資源簡介

課時3　通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
課時概念解析　本課時的概念為“細胞融合就是在一些融合因子的作用下，將兩個或兩個以上的細胞合并成一個細胞的技術”“細胞融合技術是制備單克隆抗體的基礎”，這兩個概念的建構需要以下基本概念或證據的支持：
(1)可通過一定手段誘導兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞；(2)利用細胞融合技術和細胞篩選可以制備單克隆抗體。
概念1　兩個或多個動物細胞經誘導可融合形成一個細胞
動物細胞融合技術
[辨正誤]
(1)促進動物細胞融合的方法與誘導植物原生質體融合的方法相同，有PEG處理、電流刺激和滅活病毒誘導等。(　　)
(2)1967年，科學家發現人鼠融合細胞中鼠的染色體優先丟失。(　　)
(3)仙臺病毒被滅活后才可用于細胞融合，滅活的手段是經紫外線照射。(　　)
(生命科學史情境)1962年，科學家利用滅活的仙臺病毒，使體外培養的腹水瘤細胞成功融合。后來，科學家又成功誘導了不同種動物的體細胞融合(如下圖所示)，并且能將雜交細胞培養成活。
滅活的病毒誘導細胞融合的過程示意圖
(1)動物細胞融合的結構基礎是什么？_______________________________
_________________________________________________________________
__________________________________________________________________
(2)除了滅活的病毒外，誘導動物細胞融合還有哪些常用的技術手段？___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
(3)經誘導后，是否所有細胞都能融合？只考慮兩兩融合，共能產生幾種融合細胞？
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
1.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較
2.重組細胞、雜交細胞與雜種細胞
【典例應用】
例1 (2024·浙江溫州高二期中)如圖為細胞融合的示意圖。下列敘述正確的是(　　)
A.若a細胞和b細胞是植物體細胞，二者融合成一個雜種細胞就是植物體細胞雜交
B.若a細胞和b細胞是植物細胞，需先脫分化再誘導融合
C.a細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現
D.c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因
例2 對比動物細胞融合和植物體細胞雜交技術，下列論述合理的是(　　)
A.均可使用PEG、電刺激或滅活病毒的方法誘導細胞融合
B.兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離
C.兩者都需要用到纖維素酶和果膠酶
D.在適宜的條件下，均可發育成完整個體
概念2　細胞融合技術是制備單克隆抗體的基礎
1.抗體的早期生產
2.單克隆抗體的制備
(1)單克隆抗體的定義：是指由一個B淋巴細胞增殖形成的細胞群所產生的單一型抗體分子。
(2)單克隆抗體的制備過程
(3)單克隆抗體的優點
①純度________；②可大量制備；③特異性________、靈敏度________。
(4)單克隆抗體的“三大”應用
[辨正誤]
(1)血清中獲取的抗體是由多種抗體混合在一起的多克隆抗體，能夠識別多種抗原，導致其特異性較差。(　　)
(2)能產生特定抗體的B淋巴細胞不能增殖，能增殖的瘤細胞不能產生抗體，而雜交瘤細胞既能迅速大量增殖，又能產生抗體。(　　)
(3)B淋巴細胞和瘤細胞融合后需要用HAT培養基進行篩選，親代細胞和同核體細胞不能在該培養基上生長，只有異核體細胞才能在該培養基上生長。(　　)
1.(生命科學史情境)1975年，英國科學家米爾斯坦和德國科學家科勒，將一種能產生特定抗體的B細胞與能在體外無限增殖的骨髓瘤細胞進行融合，形成了雜交瘤細胞，然后通過篩選和培養，獲得了單克隆抗體，并因此榮獲1984年的諾貝爾生理學或醫學獎。
下圖表示某種單克隆抗體的制備過程，據圖回答下列問題：
(1)由圖可知，單克隆抗體制備過程運用了哪些主要的動物細胞工程技術手段？__________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
(2)經第一次篩選，被淘汰的細胞有哪些類型？
___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
(3)經第一次篩選，篩選出的是何種細胞？有何特點？____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
(4)經第二次篩選，選出的細胞屬于什么類型？
___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
2.(生活、學習與實踐情境)使用高效的細胞毒素類藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞。但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害，這限制了它在臨床上的應用。抗體—藥物偶聯物(ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合，實現了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成，它的作用機制如圖所示。
