成形細(xì)胞核、有除核糖體以外的多種細(xì)胞器 （5）適宜的溫度、pH、通氣量
（6）重鉻酸鉀溶液 酸性 灰綠色
【解析】本題考查果酒和果醋制作所需要的微生物、實(shí)驗(yàn)裝置和流程、條件控制。解題時(shí)同學(xué)們要充分運(yùn)用酵母菌的代謝特征去分析題目給出的問(wèn)題。祥解見(jiàn)答案。
11．（2011河南鄭州第二次質(zhì)檢）請(qǐng)回答下列與大腸桿菌有關(guān)的問(wèn)題。
（1）從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看，大腸桿菌屬于________________；它的同化作用類(lèi)型是______________。
（2）下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。
根據(jù)用途劃分該培養(yǎng)基屬于_____________（選擇、鑒別）培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基中的碳源是___________________.
（3）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行__________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_____________。靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能___________。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，常用的接種方法是平板劃線法和_________________。通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的_____________。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是___________________。若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)______________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。
（4）以下微生物發(fā)酵生產(chǎn)特定產(chǎn)物時(shí)，所利用主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌相同的是______________.
A．制作果酒 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳
（5）利用培養(yǎng)基不僅可以分離培養(yǎng)微生物，也可以進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。在植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中，也要對(duì)外植體等進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無(wú)菌操作，原因是_______________________________（2分。至少寫(xiě)出兩條）。
【答案】（1）分解者 異養(yǎng)型 （2）鑒別 乳糖、蔗糖、蛋白胨
（3）滅菌 消毒 損傷DNA的結(jié)構(gòu) 稀釋涂布平板法 鑒定（分類(lèi)） 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生（2分） 滅菌 （4）B、C
（5）外植體體積小、抗性差；微生物會(huì)和外植體爭(zhēng)奪培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；并有可能產(chǎn)生對(duì)組織培養(yǎng)有害的物質(zhì)（以上三條答出任意兩條即得2分）
【解析】本題考查有關(guān)微生物的培養(yǎng)。祥解見(jiàn)答案。
12．(2011江西省會(huì)昌中學(xué)月考)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類(lèi)和數(shù)量繁多，同學(xué)們?cè)噲D探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如右圖所示。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：
KH2PO4 1.4g
Na2HPO4 2.1g
MgSO4.7H2O 0.2g
葡萄糖 10g
尿素 1g
瓊脂 15g
將上述物質(zhì)溶解后,用自來(lái)水定容到1000mL
(1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？______________，理由是 ________。
(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是______________，這種培養(yǎng)基屬于 __________培養(yǎng)基。
