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3.1 重組DNA技術(shù)的基本工具課件 高中生物人教版選擇性必修3(共37張PPT)

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  1. 二一教育資源

3.1 重組DNA技術(shù)的基本工具課件 高中生物人教版選擇性必修3(共37張PPT)

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(共37張PPT)
我國是棉花的生產(chǎn)和消費(fèi)大國。棉花在種植過程中,常常會(huì)
受到一些害蟲的侵襲,其中以棉鈴蟲最為常見。棉鈴蟲可以使棉 花產(chǎn)量減少三分之一,嚴(yán)重時(shí),甚至能使一片棉田絕收。大量使
用農(nóng)藥殺蟲不僅會(huì)提高生產(chǎn)成本,還可能造成農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境的污 染。要是能培育出自身就能抵抗蟲害的棉花新品種,這一問題就 會(huì)迎刃而解,我國擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉就是在這樣 的背景下產(chǎn)生的。為什么傳統(tǒng)的雜交育種方法培育不出抗蟲棉, 基因工程卻可以呢 基因工程是如何進(jìn)行操作的 它給我們的生 產(chǎn)和生活帶來了怎樣的影響
基因工程是指按照人們的愿望,通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生
物新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的生物類型和生物產(chǎn)品。 從技術(shù)操作層面看,由于基因工程是在DNA 分子水平上進(jìn)行設(shè) 計(jì)和施工的,因此又叫做重組DNA 技術(shù)。
基因工程 是指按照人們的愿望,通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)賦予生物新的遺傳特性,
創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。從技術(shù)操作層面看,由于基因 工程是在DNA 分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做重組DNA 技術(shù)。
>操作對象:基因 (DNA)
>操作水平:DNA 分子水平
> 原 理 : 基因重組
> 結(jié) 果 : 創(chuàng)造出人類需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品
> 意 義 : 定向改造生物遺傳特性;徹底打破種間界限
基因工程
分析基因工程的理論基礎(chǔ)
1.基因工程操作導(dǎo)致的基因重組與有性生殖中的基因重組的主要區(qū)別是什么
有性生殖中的基因重組是隨機(jī)的,并
且只能在同一物種間進(jìn)行重組;
基因工程可以實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)在不同物 種間進(jìn)行重組,并且方向性強(qiáng),可以 定向地改變生物的性狀。
減數(shù)分裂I前期:同源染色體上非 姐妹染色單體間的互換;
減數(shù)分裂I后期:非同源染色體上 非等位基因的自由組合。
2. 為什么不同生物的DNA 分子能拼接起來
① DNA 的基本組成單位都是四種脫氧核苷酸。
② 雙鏈DNA 分子的空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。
3.為什么一種生物的基因可以在另一種生物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)
① 基因是控制生物性狀的獨(dú)立遺傳單位。
② 遺傳信息的傳遞都遵循中心法則。
③ 生物界共用一套遺傳密碼。
分析基因工程的理論基礎(chǔ)
第三章
基因工程
第1節(jié)
重組DNA 技術(shù)的基本工具
露 生 物
生 物 學(xué) (人教版)
選擇性必修三 生物技術(shù)與工程
番木瓜容易受番木瓜環(huán)斑病毒的侵襲。當(dāng)番
