資源簡介

生物試題
本試卷分選擇題和非選擇題兩部分，共 8 頁，滿分為 100 分。考試用時 75 分鐘。
注意事項：1.答卷前，考生務必用黑色字跡的鋼筆或簽字筆將自己的姓名和準考證號填寫在答題卡相應的
位置上，用 2B 鉛筆將自己的準考證號填涂在答題卡上。
2.選擇題每小題選出答案后，用 2B 鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑；如需改動，用
橡皮擦干凈后，再選涂其他答案；在試卷上作答無效。
3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆在答題卡上作答，答案必須寫在答題卡上各題目指
定區域內的相應位置上，超出指定區域的答案無效；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫
上新的答案；不準使用涂改液。不按以上要求作答的答案無效。
4.考生必須保持答題卡的整潔和平整。
第Ⅰ卷 （本卷共計 40 分）
一．選擇題：（每小題只有一個選項，1-10 題，每小題 2 分，11-15 題，每小題 4 分，共計 40 分）
1．與傳統發酵技術相比，發酵工程的產品種類更加豐富，產量和質量明顯提高。下列有關發酵工程表述
正確的是
A．該工程的中心環節是菌種的選育 B．絕大多數酶制劑是由該技術生產
C．可從微生物細胞中提取單細胞蛋白 D．條件變化不影響微生物的代謝途徑
2．在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件是
①消毒和滅菌 ②一定濃度的植物激素 ③適宜的溫度 ④充足的光照 ⑤充足的養料
A．①③④⑤ B．②③④⑤ C．①②③④ D．①②③⑤
3．對某種動物的肝腫瘤細胞進行細胞培養，下列說法正確的是
A．傳代培養時，用胰蛋白酶處理懸浮的細胞，再用離心法收集
B．細胞培養應在含 5%CO2 的恒溫培養箱中進行，CO2 的主要作用是刺激細胞呼吸
C．定期更換培養液是為了給體外培養的細胞提供無菌環境
D．在合成培養基中，通常需加入血清等天然成分
4．下列關于生物技術安全與倫理問題的敘述，錯誤的是
A．我國禁止進行任何生殖性克隆人實驗 B．治療性克隆不會產生道德、倫理問題
C．我國反對生物武器的研發、生產和擴散 D．轉基因食品存在引發過敏的風險
5．如圖為快速培育優質奶牛的過程，下列敘述正確的是
高二下期中考試生物試卷 第 1頁 共 8 頁
A．精子和卵子分別需經獲能、成熟處理后才能受精
B．胚胎移植前需要對受體牛進行免疫抑制處理
C．可取②進行性別鑒定，兩子代牛犢的性別不同
D．胚胎移植的實質是生產和孕育胚胎的時間分離
6．某檢測小組為驗證使用公筷的必要性，將聚餐時的每道菜品分為兩份，一份使用公筷進食，一份不使
用公筷進食。通過無菌操作采集樣品，定量稀釋后等量接種于牛肉膏蛋白胨培養基上，恒溫培養適宜時
間，進行細菌菌落總數統計，結果如表，其中 CFU/g 表示每克樣品在培養基上形成的菌落總數。下列敘
述不正確的是
細菌菌落總數（CFU/g）
菜名 餐后
餐前
公筷 非公筷
涼拌黃瓜 14000 16000 45000
香辣牛蛙 60 150 560
A．每道菜品應用公筷和非公筷夾取相同次數，目的是排除無關變量的干擾
B．使用公筷可明顯降低菜品細菌污染，使用非公筷會導致菜品之間的交叉污染
C．實驗采用稀釋涂布平板法統計活菌數目，實驗結果一般比實際值偏低
D．牛肉膏蛋白胨培養基需經高壓蒸汽滅菌后再調整 pH，完全冷卻后倒平板
7．如圖所示三個 DNA 片段依次表示 EcoRⅠ、BamHⅠ和 Sau3AⅠ三種限制酶的識別序列與切割位點。下