(1)據圖分析，ADC進入腫瘤細胞的方式是什么？需不需要能量？___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
(2)ADC的抗體和藥物各具有什么作用？
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
(3)ADC與傳統的化療相比較具有什么優勢？
___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
單克隆抗體制備過程中兩次篩選的比較
【典例應用】
例3 (2024·舟山質檢)下圖表示單克隆抗體制備部分流程圖，下列敘述正確的是(　　)
A.制備單克隆抗體的技術有動物細胞培養、動物細胞融合和胚胎移植技術
B.若要將HAT培養基中的細胞分開培養，一般不需要用胰蛋白酶處理
C.選育出產生高特異性抗體的細胞群體即為細胞系
D.該技術不能用于制作新冠病毒抗原檢測試劑盒
例4 (2024·嘉興高二期末)抗體—藥物偶聯物(ADC)通過將細胞毒素類藥物與單克隆抗體結合，實現對腫瘤細胞的選擇性殺傷，過程如圖所示。相關敘述正確的是(　　)
A.ADC進入腫瘤細胞的過程體現了細胞膜的流動性
B.抗體進入細胞后激活溶酶體酶導致腫瘤細胞凋亡
C.單克隆抗體攜帶的細胞毒素與腫瘤細胞特異結合
D.腫瘤細胞的溶酶體中含有能特異性水解藥物的酶
1.(2023·北京卷，12)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關制備過程的敘述錯誤的是(　　)
A.需要使用動物細胞培養技術
B.需要制備用PTH免疫的小鼠
C.利用抗原－抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞
D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞
2.(2023·湖北卷，22節選)某病毒對動物養殖業危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術路線如圖所示。
回答下列問題：
(1)與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫脾細胞(含漿細胞)________(填“需要”或“不需要”)通過原代培養擴大細胞數量；添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對細胞膜的作用是_____________________________________________。
(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養基(如HAT培養基)，該培養基對____________和____________生長具有抑制作用。
(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是___________________________________________________________________
___________________________________________________________________。
3.(2020·江蘇卷，28改編)病毒可通過表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結合，侵入人體，引起感染。圖1為病毒侵入后，人體內發生的部分免疫反應示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的黏附或入侵，故抗體藥物的研發已成為治療新冠感染的研究熱點之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據圖回答下列問題：
(1)圖1中人體內吞噬細胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細胞表面，被________細胞表面的受體識別后激活該細胞。
(2)B細胞識別入侵的病毒后，在白細胞介素－2作用下，經過細胞的____________，形成____________細胞。
(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學檢查，檢測病毒的________；采集血液樣本主要用于血清學檢查，檢測_________________________________________________________________。
(4)據圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射________免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養基篩選獲得________細胞。因為同一種抗原可能激活________細胞，還需繼續篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細胞株。
課時3　通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
概念1
自主建構