木瓜被這種病毒侵染后,產(chǎn)量會(huì)大大下降。科學(xué) 家通過精心設(shè)計(jì),用“分子工具”培育出了轉(zhuǎn)基 因番木瓜,它可以抵御番木瓜環(huán)斑病毒。
DNA 雙螺旋的直徑只有2 nm, 對如此微小 的分子進(jìn)行操作,是一項(xiàng)非常精細(xì)的工作,更需 要專門的“分子工具”。那么,科學(xué)家究竟用到 了哪些“分子工具” 這些“分子工具”各具有 什么特征呢
從社會(huì)中來
△ 轉(zhuǎn)基因番木瓜(左)與非轉(zhuǎn)基因番木瓜(右)
外源 DNA 片段難以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),即
使進(jìn)入也很難穩(wěn)定存在、復(fù)制并表達(dá)。
在培育轉(zhuǎn)基因番木瓜時(shí),既要在體 外對含有所需基因的DNA 分子“切割”、 改造和“拼接” ;又要將重組 DNA 分子 導(dǎo)入番木瓜體細(xì)胞內(nèi),并使其在細(xì)胞中
表 達(dá) 。
>思考:你認(rèn)為完成基因工程的操作可
能需要哪些關(guān)鍵性的工具
“分子運(yùn)輸車”“分子手術(shù)刀”“分子縫合針”
基因工程的基本工具
含目的基因的DNA
目的基因
重組DNA
“分子運(yùn)輸車”
主要是從原核生物中分離純化出來的
數(shù)千種 (限制酶不是一種酶,而是一類酶)
能夠識別雙鏈DNA 分子的特定核苷酸序列,并且
使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開
(核苷酸之間的磷酸酯鍵)
磷酸二酯鍵
限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)—— "分子手術(shù)刀"
1.來 源 : 2.種類:
3. 作 用 :
4.結(jié) 果 :
限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)—— "分子手術(shù)刀"
>當(dāng)限制酶在它的識別序列的中心軸線兩側(cè)將 DNA 分子的兩條鏈分別切開時(shí),產(chǎn)
生的是黏性末端。
① EcoRI 限制酶:能特異性識別5'-GAATTC-3 '序列,并在G 與 A 之間切割
黏性末端
(5'AATT-3')
中軸線
限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)—— "分子手術(shù)刀"
② SmaI 限制酶: 能特異性識別5'-CCCGGG-3'序列,并在C 與G 之間切割
>當(dāng)限制酶在它的識別序列的中心軸線處切開時(shí),產(chǎn)生的是平末端。
平末端
3'
5'
>大多數(shù)限制酶的識別序列由6個(gè)核苷酸組成;
也有少數(shù)限制酶的識別序列由4個(gè)、8個(gè)或其他數(shù) 量的核苷酸組成。
>限制酶所識別的序列的特點(diǎn)是:都可以找到一條
中心軸線,中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA 上的堿基是 反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的,稱為回文序列。正向讀 與另一條鏈反向讀的堿基順序完全一致。
3'
G
A A G
5'
中軸線
5' 3'
G G
G
3' 5'
中軸線
核心歸納
>DNA 分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA 片段末端通常有兩種形式——黏性末端和平
末 端。
EcoRI
Sma I
A
T
A
T
3'
5'
屬名Escherichia 首字母
R 型菌株
EcoR I
種名coli前兩個(gè)字母
從中分離的第一個(gè)限制酶
資料卡 限制酶名字的由來
例如:流感嗜血桿菌
(Haemophilus influenzae)
d株中先后分離到3種限制 酶,則分別命名為:
Hind I、Hind IⅡ、Hind IⅢ
1.根據(jù)上述所學(xué),推測限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么
限制酶是原核生物的一種防御工具,當(dāng)外源DNA 入侵時(shí),它會(huì)利用限制酶來切割
侵入細(xì)胞的外源DNA, 使之失效,以保證自身安全。
甲基 限制酶的識別序列
( 被 甲 基 化 修 飾 )
細(xì)菌A
限制酶A
噬菌體
細(xì)菌的限制一修飾作用