列有關敘述錯誤的是
A．三種限制酶切割產生的末端的長度大小相同
B．這三種限制酶切割后形成的都是黏性末端
C．BamH Ⅰ和 Sau3A Ⅰ切割 DNA 片段形成的末端不能彼此連接
D．圖中的 DNA 片段被 EcoR Ⅰ切割后，會增加兩個游離的磷酸基團
8．高濃度的銨鹽對池塘養殖的對蝦有一定的毒害作用，硝化細菌是一種好氧菌，可有效凈化水體中的銨
鹽，降低對蝦的死亡率。科研人員擬從當地對蝦養殖池塘中篩選出對銨鹽降解率高且穩定的硝化細菌菌
株，操作流程如圖所示。下列敘述錯誤的是
高二下期中考試生物試卷 第 2頁 共 8 頁
A．從對蝦死亡率低的養殖池塘中取樣，能提高篩選的成功率
B．純化菌種時，若按圖中所示的接種方法接種，接種環需要灼燒 4 次
C．在錐形瓶中培養硝化細菌時需要振蕩培養，目的是增加硝化細菌與營養物質、溶解氧的充分接觸
D．可選擇銨鹽濃度減小得最多的一組候選菌進行后續培養
9．如圖為核移植實驗過程示意圖，根據圖示分析下列敘述正確的是
A．去核的時期應該在 MⅠ期，原因是該時期第一極體和卵細胞核較近
B．桑葚胚細胞應提取出細胞核后，盡快注入去核的卵母細胞中
C．電融合法可促使重構胚形成，后期還需要其他方法激活重構胚
D．動物體細胞核移植比動物胚胎細胞核移植難度低
10．如圖表示某種哺乳動物受精作用及早期胚胎發育的部分過程。下列有關敘述正確的是
A．圖 1 中各細胞內的 DNA 分子數目與體細胞中相同
B．圖 2 和圖 3 中的極體都將繼續分裂
C．同期發情處理能使供體產生更多的圖 4 結構
D．圖 1 到圖 4 的過程發生在輸卵管和子宮中
11．采用 PCR 技術可獲取并擴增目的基因。下列說法正確的是
A．若 PCR 的模板是 mRNA，完成擴增只需要逆轉錄酶
B．預變性有利于模板 DNA 充分解聚為單鏈
C．復性溫度太高會導致引物和模板的非特異性結合增加
D．一個 DNA 模板完成第 20 輪循環需要（220-2）個引物
12．2024 年諾貝爾化學獎授予了三位科學家，以表彰其在蛋白質結構預測方面的貢獻。下列有關蛋白質的
說法正確的是
A．真絲、棉花、羊毛等制品不宜用含蛋白酶的洗衣粉洗滌但可以用洗發精洗滌
B．利用膠原蛋白制成的手術縫合線不宜吸收過快否則不利于患者恢復身體健康
C．利用黑曲霉等生產的牛凝乳酶比天然產物中提取的酶純度更高屬于蛋白質工程
D．大分子物質特有的通過胞吞、胞吐的跨膜運輸方式也需要蛋白質分子的協助
高二下期中考試生物試卷 第 3頁 共 8 頁
13．自殺基因系統是指外源基因導入受體細胞后會表達相應的酶，該酶可催化無毒的藥物前體轉化為有毒
物質，從而導致受體細胞被殺死。為探究外源基因 TK 與藥物更昔洛韋能否組成自殺基因系統，研究人
員以肝癌細胞為受體細胞進行實驗，結果如圖所示。下列說法正確的是
A．培養肝癌細胞的過程中需定期更換培養液以保持無菌、無毒的環境
B．肝癌細胞在細胞培養過程中沒有接觸抑制，因而無需進行傳代培養
C．對照組和實驗組應分別為導入 TK 和未導入 TK 的肝癌細胞
D．實驗結果表明外源基因 TK 與更昔洛韋可組成自殺基因系統
14．蛋白質工程被用于改進酶的性能或開發新的工業用酶時，常用兩種策略：合理設計，需了解蛋白質的
結構及控制性狀的基因序列，過程如下圖；定向進化，在試管中模擬自然進化，利用人工誘變技術誘發
大量突變，按照特定的需要給予選擇壓力，選擇具有所需特征的蛋白質。下列敘述錯誤的是
A．對某種蛋白質進行合理設計可能得到多種基因序列
B．⑤過程的完成依賴于基因的改造或基因的合成
C．定向進化也需要事先了解蛋白質的空間結構情況
D．定向進化策略與自然選擇實質基本相同，但速度不同
