資源簡介

永春縣第一中學2024-2025學年高二下學期4月期中生物試題
一、單選題
1．果酒口感較好，且富含維生素和人體所需的氨基酸等，因此廣受歡迎。下列關于傳統果酒制作的敘述，正確的是（ ）
A．釀酒之前應該用體積分數為95%的酒精對器具進行消毒
B．制作果酒時應該先去除枝梗和腐爛的籽粒再用清水沖洗
C．制作果酒時每隔12小時將瓶蓋打開的目的是排出多余的CO2
D．果酒發酵時發酵瓶內液面不再有氣泡產生，說明發酵基本完畢
2．液體深層培養是指以獲得大量發酵產物為目的的發酵罐大容量液體培養，可通過調節培養液的pH和溫度、營養條件以及氣體環境促使微生物迅速生長，產生大量代謝產物，是發酵工業生產的基本培養方法。下列敘述正確的是（　　）
A．傳統發酵技術不需要防止雜菌污染，液體深層培養前需要對發酵罐中的培養基進行嚴格滅菌
B．單細胞蛋白是從微生物細胞中提取的蛋白質，可作為食品添加劑、微生物飼料等
C．可通過過濾、沉淀等方法獲得微生物代謝產物
D．利用液體深層培養進行谷氨酸發酵生產應在中性或弱堿性條件下進行
3．我國科學家將遼寧絨山羊的卵母細胞去核，并取出呂梁黑山羊體細胞的細胞核，將二者結合，體外培養獲取胚胎，再移植到另一只遼寧絨母山羊體內孕育，最終成功培育出體細胞克隆黑山羊。下列敘述錯誤的是（ ）
A．上述克隆過程中需將去核的遼寧絨母山羊卵母細胞培養到MⅡ期
B．培養呂梁黑山羊體細胞時，常在培養液中加入動物血清以提供天然營養
C．克隆黑山羊兼具遼寧絨山羊和呂梁黑山羊的遺傳物質，屬于有性生殖產物
D．體細胞克隆技術對促進優良品種繁育和增加瀕危品種數量均具有重要實踐意義
4．如圖表示植株A（雜合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的過程，下列說法正確的是（ ）
A．培育植株①的過程為單倍體育種，獲得的植株為純合子
B．選擇植物的愈傷組織進行誘變處理獲得優質的突變體，未體現細胞的全能性
C．需要通過植物組織培養技術獲得的植株只有①③④
D．植株①②④⑤與植株A基因型相同的概率分別是0、0、1、0（不考慮基因突變）
5．張九齡有詩云：紅泥乍擘綠蟻浮，玉碗才傾黃蜜剖。寥寥數語生動描繪了色香味俱全的客家米酒。客家米酒的特點之一是甜膩入口，這與其釀酒過程使用的甜酒曲有關，甜酒曲主要含有根霉、毛霉和酵母菌等微生物。下列有關釀酒過程的敘述，錯誤的是（ ）
A．若釀制的米酒呈酸味，可能與長期封閉釀酒容器有關
B．酵母菌在密閉釀酒容器內初期種群數量呈近似J型增長
C．客家人用稻草為釀酒容器“保暖”，主要目的是為了促進酵母菌增殖
D．根霉、毛霉與酵母菌構成競爭關系，應控制酒曲中各種微生物的比例
6．研究人員將粉藍煙草和朗氏煙草體細胞進行融合培育出新的煙草品種，其大致過程為：制備原生質體→促進原生質體融合→融合細胞→愈傷組織→煙草幼苗。同時研究人員探究了PEG 對原生質體融合的影響，結果如下表所示。下列相關敘述正確的是（　　）
編號 PEG用量（μL） PEG：原生質體懸浮液 融合率（%） 細胞碎片
1 20 1：5 6.5 +
2 40 2：5 15.5 +
3 60 3：5 19.4 +
4 80 4：5 20.4 ++
5 100 1：1 21.6 +++
注：原生質體懸浮液用量100μL，融合25 min。“+”表示很少；“++”表示少量；“+++”表示較多。
A．制備原生質體時需用含纖維素酶和果膠酶的低滲溶液處理細胞
B．若PEG對原生質體處理時間遠長于 25 min，則融合率會提高
C．由實驗結果可知，促進原生質體融合的較適 PEG用量為60μL
D．細胞融合完成的標志是再生出細胞壁，其經再分化形成愈傷組織