(3)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的____________和________，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是______________________。
(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用______________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。
(5)下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶和吸管；③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。
需要滅菌的是：______________；需要消毒的是：______________。（填序號(hào)）
(6)在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有（ ）（填序號(hào)）
①由于土樣不同 ②由于培養(yǎng)基污染 ③由于操作失誤 ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照
(7)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入____________，細(xì)菌合成的____________將尿素分解為氨，PH增高，使指示劑變紅色。
【答案】 (1)不能（1分） 缺少植物激素（或缺少植物需要的各種營(yíng)養(yǎng)）（2分）
(2)篩選目的菌 選擇 (3)尿素（1分） 葡萄糖（1分） 為目的菌提供氧氣（1分）
(4)涂布平板法（劃線法）（1分） (5)①和②（1分） ③（1分） (6)①②③（2分）
(7)酚紅指示劑（1分） 脲酶（1分）
【解析】本題考查從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌的方法。解題時(shí)，應(yīng)從分解尿素的細(xì)菌的代謝特征入手，對(duì)整個(gè)過(guò)程中需要控制的環(huán)境條件進(jìn)行分析。尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源，因此原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。由于細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH升高，故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑將變成紅色；這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，可篩選目的菌；其生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖；振蕩培養(yǎng)的目的是提供氧氣；固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)的接種方法常用稀釋涂布平板法或平板劃線法；最后，別忘記如果倒掉培養(yǎng)基，之前應(yīng)滅菌處理。
13．（2011黑龍江省哈三中等四校一模）隨著環(huán)境污染的加劇和石油危機(jī)出現(xiàn)，越來(lái)越多的國(guó)家使用乙醇作為代替燃料，生產(chǎn)中玉米和麥草的秸稈可以用來(lái)生產(chǎn)燃料乙醇，已知秸稈的主要成分是纖維素，回答下列問(wèn)題：
（1）人們首先利用纖維素分解菌將纖維素分解，纖維素分解菌多分布在 的土壤中，該微生物產(chǎn)生的纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般包括三種成分， ， 和 。前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。
（2）從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制 培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的 。
（3）經(jīng)過(guò)梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是 ，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周?chē)欠癞a(chǎn)生 來(lái)篩選纖維素分解菌。當(dāng)利用涂布器涂布平板之后需要對(duì)涂布器進(jìn)行 處理。（添“消毒”或者“滅菌”。
（4）產(chǎn)生葡萄糖后需要用到 （微生物種類(lèi)）發(fā)酵產(chǎn)生酒精，還可以使用 檢測(cè)產(chǎn)物是否為酒精，該試劑在酸性條件下可與酒精反應(yīng)，溶液呈灰綠色。
【答案】（1）富含纖維素 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 （2）選擇 碳源
（3）剛果紅 透明圈 滅菌 （4）酵母菌 重鉻酸鉀2分