15．畢赤酵母（能以甲醇為唯一碳源）可作為生產抗原蛋白的工程菌。研究人員以圖 1 所示質粒為載體，
構建含乙型肝炎病毒表面抗原蛋白基因 HBsAg 的重組質粒，導入大腸桿菌中進行擴增后，再經酶切后
導入畢赤酵母，經同源重組整合到其染色體 DNA 上，其中的 T 啟動子是一種甲醇誘導型啟動子。圖 1、
圖 2 中的限制酶酶切位點對應的堿基序列如圖 3 所示。下列說法正確的是
高二下期中考試生物試卷 第 4頁 共 8 頁
A．利用 PCR 技術獲取 HBsAg 基因時，引物 B 結合的單鏈是 b 鏈
B．科研人員利用限制酶和 E.coliDNA 連接酶將 HBsAg 基因正確插入圖 1 所示質粒時，應選用 XmaⅠ、
BclⅠ酶對質粒進行酶切處理
C．構建重組載體后，導入大腸桿菌，在含有氨芐青霉素的培養基上進行培養，無法將含空白質粒的
大腸桿菌菌落和含有重組質粒的大腸桿菌菌落區分開
D．將大腸桿菌中獲取的 HBsAg 基因導入畢赤酵母后，轉化的酵母菌在培養基上培養一段時間后，需要向
其中加入甲醇，其目的只是誘導 HBsAg 基因表達。
第Ⅱ卷 （本卷共計 60 分）
二、非選擇題：（本題共 5 小題，共 60 分。）
16．（8 分）尼帕病毒（NV）是一種新型人畜共患病毒，該病毒的結構蛋白（X 蛋白）可誘導動物機體產生
中和抗體，從而防御病毒感染。制備單克隆中和抗體的流程如圖所示。回答下列問題。
(1)制備單克隆抗體過程中涉及的動物細胞工程技術包括 和 。
(2)在特定培養基 Y 中不能存活的細胞包括下列 。①B 淋巴細胞；②小鼠的骨髓瘤細胞；③B
淋巴細胞自身融合的細胞；④小鼠的骨髓瘤細胞自身融合的細胞；⑤雜交瘤細胞
(3)圖中符合生產的雜交瘤細胞具有 的特點。最終可從 或 中獲得大量的單克隆
抗體。
(4)為鑒定單克隆抗體識別抗原的具體區域，可將抗原（X 蛋白）進行逐步截短，分別與純化的單克隆
抗體反應，實驗結果如圖所示（“+”表示有反應，“-”表示無反應，“aa”表示氨基酸）。
結果證明該單克隆抗體識別抗原（X 蛋白）的區域大概為 （填“40~50”、“40~55”或“40
~60”）位氨基酸。
高二下期中考試生物試卷 第 5頁 共 8 頁
17．（11 分）野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相關工程技
術可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段
化，并喪失再生能力，再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，流程
如下圖。據圖回答：
(1)該過程用到的細胞工程技術稱為 。
(2)過程①所需的酶是 ，過程②中 PEG 的作用是 ，經過②操作后，需篩選出融合的雜種細
胞，顯微鏡下觀察融合的活細胞中有黑芥葉肉細胞的 （填寫細胞器名稱）存在可作為初步篩選
雜種細胞的標志。
(3)原生質體培養液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的 ，從而維持原生質體的形態和活
性。原生質體經過細胞壁再生，進而脫分化形成 ，其是處于無定形狀態的 （填“分化”
或“未分化”）細胞。
(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，在顯微鏡下觀察
并比較染色體的 。將雜種植株栽培在含有 的環境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。
在植物組織培養的過程中，為了除去植物體表面的微生物，外植體需要先后用酒精和 處理，每
次處理后都要用無菌水清洗。