7．烏珠穆沁白山羊為絨肉兼用型品種，當前因種群小、近親繁殖而出現品種資源危機。現利用生物技術開展保護工作，相關敘述正確的是（ ）
A．動物細胞培養液中可添加一定量的抗生素以保持無菌無毒的環境
B．核移植技術中需去除MⅡ期卵母細胞中的紡錘體—染色體復合物
C．胚胎移植操作前通常需對多只受體進行超數排卵和同期發情處理
D．為提高胚胎的利用率，可選用未分化的囊胚和桑葚胚進行胚胎分割
8．第三代試管嬰兒技術（PGD/PGS）是對早期胚胎細胞進行基因診斷和染色體檢測后再進行胚胎移植,流程如圖所示。圖中檢測包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因診斷,PGS是指胚胎植入前的染色體數目和結構檢測）。下列敘述正確的是（　　）
A．采集的卵子可直接與獲能的精子進行受精
B．PGD和PGS技術可分別用于篩選紅綠色盲和唐氏綜合征
C．將成熟的精子放入ATP溶液中進行獲能處理
D．“理想胚胎”需培養至桑葚胚或原腸胚才能植入子宮
9．PCR是一種在體外擴增DNA片段的技術，其最大的特點是能將微量的DNA大幅度擴增。引物的設計對DNA擴增至關重要，引物的長度一般為15~30bp，常用的是18~27bp，過長或過短均會影響產物的形成，如過短的引物會更容易與非目標序列結合，過長的引物會導致其延伸溫度過高。下列相關敘述正確的是（ ）
A．擴增DNA時加入的引物使DNA連接酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
B．引物內部以及兩種引物之間不能有互補的堿基序列，否則會造成引物自連為雙鏈
C．引物過短會導致復性的特異性變差，可能會在模板鏈上出現多個連接位點
D．引物過長，子鏈延伸時影響TaqDNA聚合酶的活性，直接影響氫鍵的形成
10．“篩選”是生物技術與工程中常用的技術手段。下列敘述錯誤的是（ ）
A．胚胎移植前，需對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質量篩選
B．發酵生產中，性狀優良的菌種可以從自然界中篩選
C．培育轉基因抗蟲棉時，需從分子水平及個體水平進行篩選
D．制備單克隆抗體時，需從分子水平篩選能產生多種抗體的雜交瘤細胞
11．熒光定量PCR檢測技術可應用于新冠病毒核酸檢測。其原理是在PCR反應體系中加入引物的同時，加入與某條模板鏈互補的熒光探針。當耐高溫的DNA聚合酶催化子鏈延伸至探針處，會催化水解探針，使熒光監測系統接收到熒光信號。每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子產生（如圖），通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值（熒光信號達到設定閾值時所經歷的循環次數）。下列關于該技術敘述錯誤的是（　　）
A．PCR反應體系需加入模版、脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶
B．耐高溫的DNA聚合酶可催化形成磷酸二酯鍵和斷開磷酸二酯鍵
C．最終監測的熒光強度與起始時反應管內目標DNA含量呈正相關
D．Ct值越大表明檢測樣本中病毒數目越多，患者的危險性越高
12．下圖表示PCR過程中某個階段反應體系的情況，①②③④表示相關物質，L、R表示方向。下列敘述正確的是（ ）
A．②鏈從L到R的方向為3′→5′，①②鏈均可作為子鏈合成的模板
B．PCR過程需要通過解旋酶斷開氫鍵，且為邊解旋邊復制
C．以1個DNA為模板經3次循環需消耗7個引物③
D．物質③的5′端添加了某序列，至少需經3次循環才可獲得該序列的雙鏈產物