使侵入的外源DNA 被切 割(噬菌體失去繁殖能力) 而自身DNA 得到保護(hù)
2.為什么限制酶不切割細(xì)菌本身的DNA 分 子
含某種限制酶的細(xì)菌的DNA 分子不具備這
種限制酶的識別序列,或者甲基化酶將甲基 轉(zhuǎn)移到了限制酶所識別序列的堿基上,使限 制酶不能將其切開。
思考 · 討論
限制酶的識別序列
(未被甲基化修飾)
思考 ·討論
3.有2個(gè)不同來源的DNA 片段A 和 B,A 片段用限制酶Spe I 進(jìn)行切割,B 片段
分別用限制酶Hind IⅢ、Xba I、EcoR V 和Xho I 進(jìn)行切割。各限制酶的識別序 列和切割位點(diǎn)如下。
(1)A 片段經(jīng)限制酶切割一次可斷開2個(gè)磷酸二酯鍵,產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基
團(tuán),產(chǎn)生 2 個(gè)黏性末端,其黏性末端是 5'CTAG-3' o
思考 · 討論
3. 有2個(gè)不同來源的DNA 片段A 和 B,A 片段用限制酶 Spe I 進(jìn)行切割, B 片 段
分別用限制酶Hind IⅢ、Xba I、EcoR V 和Xho I 進(jìn)行切割。各限制酶的識別序 列和切割位點(diǎn)如下。
(2)同種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端是否相同 不同限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端
是否一定不同
相同;不一定,不同的限制酶切割可能會(huì)形成相同的黏性末端,如SpeI 和XbaI。
> 識 別DNA 分子中不同核苷酸序列,但能切割產(chǎn)生相同黏性末端的限制酶被稱為同尾酶。
思考 · 討論
3.有2個(gè)不同來源的DNA 片段A 和B,A 片段用限制酶Spe I 進(jìn)行切割,B 片段
分別用限制酶Hind IⅢ、Xba I、EcoR V 和Xho I 進(jìn)行切割。各限制酶的識別序 列和切割位點(diǎn)如下。
(3)哪種限制酶切割B 片段產(chǎn)生的DNA 片段能與限制酶 Spe I 切割A(yù) 片段產(chǎn)生的DNA 片段相連 接 為什么 連接完成后,該重組DNA 分子的新連接處能否再被所用的限制酶識別 為什么
限制酶XbaI; 因?yàn)橄拗泼?XbaI 與 SpeI 切割產(chǎn)生了相同的黏性末端。
不能;因?yàn)樗玫膬煞N限制酶均不能識別該重組DNA 分子的新連接處的脫氧核苷酸序列。
切口
5'
A
3'
切口
5'
G T
A
3'
DNA連接酶——"分子縫合針"
1.作用:將兩個(gè)DNA片段連接起來,恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸
二 酯 鍵。
C G G G G G
C
G
C
G
G
G
G
3'
3'
3'
3'
3'
3'
5'
5'
5'
5'
5'
5'
種類 E.coli DNA連接酶
T4 DNA連接酶
來源 大腸桿菌
T4噬菌體
相同點(diǎn) 都能將雙鏈DNA片段"縫合"起來,恢復(fù)被限制酶切開 的磷酸二酯鍵 不同點(diǎn) E.coli DNA連接酶連接具有平末端的DNA片段的效率要 遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于T4 DNA連接酶
DNA連接酶——"分子縫合針"
2.種 類 :
由于黏性末端的堿基是互補(bǔ)的,在連接時(shí),黏性末端可以通過堿基互補(bǔ)配對形
成氫鍵,加快 DNA 連接酶的連接速度,而平末端則不能。所以T4 DNA 連接酶連 接黏性末端的速度比平末端的速度更快。
o
DNA連接酶——"分子縫合針"
> 為 什 么T4 DNA連接酶連接平末端的效率相對較低
5'
3'
3'
5'
心:6
TAA
(;6
(1)DNA 聚合酶只能催化單個(gè)核苷酸加 到已有的核酸片段3'末端的羥基上,形成 磷酸二酯鍵;而DNA 連接酶是催化兩個(gè) DNA 片段之間形成磷酸二酯鍵。
(2)DNA 聚合酶以一條 DNA 鏈為模板, 催化形成與模板鏈互補(bǔ)的DNA 鏈;而
DNA 連接酶催化具有互補(bǔ)黏性末端或平末 端的DNA 片段連接起來,不需要模板。
此外,它們雖同為蛋白質(zhì),但組成、 性質(zhì)等各不相同。
游離的核苷酸 DNA聚合酶
前導(dǎo)鏈
解旋酶
后隨鏈
復(fù)制叉