18．（14 分）大量農作物的秸稈及其附屬物的焚燒，曾經一度成為人們的熱門話題。有的人認為，秸稈焚
燒省時省力，焚燒后的灰燼可以肥田；有的人認為，秸稈焚燒產生的煙霧對環境有害，也易引發火災；
有的人認為，可以利用現代生物技術處理農作物秸稈及其附屬物，以獲得更大的經濟效益和社會效益。
回答下列問題。
(1)玉米秸稈中的纖維素能被土壤中的纖維素分解菌分解，這是因為纖維素分解菌能夠產生 。
(2)為了獲得纖維素分解菌，可以把濾紙埋在土壤中，經過一段時間后，再從腐爛的濾紙上篩選纖維素分
解菌。原因是 。
(3)玉米棒脫粒后的玉米芯含較多的木聚糖，利用從土壤中篩選出來的菌株 H 發酵，能使木聚糖轉化為木
寡糖等高附加值低聚糖，發酵設備如下圖所示：
高二下期中考試生物試卷 第 6頁 共 8 頁
①為了得到使木聚糖轉化為木寡糖等高附加值低聚糖的性狀優良的菌種，可以從土壤中直接篩選，也
可以通過 獲得。
②為了獲得更多的發酵產品，需要進一步優化提升發酵設備性能，可將該發酵設備改造后連接計算機
系統，以對發酵過程中的 （至少答兩點）等條件進行監測和
控制，還可以進行反饋控制，使發酵全過程處于最佳狀態。
③生產過程中，以一定的速度在加料口不斷添加新的培養基，同時又以同樣速度在出料口放出舊的培
養基，可大大提高生產效率，原因是 （答 2 點）。
(4)圖 1 和圖 2 是培養大腸桿菌的結果圖，可以用來計數的接種方法是 （填圖 1 或者圖 2）其
可以用來計數的原理為 。
19．（14 分）綠色熒光蛋白（GFP）是由一條肽鏈組成的蛋白質，通過蛋白質工程技術可獲得增強型熒光
蛋白。某研究人員設計引物，通過 3 次 PCR 反應（一次 PCR 反應包括多輪循環）將一對突變堿基引入
編碼 GFP 的 DNA 片段（片段甲），獲得了編碼增強型熒光蛋白的 DNA 片段（目的基因）。實驗過程如
圖所示，圖中 a、b、c、d 表示引物，→表示 5＇→3＇方向，■代表突變堿基。
回答下列問題。
(1)以片段甲為模板，通過兩次獨立的 PCR 反應（步驟①和步驟②在不同的試管中進行）分別獲得 DNA
片段乙和丙，步驟①和步驟②所用的引物對分別是 、 。
(2)步驟③是將純化的 DNA 片段乙和丙混合，經熱變性、復性，得到產物 X 和 Y；步驟④是在熱穩定
DNA 聚合酶的催化下進行的延伸反應。步驟③的產物中能形成 DNA 片段丁的是 ，原因
是 。
高二下期中考試生物試卷 第 7頁 共 8 頁
(3)以DNA片段丁為模板，通過PCR反應擴增目的基因時，所選用的PCR引物為 。
(4)上述獲得增強型熒光蛋白的過程利用了蛋白質工程技術，其基本思路是從預期的蛋白質功能出發→設
計預期的蛋白質結構→ →找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或 →獲得所
需要的蛋白質。
20．（13 分）葡聚糖和木聚糖等物質具有一定的粘度，添加在某些飲品中會影響口感或堵塞過濾裝置。某
實驗室科研工作者采用構建共表達 GluZ（葡聚糖酶基因）和 XylB（木聚糖酶基因）兩種融合基因的工
程酵母，降低釀造飲品中的葡聚糖和木聚糖等物質含量以降低粘度。圖 1 中 PGK 是酵母菌的特異性啟
動子，ADH 為終止子，KanMX 是遺傳霉素抗性基因。GluZ 和 XylB 兩種融合基因的結構如圖 2 所示，
MFα是酵母菌特有的信號肽基因（信號肽可以引導分泌型蛋白的表達）。請回答下列問題。
(1)PCR 擴增序列時，需設計相應的引物，引物的本質是 ，其作用是 。
(2)結合圖 1 和圖 2，應選擇限制酶 對質粒進行切割，原因是 （答出兩點）。為使 MFα