【解析】本題考查對(duì)土壤中分解纖維素的微生物的分離過(guò)程的理解。從分解纖維素的微生物的代謝特征和微生物的培養(yǎng)、分離相關(guān)技術(shù)入手解答該題。經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋?zhuān)拍軐悠吠坎嫉借b別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上。由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。如果找不到合適的環(huán)境，可以將濾紙埋在土壤中，過(guò)一個(gè)月左右也會(huì)有能分解纖維素的微生物生長(zhǎng)。在篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物之前，可用含纖維素的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，增加微生物的濃度。剛果紅是一種酸性染料，可與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物；如果有分解纖維素的微生物存在的地方，纖維素被分解，出現(xiàn)透明圈。
14．（2011山西汾陽(yáng)二模）葡萄酒、葡萄汁是日常生活中常用的一類(lèi)飲料。在呈酸性的果汁發(fā)酵液中，紅葡萄皮的色素也會(huì)進(jìn)入發(fā)酵液中，且有酸堿指示劑的作用。據(jù)某些醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)調(diào)查表明，適量飲用紅葡萄酒、葡萄汁，對(duì)人體有著非同小可的意義。隨著人們物質(zhì)文化生活水平的提高，國(guó)內(nèi)紅葡萄酒、葡萄汁的產(chǎn)、銷(xiāo)量均逐年增長(zhǎng)。請(qǐng)根據(jù)有關(guān)材料回答下列問(wèn)題：
（1）在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中，菌種的來(lái)源主要是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。為提高果酒的品質(zhì)，可以直接在果汁中加入人工培養(yǎng)的純凈酵母菌。要篩選得到純凈的酵母菌種，通常使用的培養(yǎng)基按功能來(lái)分稱(chēng)為 ________，如在培養(yǎng)基中加入__________可從細(xì)菌和酵母菌的混合液中分離酵母菌。
（2）在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中常要進(jìn)行消毒和滅菌的工作，常用的消毒方法有：______。滅菌指____________________________________。
（3）為提高果汁的出汁率及使果汁變得澄清，在果汁生產(chǎn)中常用到 。
（4）為提高果酒的品質(zhì)及節(jié)約生產(chǎn)成本，廠家已嘗試使用固定化細(xì)胞技術(shù)。酵母細(xì)胞的固定多采用 。請(qǐng)列出用干酵母和海藻酸鈉制備固定化酵母細(xì)胞的步驟：①酵母細(xì)胞的活化，② ，③ ，④ ，⑤ 。
（5）現(xiàn)有a、b兩個(gè)品牌顏色一樣的紅葡萄酒，其中a品牌是用100%紅葡萄汁釀造，b品牌是以化學(xué)物質(zhì)用人工方法勾兌而成。現(xiàn)提供小蘇打、白醋、小燒杯若干，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)鑒別兩個(gè)品牌的紅葡萄酒，得出正確結(jié)論并說(shuō)明原理。
①步驟1： ；
②步驟2： ；
③結(jié)論： ；
④原理： 。
【答案】（1）選擇培養(yǎng)基 青霉素（抗生素）
（2）①煮沸消毒法、②巴氏消毒法、③紫外線消毒、④化學(xué)藥劑消毒（至少答3種） 使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 （3）果膠酶 （4）包埋法 　 ②配制（物質(zhì)的量濃度為0、05mol/L的）CaCl2溶液，　　③配制海藻酸鈉溶液，　　　④海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合，　　　　⑤固定化酵母細(xì)胞（4分）
（5）（4分）①步驟1：取適量a品牌紅葡萄酒平均加入2只小燒杯中作為第一組，另取等量b品牌紅葡萄酒平均加入2只小燒杯中作為第二組,做好標(biāo)簽；
②步驟2：每組兩只燒杯中分別加入等量的小蘇打、白醋，觀察顏色變化；
③結(jié)論：加小蘇打出現(xiàn)顏色變化的是a品牌；
④原理：a品牌紅葡萄酒中，含有紅葡萄皮的色素，有酸堿指示劑的作用，[加小蘇打（堿性）會(huì)變顏色（黑色）]。
【解析】本題綜合考查了果酒果醋的制作、微生物的培養(yǎng)、固定化酶和固定化細(xì)胞等相關(guān)知識(shí)，祥解見(jiàn)答案。
15．（2011屆江西省樟樹(shù)中學(xué)高三上學(xué)期第四次月考）從自然菌樣中篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定。
（1）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應(yīng)從 環(huán)境采集。