13．如圖是“DNA的粗提取與鑒定”實驗中的兩個操作步驟示意圖，相關敘述正確的是（ ）
A．圖1中溶液a是NaCl溶液，玻璃棒應沿不同方向進行攪拌
B．圖1中絲狀物為粗提取的DNA，其與蛋白質均可溶于酒精
C．若圖2試管中溶液的液面高于燒杯中的液面，可能導致加熱不充分
D．圖2試管2起對照作用，溶液b是溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液
14．研究發現，大豆GmNF-YA19基因在干旱脅迫中有響應。科研人員利用PCR擴增GmNF-YA19基因，構建GmNF-YA19基因表達載體并轉化煙草，實驗過程如圖1、2所示下列說法錯誤的是（ ）

A．PCR擴增GmNF-YA19基因的前提是根據已知核苷酸序列合成兩種引物
B．為獲得能正確表達目的基因的重組質粒，應選用限制酶KpnI、EcoRI進行切割
C．終止子為一段DNA序列，其作用是使轉錄在所需要的地方停下來
D．重組質粒轉化煙草后，可使用含氨芐青霉素的培養基來篩選目的細胞
15．如圖是幾種不同限制性內切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列敘述正確的是（ ）
A．以上DNA片段由5種限制酶切割后產生，切割產生①片段的限制酶識別序列由5個核苷酸組成
B．限制酶只存在于原核生物中，作用的化學鍵為磷酸二酯鍵
C．上述能進行連接的兩個黏性片段，其連接后形成的DNA分子是
D．兩個③片段只能被E.coliDNA連接酶催化連接形成重組DNA
16．小鼠體細胞克隆胚胎著床后胎盤發育顯著異常可能是與克隆胚胎中H3K27me3印記基因過度表達有關，H3K27me3印記基因敲除極大提高了體細胞克隆的成功率。科學家分別測量H3K27me3印記基因敲除的克隆小鼠（甲組）、H3K27me3印記基因不敲除的克隆小鼠（乙組）和受精卵來源的小鼠（丙組）的體重和胎盤直徑，結果如下圖所示。下列相關分析錯誤的是（ ）
A．克隆胚胎過大可能是克隆胚胎著床后成活率低的原因
B．克隆胚胎過大的原因可能是克隆胚胎的胎盤過大
C．H3K27me3印記基因過度表達抑制胎盤的發育
D．H3K27me3印記基因的表達產物可能影響早期胚胎滋養層細胞的發育
17．我國科研人員將番木瓜環斑病毒（PRSV，一種單鏈RNA病毒）的復制酶基因轉入番木瓜，培育出抗病毒番木瓜“華農一號”。“華農一號”能產生與PRSV的RNA形成局部雙鏈的RNA，阻止病毒的復制。下列分析錯誤的是（　　）
A．培育抗病毒番木瓜“華農一號”需要用到植物組織培養技術
B．培育“華農一號”時，可以用不同的限制酶切割質粒和目的基因
C．PCR擴增復制酶基因時，反應體系中需加入引物和TaqDNA聚合酶
D．“華農一號”通過表達出復制酶使番木瓜獲得對PRSV病毒的抗性
18．基因組印記(通過甲基化實現受精卵中來自雙親的兩個等位基因一個表達另一個不表達)阻礙了哺乳動物孤雌生殖的實現。某研究團隊利用甲基化酶、去甲基化酶和基因編輯技術，改變了小鼠生殖細胞的“基因組印記”，使其“變性”，然后將一個極體注入修飾后的次級卵母細胞(類似受精作用)，最終創造出“孤雌生殖”的小鼠。實驗過程如下圖所示。下列相關敘述正確的是（ ）

A．體外培養卵母細胞時，為防止污染，需將培養皿置于二氧化碳培養箱中進行培養
B．甲基化可能會關閉基因的活性，對某些基因進行去甲基化處理有利于其表達
C．“孤雌小鼠”的誕生過程沒有精子參與，其基因型與提供卵母細胞的雌鼠相同
D．移植后的囊胚進一步擴大，會導致滋養層破裂，胚胎從其中伸展出來