與 GluZ（或 XylB）連接形成融合基因，引物 R1 與引物 F2（或引物 F3）的 5'端引入的限制酶種類的
要求是 。
(3)科研人員將兩種融合基因分別重組至質粒 YE 得到重組質粒 G 和 X，并對處于特殊狀態的酵母菌進行
轉化。為檢測轉化是否成功，可在培養基中加入遺傳霉素，其作用是 ，在獲得的酵母菌單菌
落中選取 6 個單菌落分別制成菌懸液，標號為 1~6，然后分別加入含木聚糖或葡聚糖的剛果紅平板的
圓孔中，觀察透明圈的產生情況，結果如圖 3 所示，其中同時含有質粒 G 和質粒 X 的菌懸液是
（用序號表示），判斷依據是 。
(4)為驗證（3）中獲得的轉基因酵母菌能降低啤酒的粘度，請設計合理的實驗進行探究，要求寫出實驗
思路、預期結果及結論。（實驗材料：盛有等量大麥汁的發酵容器、普通酵母菌菌液、轉基因酵母菌
菌 液 等 ） 實 驗 思 路 ： 。 預 期 結 果 及 結
論： ，說明轉基因酵母菌能降低啤酒的粘度。
高二下期中考試生物試卷 第 8頁 共 8 頁
一、選擇題：（本題共 15 小題，1-10 題，每小題 2 分，11-15 題，每小題 4 分，共 40 分。在每
小題給出的四個選項中，只有一項符合題目要求）
題號 1 2 3 4 5 6 7 8
答案 B D D B A D C B
題號 9 10 11 12 13 14 15
答案 C D B B D C B
二、非選擇題：（本題共 5 小題，共 60 分）
16.（8 分，除標注外，每空 1 分）
(1) 動物細胞培養 動物細胞融合
(2) ①②③④
(3) 既能無限增殖、又能產生所需抗體（2 分） 小鼠腹水 培養液
(4) 40~55
17.（11 分，除標注外，每空 1 分）
(1)植物體細胞雜交和植物組織培養（2 分）
(2)纖維素酶和果膠酶 誘導原生質體融合 綠色的葉綠體
(3)滲透壓 愈傷組織 未分化
(4)形態和數目 含有黑腐病菌 次氯酸鈉
18.（14 分，每空 2 分）
(1)纖維素酶
(2)人為創造適合纖維素分解菌生存的環境，腐爛的濾紙上可能密布纖維素分解菌
(3)誘變育種或基因工程育種 溫度、pH、溶解氧、罐壓、通氣量、攪拌、泡沫和營養 保證微生
物對營養物質的需求：防止代謝產物對菌株造成危害
(4)圖 1 當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，
因此通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌
19.（14 分，每空 2 分）
(1)a 和 c b 和 d
(2)Y DNA 聚合酶只能從有模板的 3＇端延伸 DNA 鏈
(3)a 和 d
(4)推測應有的氨基酸序列 合成新的基因
20.（13 分，除標注外，每空 1 分）
(1)短單鏈核酸 使 DNA 聚合酶能夠從引物的 3'端開始連接脫氧核苷酸
(2)NdeⅠ、KpnⅠ 保證目的基因插入啟動子和終止子之間、不破壞標記基因、防止質粒和目的基因
自身環化等（2 分） 同種限制酶或能產生相同末端的限制酶
(3)對轉入重組質粒的酵母菌進行初步篩選 5 5 號菌懸液在木聚糖剛果紅平板和葡聚糖剛果紅平
板上均出現了透明圈，表明其既能分解木聚糖又能分解葡聚糖
(4)取兩個相同的盛有等量大麥汁的發酵容器，標號為 A 和 B，將等量等濃度的轉基因酵母菌和普通酵母
菌的菌液分別接種于 A 和 B 中（1 分）；在相同且適宜的條件下進行發酵（1 分）；一段時間后檢測啤酒
的粘度（1 分）。 若 A 組啤酒的粘度明顯小于 B 組（1 分）

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