（2）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對(duì)產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇 的培養(yǎng)基，并在 條件下培養(yǎng)。
（3）下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，請(qǐng)分析接種的具體方法。
獲得圖甲效果的接種方法是 ，獲得圖乙效果的接種方法是 。
（4）配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在熔化后分裝前必須進(jìn)行 ，接種前要進(jìn)行 。在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在 條件下進(jìn)行。
【答案】（1）海灘等高鹽 （2）以淀粉為唯一碳源 高溫 （3）稀釋涂布平板法 平板劃線法 （4）pH調(diào)整 高壓蒸汽滅菌 無(wú)菌
【解析】本題考查微生物的分離、培養(yǎng)、純化的有關(guān)知識(shí)。解題時(shí)，對(duì)菌樣采集必須考慮到所分離的微生物的生理特性和相應(yīng)的土壤特點(diǎn)。培養(yǎng)微生物則要考慮它對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需要和對(duì)氧氣、pH的不同要求。根據(jù)圖甲和乙不難得出甲和乙的接種方法。配制培養(yǎng)基的步驟包括配制培養(yǎng)基、調(diào)節(jié)pH、分裝、包扎、滅菌、擱置斜面等。
16．（2011江西瑞金模擬）據(jù)中國(guó)食品產(chǎn)業(yè)網(wǎng)報(bào)道：纖維素酶從被發(fā)現(xiàn)起就受到世界各國(guó)生物界的關(guān)注。當(dāng)今世界，能源和資源日趨危機(jī)，人們希望能借助纖維素酶將地球上最豐富（占全球總生物量80%）、最廉價(jià)的可再生資源纖維素轉(zhuǎn)化為能直接利用的能源和資源。目前纖維素酶已被廣泛應(yīng)用到醫(yī)藥、食品發(fā)酵、煙草及飼料等各個(gè)領(lǐng)域。
纖維素酶的成本能否下降，是能否實(shí)現(xiàn)纖維素酶在工業(yè)生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用的關(guān)鍵因素。纖維素酶可以從能分解纖維素的細(xì)菌培養(yǎng)液中提取。某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下分離土壤中纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→ →鑒別培養(yǎng)。
⑴請(qǐng)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)流程： 。
⑵尋找纖維素分解菌應(yīng)到 的土壤環(huán)境中。
A．濕潤(rùn) B．富含纖維素 C．富含N、P D．干旱
如果找不到合適的環(huán)境，可采取的辦法是 。
⑶選擇培養(yǎng)的目的是 ，該過(guò)程研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽、以及微量元素配制的培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，該培養(yǎng)基為 （物理特性）培養(yǎng)基，其中加入的化合物A是______________，為微生物的生長(zhǎng)提供_____________。
⑷為了鑒別纖維素分解菌和進(jìn)一步純化菌種，可以在鑒別培養(yǎng)基上加入__________染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用 方法接種到鑒別培養(yǎng)基上，然后挑選產(chǎn)生
的菌落作為菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。
【答案】（1)梯度稀釋 ⑵B ⑶增加微生物的濃度 液體 纖維素 碳源 ⑷剛果紅 　涂布平板法　 透明圈
【解析】本題考查對(duì)土壤中分解纖維素的微生物的分離過(guò)程的理解。從分解纖維素的微生物的代謝特征和微生物的培養(yǎng)、分離相關(guān)技術(shù)入手解答該題。⑴經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋?zhuān)拍軐悠吠坎嫉借b別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上。⑵由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。如果找不到合適的環(huán)境，可以將濾紙埋在土壤中，過(guò)一個(gè)月左右也會(huì)有能分解纖維素的微生物生長(zhǎng)。⑶在篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物之前，可用含纖維素的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，增加微生物的濃度。⑷剛果紅是一種酸性染料，可與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物；如果有分解纖維素的微生物存在的地方，纖維素被分解，出現(xiàn)透明圈。