DNA聚合酶
DNA 連接酶和 DNA 聚合酶是一回事嗎 為什么
▲ DNA 復(fù)制中DNA 聚合酶發(fā)揮作用
項(xiàng)目 限制酶 DNA連接酶 DNA聚合酶 解旋酶
DNA水解酶
作用對象 D N A 分 子 D N A 分 子 片 段 脫氧核苷酸 D N A 分 子
D N A 分 子
作用部位 磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵 氫鍵
磷酸二酯鍵
作用結(jié)果 形成黏性末 端或平末端 形成重組 D N A 分 子 形成新的 D N A 分 子 形成單鏈 D N A 分 子
形成
脫氧核苷酸
核心歸納
與DNA 相關(guān)的幾種酶的比較
基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——"分子運(yùn)輸車"
1.作 用 :將外源基因送入受體細(xì)胞,并在受體細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量復(fù)制
2.種類:質(zhì)粒 、噬菌體、動(dòng)植物病毒等
利用病毒對宿主細(xì)胞的侵染性 擬 核DNA 質(zhì) 粒
是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于真 核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA
之外,并具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙 鏈DNA。
>真正被用作載體的質(zhì)粒,都是在天
然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。
目的基因 插入位點(diǎn)
-復(fù)制原點(diǎn)
▲ 大腸桿菌及質(zhì)粒結(jié)構(gòu)模式圖
氨芐青霉素- 抗性基因
大腸桿菌細(xì)胞
基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——"分子運(yùn)輸車"
3.載體需具備的條件:
(1)有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn) (便于插入目的基因)
(2)能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存 (使目的基因穩(wěn)定存在且數(shù)量可擴(kuò)增)
(3)具有特殊的標(biāo)記基因 (便于重組DNA 分子的篩選/將含有目的基因的 受體細(xì)胞篩選出來)
(4)對受體細(xì)胞無害、易分離 (避免受體細(xì)胞受到損傷)
自我復(fù)制,或整合到受體DNA 上,隨受體DNA 同步復(fù)制
1.若用家蠶作為某基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞,在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中,不
選用噬菌體作為載體,其原因是什么
噬菌體的宿主細(xì)胞是細(xì)菌,而不是家蠶。
2.根據(jù)標(biāo)記基因的作用,有同學(xué)認(rèn)為在含有某種抗生素的培養(yǎng)基中篩選存活的受體
細(xì)胞不一定是導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞,這種說法是否合理 并說明理由
合理,因?yàn)閮H導(dǎo)入載體的和導(dǎo)入插入了目的基因的載體的受體細(xì)胞均能在該培養(yǎng)基
中存活 。
分析載體的種類和載體需具備的條件
載體上的標(biāo)記基因一 般是某種抗生素的抗性基因,而受體細(xì)胞沒有抵抗該抗生
素的能力。將含有某抗生素抗性基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,抗性基因在受體細(xì)胞內(nèi) 表達(dá),受體細(xì)胞對該抗生素產(chǎn)生抗性。在含有該抗生素的培養(yǎng)基上,能夠生存的是 被導(dǎo)入了載體的受體細(xì)胞。如圖所示:
在含有氨芐
進(jìn)入受 青霉素的培
Amp 體細(xì)胞 養(yǎng)基上培養(yǎng)
歸納:標(biāo)記基因的篩選原理
只有含有載體,并 且載體上的抗性基 因表達(dá)的大腸桿菌 才能存活并增殖