19．新冠病毒通過表面的S蛋白與靶細胞膜上的血管緊張素轉化酶2（ACE2）結合實現入侵。2022年3月，國家衛健委印發《新冠病毒抗原檢測應用方案(試行)》，增加抗原檢測作為核酸檢測的補充手段。抗原檢測采用雙抗體夾心法，其原理如下圖。結合墊處含有足量的、可移動的、與膠體金結合的抗體1，T處固定有抗體2，抗體1和抗體2與新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位點發生特異性結合，呈紅色。C處固定有抗體1的抗體，與抗體1結合也呈紅色。下列敘述正確的是（ ）

A．若檢測結果為陽性，檢測過程中抗原-抗體的特異性結合發生4次
B．若待測樣本中不含新冠病毒，顯色結果為C處和T處均出現紅色
C．用單克隆抗體制備技術制備抗體1，先給小鼠注射純化的S蛋白
D．滅活病毒疫苗制備前期，需要用具有ACE2的細胞培養新冠病毒
20．甲基消草磷屬于抗微管除草劑，可以使植物的微管系統徹底解聚，從而導致有絲分裂中期受到抑制。研究發現甲基消草磷能有效誘導玉米花藥培養的單倍體愈傷組織染色體加倍，可由此獲得純合的玉米新品種。下列敘述錯誤的是（ ）
A．甲基消草磷的功能類似秋水仙素，可以使染色體數目加倍
B．利用玉米花藥進行單倍體育種需要植物組織培養技術的支持
C．上述玉米的育種原理為染色體變異，染色體加倍發生在愈傷組織形成前
D．秋水仙素和甲基消草磷作用于有絲分裂的主要時期分別是前期和中期
21．甲植物具有由核基因控制的多種優良性狀，遠緣植物乙的細胞質中存在抗除草劑基因。科研人員通過以下途徑培育出具有抗除草劑性狀的優良品質丙。圖中字母表示過程、數字序號表示細胞。

下列相關敘述正確的是（ ）
A．過程A應置于高滲溶液中處理，再將①②誘導融合成③
B．過程B無需篩選鑒定，形成雜種細胞后即可接種到培養基中
C．過程C、D采用固體培養基，添加激素的種類和比例相同
D．雜種植物丙為二倍體，有的配子不含抗除草劑基因
22．水體養殖過程中常會產生硝酸銨等而導致水體污染，反硝化細菌能在無氧環境中通過反硝化作用將硝酸銨轉化為氮氣。某人利用如圖所示的方法從龍蝦養殖池中篩選分離出了除氮效率高的反硝化細菌用于污水處理。下列敘述正確的是（ ）

注：BTB培養基初始pH為6.8，BTB是酸堿指示劑，酸性條件下為黃色，中性條件下為綠色，堿性條件下為藍色
A．需將BTB培養基先滅菌后調節pH，以利于反硝化細菌的生長
B．挑選顯藍色的單菌落在固體培養基上劃線分離，以獲得純菌株
C．BTB培養基應以硝酸銨為唯一氮源，不含氮源的培養基不能用于微生物的培養
D．通過觀察未接種的BTB培養基表面是否有菌落，可判斷該培養基是否起到選擇作用
23．實驗小組從蘇云金芽孢桿菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠體內使小鼠產生相應的抗體，再從轉基因抗蟲棉中提取蛋白質電泳分離后和抗體雜交，然后加入帶有特殊標記的抗體以顯示出雜交帶，具體過程如圖所示，下列說法錯誤的是（ ）

A．從轉基因抗蟲棉中分離出的蛋白質相當于抗原
B．二抗可能是帶有放射性同位素標記的一抗的抗體
C．若未顯示出雜交帶，則說明目的基因未導入受體細胞
D．圖示操作的目的是檢測轉基因棉花是否產生Bt毒蛋白
24．科研人員將寒帶地區海魚中的抗凍基因轉入千禧果細胞中，成功培育出抗凍千禧果。下圖為培育過程中使用的Ti質粒示意圖，其中Vir區的基因活化能促進T-DNA的加工和轉移，下列敘述正確的是（　　）

A．構建基因表達載體時，最好選擇限制酶Ⅱ和Ⅲ來切割質粒
B．利用PCR擴增抗凍基因，需提前檢測抗凍基因的全部堿基序列
C．Vir區的基因活化促進抗凍基因整合到千禧果細胞的染色體DNA上
D．利用含卡那霉素的培養基可篩選出成功導入抗凍基因的千禧果細胞