17（2011新課標(biāo)單元復(fù)習(xí)）PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：
（1）A過(guò)程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過(guò)程的原理敘述，正確的是 。
A.該過(guò)程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵
B.該過(guò)程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵
C.該過(guò)程不需要解旋酶的作用
D.該過(guò)程與人體細(xì)胞的過(guò)程完全相同
（2）C過(guò)程要用到的酶是。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以 加入, （需要/不需要）再添加。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿(mǎn)足的基本條件有: 。
（3）如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“94℃~55℃~72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占 。
（4）如果模板DNA分子共有a個(gè)堿基對(duì)，其中含有胞嘧啶m個(gè)，則該DNA復(fù)制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸個(gè) 。
（5）PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于 。假設(shè)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測(cè)所用DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占 。
【答案】（1）C （2）Taq DNA聚合酶 一次 不需要 DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，同時(shí)通過(guò)控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行 （3）25% （4）（210-1）（a-m） （5）基因突變 75%
【解析】本題考查PCR的過(guò)程、條件。在熟知細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程和PCR過(guò)程的異同點(diǎn)的前提下，會(huì)運(yùn)用DNA復(fù)制的有關(guān)原理來(lái)解答試題。（1）高溫所起的作用類(lèi)似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂湣＃?）C過(guò)程為PCR技術(shù)的延伸階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。Taq DNA聚合酶是耐熱的，高溫下不變性，所以一次性加入即可。（3）PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過(guò)三次循環(huán)，共產(chǎn)生23個(gè)DNA分子，其中有2個(gè)DNA分子含有15N標(biāo)記。（4）在一個(gè)雙鏈DNA分子中，C+T占?jí)A基總數(shù)的一半，故T的數(shù)目為a-m，復(fù)制10次，相當(dāng)于新增加了210-1個(gè)DNA分子。故需補(bǔ)充T的數(shù)目為（210-1）（a-m）。（5）基因中的堿基對(duì)改變屬于基因突變。對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，以后按正常配對(duì)方式進(jìn)行擴(kuò)增，錯(cuò)配鏈作模板擴(kuò)增的都是錯(cuò)誤的DNA分子，原正常鏈擴(kuò)增得到的DNA分子都是正常的DNA分子，故若干次后檢測(cè)所用DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占3/4。
18．（2011江蘇淮安四調(diào)）某同學(xué)使用下列裝置或操作進(jìn)行有關(guān)實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：
（1）用圖甲的裝置制作果酒時(shí)，在營(yíng)養(yǎng)充足的條件下，為適當(dāng)提高果酒生產(chǎn)速率，進(jìn)氣口應(yīng) ；排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連，這樣做的原因是 。
（2）乙圖中加入蒸餾水的目的是 ，用 替代蒸餾水也能達(dá)到相同的結(jié)果。
（3）丙、丁用于提取和分離血紅蛋白，先對(duì)樣品進(jìn)行處理要用圖 裝置進(jìn)行 ；丁圖底端試管中首先收集到的是相對(duì)分子質(zhì)量較 (大／小)的蛋白質(zhì)。