含有氨芐青霉素 抗性基因的載體 (如質(zhì)粒)
大腸桿菌中有的 有載體進(jìn)入,有
的沒有載體進(jìn)入
目的基因
LacZ 基因表達(dá)產(chǎn)生的β-半乳糖甘酶能夠分解 X-gal
產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì),從而使菌落呈藍(lán)色;否則菌落呈白色。
請分析下列3種大腸桿菌在含 X-gal 和青霉素的固 體
培養(yǎng)基上的存活情況及菌落顏色。
歸納:標(biāo)記基因的篩選原理
>標(biāo)記基因進(jìn)行篩選重組DNA 分子舉例
氨芐青霉素 抗性基因
存活;藍(lán)色
存活;白色
無法存活
lacZ 基因
思考 · 討論 重組DNA 分子
5'-ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC-3'
3'-TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG-5'
5'-TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC-3'
3'-AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG-5'
討論:1.剪刀和透明膠帶分別代表哪種
“分子工具”
2.你制作的黏性末端的堿基能不能互補(bǔ)配 對 如果不能,可能是什么原因造成的
3.你插入的DNA 片段能稱得上一個(gè)基因 嗎
請你在上述序列中找到EcoR I 的識
別序列和切割位點(diǎn)。然后,用剪刀進(jìn)行 “切割”。待切割位點(diǎn)全部切開后,將 從下面那條DNA 鏈上切下的片段重組到 上面那條DNA 鏈的切口處,并用透明膠 帶將切口粘起來。
5'- TCCTAG -3' 5'-AATTCTCGGTATG-3' 5'- AATTCCATAC-3'
3'-AGGATCTTAA-5' 3'-GAGCCATACTTAA-5' 3'-GGTATG-5'
5'- ATAGCATGCTATCCATGAATTCTCGGTATGAATTCGGCATAC -3'
3'- TATCGTACGATAGGTACTTAAGAGCCATACTTAAGCCGTATG-5'
個(gè) 個(gè)
膠帶 膠帶
5'-ATAGCATGCTATCCATG-3'
3'-TATCGTACGATAGGTACTTAA-5'
思考 ·討論 重組DNA 分子
5'-AATTCGGCATAC-3'
3'-GCCGTATG-5'
1.實(shí)驗(yàn)思路:
裂解細(xì)胞使核酸分子釋放出來
從釋放出來的細(xì)胞成分中分離核酸分子
純化獲得核酸分子
探究 · 實(shí)踐 DNA 的粗提取與鑒定
2.實(shí)驗(yàn)原理:
( 1 ) 提 取 DNA 的原理: DNA、RNA、 蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存 在差異,可以利用這些差異,選用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)方法 對它們進(jìn)行提取。
>DNA 不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精
>DNA 在不同濃度的NaCl 溶液中溶解度不
同,能溶于2 mol/L 的 NaCl 溶液
> 初步分離DNA 和蛋白質(zhì)
DNA 溶解度
溶解 DNA
o 0.14
NaCl 濃度(mol/L)
探究 · 實(shí)踐 DNA 的粗提取與鑒定
( 2 ) 鑒 定DNA 的原理:在一定溫度下,DNA 遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。
3.材料用具:
( 1 ) 選 材 :DNA 含量相對較高的生物組織,如新鮮洋蔥、香蕉、菠菜、菜花和豬
肝等 。
注意:不能選擇哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞,因?yàn)椴溉閯?dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核
和線粒體,幾乎不含 DNA。
(2)試劑: ①研磨液
②體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精
③ 2 mol/L的NaCl 溶液
④ 二苯胺試劑
⑤ 蒸餾水