25．一次性口罩的主要成分為聚丙烯纖維(PP)，某科研團隊準備從土壤中篩選出高效降解一次性口罩的細菌。圖甲表示PP分解菌分離與計數的過程，6號試管涂布的三個平板的菌落數為550、601、688；7號試管涂布的三個平板的菌落數為58、73、97；8號試管涂布的三個平板的菌落數為8、15、28。圖乙表示在培養基中加入能與PP結合而顯色的染色劑，目的菌落周圍出現透明圈的情況。下列說法正確的是（ ）
A．圖甲、圖乙所用培養基分別為選擇培養基和鑒別培養基，都以PP作為唯一碳源
B．圖甲、圖乙所用接種方法分別為稀釋涂布平板法和平板劃線法，都需在酒精燈火焰旁進行
C．1 g土壤樣品中含有PP分解菌的估算數目是7．6×1010個，此數值一般偏大
D．可選擇圖乙培養基中d/D比值大的PP分解菌作為目的菌種推廣使用
二、解答題
26．Ⅰ乳糖酶缺乏癥患者體內乳糖酶（LCT）的分泌量較少，導致患者無法完全消化母乳或牛乳中的乳糖，從而引起非感染性腹瀉。工業化生產無乳糖奶粉時，需用乳糖酶將奶中的乳糖除去。為了提高乳糖酶的產量，科研人員從牧民的奶骼（一種近似固體的發酵牛奶制品）中分離純化出了能高效生產乳糖酶的酵母菌，下圖為流程示意圖。請回答下列問題：
注：X-gal為乳糖酶的顯色底物，乳糖酶可以將無色的X-gal分解成半乳糖和藍色的溴靛藍。
(1)將奶酪懸浮液接種到培養基甲中的目的是 。
(2)若要將培養基甲中的菌液稀釋10倍，應進行的操作是從培養基甲中吸取1mL的菌液，置于盛有 的試管中。
(3)X-gal是一種無色物質，能被乳糖酶分解為半乳糖和藍色的溴靛藍，使菌落呈藍色。從含X-gal的培養基中挑選目的菌時，應挑選的是 。
Ⅱ科研工作者也利用生物技術培育出轉基因低乳糖奶牛。如圖為轉基因低乳糖奶牛的培育流程。請據圖分析回答下列問題：
(4)如圖所示，轉基因低乳糖奶牛的培育過程涉及的生物技術有基因工程、 （寫出兩項）
(5)科學家在構建重組質粒T時，首先采用PCR技術對LCT基因進行擴增，在擴增目的基因的操作過程中，加入的物質有：模板DNA、引物、4種 以及耐高溫的DNA聚合酶。若一個該DNA分子在PCR儀中經過4次循環，需要 個引物。
(6)從分子水平上檢測轉基因牛細胞中LCT基因是否表達的方法是 。
(7)在轉基因低乳糖奶牛的乳腺細胞中，可檢測到的物質有_______（填字母）。
A．LCT基因 B．LCTmRNA
C．LCT D．LCT的抗體
27．我國中科院的研究團隊利用細胞工程和基因編輯技術，成功培育出世界上首例只有雙母親來源的孤雌小鼠和雙父親來源的孤雄小鼠，實現了哺乳動物的同性繁殖。實驗流程如圖所示，請回答下列問題：
(1)體內受精時，在精子觸及卵細胞膜的瞬間， 會迅速產生生理反應阻止后來的精子進入。 作為受精的標志（寫出兩項）。
(2)用 對雌性小鼠進行 處理可得到大量卵母細胞，卵細胞轉化為phESC的過程相當于植物組織培養中的 過程。
(3)不考慮致死情況，得到的孤雄小鼠性染色體組成為 。利用胚胎分割的方法對乙進行處理，得到了多只孤雄小鼠，在分割囊胚階段的胚胎時，要注意 。
(4)利用這些孤雄小鼠作為實驗材料進行用于醫學研究的優點是 。（從遺傳物質角度分析）
三、實驗題
28．成纖維細胞生長因子（FGF20）會在肺癌、胃癌和結腸癌細胞中過量表達，可作為潛在的腫瘤標志物。因此抗FGF20抗體可用于癌癥的早期診斷篩查。研究者設計如圖流程制備抗FGF20單克隆抗體。請回答下列問題：
(1)給小鼠注射FGF20，是為了獲得 。②過程先誘導細胞融合，再進行篩選，經篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是 。