（4）如果用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳處理丁實(shí)驗(yàn)中獲得的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)遷移的取決于 。
【答案】（1）先打開(kāi)后關(guān)閉 防止雜菌污染 （2）降低NaCl溶液的濃度，析出DNA ； 冷卻的無(wú)水乙醇 （3）丙 透析 大 （4）相對(duì)分子質(zhì)量
【解析】（1）用酵母菌制作果酒的后期（酒精生成階段），充氣孔應(yīng)關(guān)閉，創(chuàng)造一個(gè)無(wú)氧環(huán)境；果醋制作過(guò)程中要不斷補(bǔ)充氧氣，要把沖氣孔打開(kāi)。果酒、果醋制作使用的裝置，裝置中的排氣口與一彎曲的膠管連接，可以防止空氣中的微生物進(jìn)入裝置造成污染。（2）（3）（4）見(jiàn)答案。
【2010最新模擬題之－－生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題】
1.（2010屆江蘇省湖西中學(xué)高三診斷）下列關(guān)于果醋制作的說(shuō)法正確的是
A．醋酸菌是好氧菌，在制作過(guò)程中要一直打開(kāi)發(fā)酵瓶
B．在制作葡萄醋的過(guò)程中，溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在18～25℃
C．當(dāng)糖源不足時(shí)，醋酸菌先將酒精轉(zhuǎn)變成乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿?br/>D．醋酸菌在糖源和氧氣充足時(shí)，能將葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳
【答案】C
【解析】在糖源和氧氣充足時(shí)，醋酸菌能將葡萄糖氧化成醋酸；當(dāng)糖源不足時(shí)，醋酸菌先將酒精轉(zhuǎn)變成乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿帷Ｔ谥谱髌咸汛椎倪^(guò)程中，應(yīng)向發(fā)酵瓶?jī)?nèi)充入無(wú)菌空氣，溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在30～35℃。
2. （2010年吉林省長(zhǎng)春市外國(guó)語(yǔ)學(xué)校月考）下圖是果醋和果酒的發(fā)酵裝置，相關(guān)描述錯(cuò)誤的是
A．出料口可以用來(lái)取樣
B．排氣口能排出酒精發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的二氧化碳
C．充氣口在醋酸發(fā)酵時(shí)要連接充氣泵進(jìn)行充氣
D．充氣口的開(kāi)關(guān)始終要處于打開(kāi)狀態(tài)
【答案】D
【解析】考查果酒和果醋發(fā)酵裝置的知識(shí)。D，果酒發(fā)酵時(shí)需關(guān)閉充氣口，因?yàn)榫凭l(fā)酵是在無(wú)氧條件下進(jìn)行的。果醋發(fā)酵需打開(kāi)充氣口，因?yàn)榇姿峋钱愷B(yǎng)需氧型。
3、（2010江蘇泰州、南通市三模）下列有關(guān)果酒發(fā)酵、果醋發(fā)酵、腐乳制作前期發(fā)酵的比較，不正確的是（ ）
A．都可以使用自然界微生物作為菌種
B．發(fā)酵的實(shí)質(zhì)都是微生物的無(wú)氧呼吸
C．控制的發(fā)酵溫度、培養(yǎng)基成分有所不同
D．發(fā)酵過(guò)程中必須盡可能防止雜菌污染
【答案】B
【解析】考查選修1中傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用。果酒發(fā)酵、果醋發(fā)酵和腐乳制作的微生物分別是酵母菌、醋酸桿菌和毛霉等，它們都是自然界的微生物；B項(xiàng)中只有果酒的發(fā)酵實(shí)質(zhì)是微生物的無(wú)氧呼吸，其他都是有氧呼吸。C項(xiàng)果酒的適宜發(fā)酵溫度是18～25℃，培養(yǎng)基主要是葡萄汁；果醋發(fā)酵適宜溫度是30～35℃,培養(yǎng)基中主要含乙醇；腐乳制作中毛霉生長(zhǎng)的適宜溫度時(shí)15～18℃,培養(yǎng)基中成分主要為豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪等。D項(xiàng)果酒發(fā)酵、果醋發(fā)酵、腐乳制作前期發(fā)酵中都要盡可能防止雜菌污染。
4、（2010屆安徽省合肥市高三二模）用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)（ ）
①可以用相同的培養(yǎng)基 ②都需要使用接種針進(jìn)行接種
③都需要在火焰旁進(jìn)行接種 ④都可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌
A．①② B．③④ C．①③ D．②④
【答案】C
【解析】考查純化技術(shù)的操作。平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故①正確；平板劃線法采用接種針進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作，故②錯(cuò)誤；純化時(shí)，要進(jìn)行無(wú)菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故③正確；平板劃線法一般用于分離而不是計(jì)數(shù)，故④錯(cuò)誤。