探究 ·實(shí)踐 DNA 的粗提取與鑒定
→ 提取、溶解DNA
→ 析出D NA
→ 溶 解DNA
→ 鑒 定DNA (要現(xiàn)配現(xiàn))
4.方法步驟:
取材、研磨 稱取30g 洋蔥,切碎,然后放入研缽中,
倒入10mL 研磨液,充分研磨。
> 研 磨 目 的 :破碎細(xì)胞,使核物質(zhì)容易溶
解在研磨液中。
探究 · 實(shí)踐 DNA 的粗提取與鑒定
研磨洋蔥
方法一:在漏斗中墊上紗布,將洋蔥研磨液過濾到燒杯中, 在4℃冰箱中放置幾分鐘后,再取上清液。
方法二:直接將研磨液倒入塑料離心管中,1500r/min的轉(zhuǎn)速 下離心5min, 再取上清液放入燒杯中。
>思考:①上清液中除DNA 之外,可能含有哪些雜質(zhì)
可能含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)
②低溫放置幾分鐘有什么作用
抑制核酸水解酶的活性,進(jìn)而抑制DNA 降解;
抑制DNA 分子運(yùn)動(dòng),使DNA 易形成沉淀析出。
4.方法步驟:
取材、研磨
過濾或離心
探究 · 實(shí)踐 DNA 的粗提取與鑒定
方法一:在上清液中加入體積相等的、 預(yù)冷的酒精溶
液(體積分?jǐn)?shù)為95%),靜置2-3min, 溶液中出現(xiàn)的
白色絲狀物就是粗提取的DNA 。用玻璃棒沿一個(gè)方向
攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸去上面的水分;
> 思考:①攪拌時(shí)應(yīng)輕緩、并沿一個(gè)方向
減少DNA 斷裂,以便獲得較完整的DNA 分子
②酒精預(yù)冷的作用
低溫可抑制核酸水解酶的活性,進(jìn)而抑制DNA 降解; 用冷卻的酒精析出DNA 低溫抑制DNA 分子運(yùn)動(dòng),使DNA 易形成沉淀析出;
低溫有利于增加DNA 的柔韌性,減少斷裂。
方法二:將溶液倒入塑料離心管中,在10000r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min, 棄上清液,將管底的沉淀物(粗提取的DNA) 晾 干。
探究 · 實(shí)踐 DNA 的粗提取與鑒定
取材、研磨
過濾或離心
分 離
4.方 法 步 驟 :
DNA 的粗提取與鑒定
取兩支20 mL 的試管,各加入2mol/L 的NaCl 溶液5mL 。將 絲
狀物或沉淀物溶于其中一 支試管的NaCl 溶液中。向兩支試 管中各加入4mL 的 二苯胺試劑。 混合均勻后,將試管置于沸 水中加熱5min 。待試管冷卻后,比較兩支試管中溶液顏 色 的 變 化。
對照組 實(shí)驗(yàn)組
溶液藍(lán)色的
深淺與溶液
中DNA 的
含量的多少
有 關(guān) 。
鑒定DNA 鑒定結(jié)果
探究 · 實(shí)踐
4.方法步驟:
取材、研磨
過濾或離心
分 離
鑒 定
> 思考討論
1.如果選用雞血細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如何快速破碎細(xì)胞
將雞血細(xì)胞置于蒸餾水中,待細(xì)胞漲破后,收集濾液。
2.有時(shí)會(huì)在DNA 濾液中添加嫩肉粉(木瓜蛋白酶),這樣有什么好處
利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,但不分解 DNA, 有利于DNA 與蛋白質(zhì)分開。
3. 有時(shí)還會(huì)反復(fù)利用不同濃度的NaCl 溶液來溶解、析出DNA, 試猜想該操作的目

進(jìn)一步純化DNA—— 用高鹽濃度的溶液溶解 DNA, 能除去在高鹽溶液中不能溶解
的雜質(zhì);用低鹽溶液使DNA 析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過 反復(fù)溶解與析出 DNA, 就能夠除去與DNA 溶解度不同的多種雜質(zhì)。
探究 · 實(shí)踐 DNA 的粗提取與鑒定
重組DNA技術(shù)的基本工具
分子縫合針: 分子運(yùn)輸車:基因進(jìn) DNA連接酶 入受體細(xì)胞的載體
載體:質(zhì)粒、噬
菌體、動(dòng)植物病
毒等
課堂小結(jié)
分子手術(shù)刀:
限制性內(nèi)切 核酸酶
作用 部位 磷酸二酯鍵
作為載體
的條件

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