(2)③過程需對得到的雜交瘤細胞進行 和 ，經多次篩選，以獲得足夠數量的能分泌所需抗體的細胞。
(3)某些腫瘤細胞表面的PD-LI與細胞毒性T細胞（CTL）表面的PD-I結合能抑制CTL的免疫活性，導致腫瘤免疫逃逸。免疫檢查點療法使用單克隆抗體阻斷PD-LI和PD-I的結合，可恢復CTL的活性，用于腫瘤治療。為進一步提高療效，研究者以黑色素瘤模型小鼠為材料，開展該療法與化療的聯合治療研究。部分結果見圖。
①據圖分析， 療法的治療效果最佳，推測其原因是 。
②某興趣小組基于現有抗體——藥物偶聯物的思路提出了兩種藥物設計方案。方案一：將化療藥物與PD-L1單克隆抗體結合在一起。方案二：將化療藥物與PD-1單克隆抗體結合在一起。你認為 （填“方案一”或“方案二”）可行。
29．番茄不耐寒，冬季容易凍壞，難以儲藏。我國科研人員從某植物中提取了一種抗凍基因AtCOR15a，經過一系列過程獲得轉基因抗凍的番茄新品種，操作流程如圖。回答下列問題：
(1)用PCR技術擴增AtCOR15a基因時需要添加引物，引物的作用是 。
(2)如果要將AtCOR15a基因與質粒正確構建重組DNA分子，一般采用雙酶切法，據圖分析選用的兩種限制酶組合是 。雙酶切法的優勢是 。
(3)圖中是采用 法將目的基因轉移到番茄細胞中，并將其整合到該細胞的 上。
(4)為了提高AtCOR15a基因的表達能力，可將AtCOR15a基因與外源強啟動子連接，如下圖所示。
（注：圖中①、②、③、④表示引物）
利用PCR檢測上述連接是否正確，可選擇的引物組合是 。
(5)為了進一步提高番茄的儲藏時間，可從該植物體內提取ErsⅠ基因（乙烯受體基因），按照下圖流程將ErsⅠ基因重新導回該植物，致使該植物原有ErsⅠ基因翻譯受抑制。已知限制酶EcoRⅠ和XhoⅠ、BamHⅠ切割后露出的黏性末端堿基序列不同，據圖分析，提取的目的基因A、B兩端需分別添加 、 的識別序列。
題號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 D D C D A C B B C D
題號 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 D C C B C C D B D C
題號 21 22 23 24 25
答案 D B C C A
26．(1)增加目的菌的數量（或進行擴大培養）
(2)9mL的無菌水
(3)直徑最大的藍色菌落
(4)核移植、胚胎移植等
(5) 脫氧核苷酸 30
(6)抗原-抗體雜交
(7)ABC
27．(1) 透明帶和卵細胞膜 在卵細胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個極體
(2) 促性腺激素 超數排卵 脫分化
(3) XX、XY或者YY 將內細胞團均等分割
(4)遺傳物質相同，可以基本排除由基因不同造成的個體差異；同時可利用這些遺傳背景相同的動物通過它們之間的對比來分析致病基因
28．(1) 更多的B細胞 既能迅速大量增殖，又能產生抗體
(2) 克隆化培養 抗體檢測
(3) 聯合 該療法既發揮了化療藥物的作用，也增加了活化的CTL數量 方案一
29．(1)使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始復制
(2) BamH Ⅰ和Hind Ⅲ 防止目的基因與質粒自身環化，確保目的基因與質粒正向連接
(3) 農桿菌轉化 染色體DNA
(4)①、③
(5) XhoI EcoRI

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