5、（2010江西省南昌一模）用蔗糖、奶粉和經(jīng)蛋白酶水解后的玉米胚芽液，通過(guò)乳酸菌發(fā)酵可生產(chǎn)新型酸奶，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 （ ）
A．蔗糖消耗量與乳酸生成量呈正相關(guān)
B．酸奶出現(xiàn)明顯氣泡說(shuō)明有雜菌污染
C．此發(fā)酵過(guò)程為厭氧發(fā)酵
D．培養(yǎng)液中只有奶粉為乳酸菌發(fā)酵提供氮源
【答案】D
【解析】乳酸菌發(fā)酵分解蔗糖生成乳酸，所以蔗糖消耗量與乳酸生成量呈正相關(guān)；乳酸菌發(fā)酵無(wú)二氧化碳產(chǎn)生，酸奶出現(xiàn)明顯氣泡說(shuō)明有雜菌污染；產(chǎn)生乳酸的發(fā)酵過(guò)程為厭氧發(fā)酵；培養(yǎng)液中奶粉、蛋白酶都為乳酸菌發(fā)酵提供氮源。
6、下列關(guān)于酵母菌的有關(guān)說(shuō)法正確的是（ ）
A．酵母菌產(chǎn)生酒精的條件與醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的條件相同
B．利用酵母菌生產(chǎn)酒精的過(guò)程中固定化酶技術(shù)比固定化酵母細(xì)胞更好
C．培養(yǎng)液中是否產(chǎn)生酒精可用溴麝香草酚藍(lán)檢驗(yàn)
D．若要測(cè)定培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量，采用稀釋涂布平板法比平板劃線法誤差要小一些
【答案】D
【解析】考查與微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的有關(guān)內(nèi)容。酵母菌產(chǎn)生酒精的最適溫度是18-25℃，醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的最適溫度是30-35℃，故條件不同；利用酵母菌生產(chǎn)酒精的過(guò)程中固定化酵母細(xì)胞比固定化酶技術(shù)更好；培養(yǎng)液中是否產(chǎn)生酒精可用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)；測(cè)定培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量，采用稀釋涂布平板法溶液更易讓細(xì)菌分布均勻，平板劃線法接種環(huán)上是固體菌種，容易讓多個(gè)酵母菌疊加在一起，所以采用稀釋涂布平板法比平板劃線法誤差要小一些。
7、(2010南通泰州揚(yáng)州)下列評(píng)價(jià)果酒和果醋制作是否成功的方法中，不合理的是（ ）
A．通過(guò)觀察相關(guān)微生物的存在或數(shù)量變化進(jìn)行鑒定
B．通過(guò)向果酒發(fā)酵液中加入重鉻酸鉀試劑進(jìn)行鑒定
C．通過(guò)檢測(cè)果醋發(fā)酵前后發(fā)酵液的pH變化進(jìn)行鑒定
D．通過(guò)檢測(cè)果酒發(fā)酵前后發(fā)酵液的溫度變化進(jìn)行鑒定
【答案】D
【解析】考查了評(píng)價(jià)檢查果酒和果醋制作的質(zhì)量的方法。果酒和果醋制作是否成功可以通過(guò)分別觀察酵母菌、醋酸菌數(shù)量的變化來(lái)鑒定；酸性重鉻酸鉀遇到酒精會(huì)變成灰綠色，故可用重鉻酸鉀試劑來(lái)檢查果酒的發(fā)酵情況；在果醋發(fā)酵過(guò)程中由于不斷產(chǎn)生醋酸，故在一定的時(shí)間范圍內(nèi)，發(fā)酵液的pH不斷下降，因此可根據(jù)發(fā)酵液的pH變化來(lái)鑒定；只要發(fā)酵液中存在活的細(xì)胞生物，無(wú)論是酵母菌、醋酸菌還是污染的雜菌都進(jìn)行細(xì)胞呼吸，分解有機(jī)物釋放熱量，使發(fā)酵液的溫度發(fā)生變化，因此果酒發(fā)酵前后的溫度變化不能確定是否是酵母菌導(dǎo)致的。
8、（2010南京）下列有關(guān)果酒，果醋和腐乳制作的敘述，正確的是（ ）
A 參與果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵的微生物都含有線粒體
B 果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋
C 在腐乳制作過(guò)程中必須有能生產(chǎn)蛋白質(zhì)的微生物參與
D 在腐乳裝瓶時(shí)自下而上隨層數(shù)的增加逐漸減少鹽量
【答案】C
【解析】考查果酒、果醋和腐乳的制作過(guò)程。果醋發(fā)酵利用的是醋酸菌，為原核生物不含有線粒體；制作果醋不僅需要比果酒溫度較高的環(huán)境，還需要氧氣；在腐乳裝瓶時(shí)，自下而上隨層數(shù)的增加逐漸增加鹽的用量。
9、(2010南通)（多選）下列有關(guān)果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵的敘述中，正確的是（ ）
A．參與發(fā)酵的微生物都含有線粒體
B．都需要持續(xù)通入無(wú)菌空氣
C．發(fā)酵過(guò)程中培養(yǎng)液pH都會(huì)下降
D．果酒制成后可將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中制果醋
【答案】CD
【解析】考查果酒和果醋發(fā)酵的知識(shí)。A，果酒發(fā)酵的微生物是酵母菌，果醋發(fā)酵的微生物是醋酸菌，二者都屬于原核生物，均沒(méi)有線粒體。B，果酒發(fā)酵的后期需密封，因?yàn)榫凭窃跓o(wú)氧條件下形成的。
10、(2010南通泰州揚(yáng)州)在制作腐乳時(shí)，加鹵湯密封腌制過(guò)程中，對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量無(wú)影響的因素是（ ）
A．酒的種類(lèi)和用量 B．周?chē)h(huán)境中的濕度
C．香辛料的組成和用量 D．腌制的溫度和時(shí)間
【答案】B
【解析】考查腐乳的制作。據(jù)題干信息可知：在加鹵湯密封腌制過(guò)程中，罐中的腐乳與外界環(huán)境之間的物質(zhì)完全隔離，不能交換，因此此刻環(huán)境中的物質(zhì)因素，如濕度等不會(huì)對(duì)其形成造成影響，其余選項(xiàng)見(jiàn)課本基礎(chǔ)知識(shí)。
11、（ 2010江蘇蘇北四市 ）在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有關(guān)敘述正確的是（ ）
A．果醋發(fā)酵階段應(yīng)封閉充氣口，防止雜菌進(jìn)入
B．腌制腐乳的鹵湯中應(yīng)含有12％左右的酒精以抑制細(xì)菌的增殖
C．利用自然菌種發(fā)酵果酒時(shí)，將封有葡萄汁的發(fā)酵瓶進(jìn)行高壓滅菌
D．將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口部分的鹽要鋪薄一些
【答案】B
【解析】本題考查的是果酒，果醋，腐乳制作的基本過(guò)程及相關(guān)注意事項(xiàng)。醋酸菌是好氧菌，發(fā)酵的時(shí)候需要通入無(wú)菌空氣；利用自然菌發(fā)酵時(shí)利用的就是葡萄汁中的酵母菌，高壓滅菌會(huì)殺死酵母菌；腐乳制作時(shí)裝壇時(shí)越靠近壇口鹽越要厚一些。
12、(2010北京海淀區(qū))人們利用某些微生物制作食品時(shí)，需要分析微生物的特點(diǎn)，控制微生物的發(fā)酵條件。下列與此有關(guān)的各項(xiàng)內(nèi)容都正確的是（ 　 ）
【答案】B
【解析】本題考查微生物的應(yīng)用知識(shí)，考查內(nèi)容較較廣，比較貼近生活。A、制果酒時(shí)是利用酵母菌的無(wú)氧呼吸來(lái)生產(chǎn)酒精，所以不能通所。C、應(yīng)該先接種毛霉，讓其生長(zhǎng)，再加鹽。D、制泡菜用乳酸菌，而不是醋酸菌。
13、(2010江西重點(diǎn)中學(xué)聯(lián)考)下圖甲表示某種細(xì)菌合成精氨酸的途徑，圖乙表示接種該細(xì)菌后可能出現(xiàn)的三種生長(zhǎng)曲線。據(jù)圖分析，下列有關(guān)描述中，正確的組合是（ ）
①．圖甲顯示了該細(xì)菌通過(guò)調(diào)節(jié)酶的活性來(lái)調(diào)節(jié)精氨酸的合成
②．從圖甲可知，精氨酸的合成是由該細(xì)菌的3對(duì)等位基因共同控制的
③．圖乙的結(jié)果可說(shuō)明加大接種量能縮短細(xì)菌生長(zhǎng)的調(diào)整期
④．精氨酸依賴(lài)型突變菌的產(chǎn)生，可能是因?yàn)榭刂泼?合成的基因發(fā)生突變
A．①　 B．②③④　 C．③④　 D．①②③④
【答案】C
【解析】查的是微生物代謝中酶活性的調(diào)節(jié)及微生物生長(zhǎng)曲線。微生物代謝中酶活性的調(diào)節(jié)是指反應(yīng)產(chǎn)物過(guò)多會(huì)與酶結(jié)合，使酶的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化而使酶的活性下降，當(dāng)反應(yīng)產(chǎn)物減少時(shí)便于酶分開(kāi)，使酶又恢復(fù)活性的過(guò)程調(diào)節(jié)。圖甲精氨酸是通過(guò)阻止酶的基因轉(zhuǎn)錄使酶不能合成來(lái)調(diào)節(jié)，與酶活性的調(diào)節(jié)概念不符，所以①錯(cuò)誤。等位基因是指位于一對(duì)同源染色體上相同位置控制一對(duì)相對(duì)性狀的兩個(gè)基因，細(xì)菌是原核生物沒(méi)有染色體，只有擬核和質(zhì)粒有DNA，所以②錯(cuò)誤。圖乙縱坐標(biāo)是細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)，在開(kāi)始培養(yǎng)時(shí)（橫坐標(biāo)時(shí)間為0時(shí)）細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)多的調(diào)整期時(shí)間也短，③正確。精氨酸依賴(lài)型是指自己不能合成精氨酸，需要在培養(yǎng)基中添加精氨酸。原料Ⅰ和原料Ⅱ不能合成精氨酸的原因是就是相關(guān)的

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