融合因子　相同　不同　遠　新特性　細胞膜的流動性　聚乙二醇　電流刺激　單克隆抗體
辨正誤
(1)×　提示：誘導植物原生質體融合的方法不包括滅活病毒誘導。
(2)×　提示：人鼠融合細胞中人的染色體優先丟失。
(3)√
合作探究
(1)提示：細胞膜的流動性。
(2)提示：聚乙二醇(PEG)、電流刺激等。
(3)提示：否。3種。
典例應用
例1　C　[若a細胞和b細胞是植物體細胞，二者融合成一個雜種細胞后，再培育成一個雜種植株才是植物體細胞雜交，A錯誤；若a細胞和b細胞是植物體細胞，要先去除細胞壁再誘導融合，B錯誤；c細胞包含a細胞和b細胞所有的基因，但不會同時表達所有基因，D錯誤。]
例2　B　[滅活病毒是動物細胞融合特有的，A錯誤；動物細胞融合和植物體細胞雜交技術都可以打破生殖隔離，B正確；植物體細胞雜交技術需要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，動物細胞融合不需要，C錯誤；目前，動物細胞融合不能發育成完整個體，D錯誤。]
概念2
自主建構
1．抗原　血清　低　低　差
2．(2)B淋巴細胞　雜交瘤細胞　(3)①高　③強　高　(4)腫瘤　正常
辨正誤
(1)√　(2)√　(3)√
合作探究
1．(1)提示：動物細胞融合技術、動物細胞培養技術等。
(2)提示：未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞。
(3)提示：雜交瘤細胞。既能迅速大量增殖，又能產生抗體。
(4)提示：能產生特定抗體的雜交瘤細胞。
2．(1)提示：胞吞。需要能量。
(2)提示：抗體具有靶向運輸作用；藥物具有殺死腫瘤細胞的作用。
(3)提示：ADC協同發揮了抗體特異性識別的靶向作用和細胞毒素對腫瘤細胞的殺傷作用，具有靶點清楚、毒副作用小的優點。
典例應用
例3　B　[制備單克隆抗體的技術有動物細胞培養、動物細胞融合，A錯誤；HAT培養基中的細胞本來就處于游離狀態，因此若要將HAT培養基中的細胞分開培養，一般不需要用胰蛋白酶處理，B正確；原代培養物經首次傳代成功后即成細胞系，選育出產生高特異性抗體的細胞群體不是細胞系，C錯誤；該技術制備的單克隆抗體，能用于制作新冠病毒抗原檢測試劑盒，D錯誤。]
例4　A　[根據題圖分析可知，ADC可通過胞吞的方式進入腫瘤細胞，體現了細胞膜的流動性，A正確；抗體進入細胞后被溶酶體裂解，釋放的藥物導致細胞凋亡，B錯誤；據圖可知，攜帶細胞毒素的單克隆抗體與腫瘤細胞膜上的特異性受體結合，C錯誤；腫瘤細胞的溶酶體中含有能水解抗體—藥物偶聯物(ADC)的酶，從而將抗體—藥物偶聯物(ADC)水解，使藥物被釋放出來發揮作用，藥物并沒有被溶酶體內的酶水解，D錯誤。]
感悟真題
1．D　[單克隆抗體制備過程中需要對骨髓瘤細胞等進行培養，即需要使用動物細胞培養技術，A正確；該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，故應用PTH刺激小鼠，使其產生相應的B細胞，B正確；抗原與抗體的結合具有特異性，可利用抗原－抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞，C正確；由于一種B細胞經分化形成漿細胞后通常只能產生一種抗體，故篩選出的單個雜交瘤細胞無法分泌多種抗體，D錯誤。]
2．(1)不需要　增加細胞膜的流動性
(2)未融合的親本細胞　融合的具有同種核的細胞
(3)通過抗體檢測呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細胞
解析　(1)由于漿細胞的分裂能力比較差，與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫的脾細胞(含漿細胞)，不需要通過原代培養擴大細胞數量。脂溶性物質PEG可使細胞接觸處的磷脂分子重新排布，細胞膜打開，細胞發生融合。(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，用特定的選擇培養基進行篩選，在該培養基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，是運用了抗原－抗體雜交技術，抗體檢測呈陽性的細胞，即為所需的雜交瘤細胞。
3．(1)輔助性T　(2)增殖、分化　漿細胞和記憶B　(3)核酸　抗新型冠狀病毒抗體
(4)刺突蛋白(或S蛋白)　雜交瘤　多種B
解析　(1)圖1中，吞噬細胞吞噬病毒，并將病毒抗原呈遞給輔助性T細胞，后者識別抗原后被激活，分泌白細胞介素－2。(2)B細胞識別入侵的病毒后，在白細胞介素－2作用下，經過細胞的增殖、分化，形成漿細胞和記憶B細胞。(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子用于病原學檢查時，檢測的是病毒的核酸；采集血液樣本用于血清學檢查時，檢測的是抗新型冠狀病毒抗體。(4)為了誘導小鼠產生能夠分泌抗S蛋白抗體的B淋巴細胞，實驗時需先給小鼠注射S蛋白，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養基篩選可獲得雜交瘤細胞。因為同一種抗原可能激活多種B淋巴細胞，還需繼續篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細胞株。(共41張PPT)
第三章　動物細胞工程
課時3　
通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
本課時的概念為“細胞融合就是在一些融合因子的作用下，將兩個或兩個以上的細胞合并成一個細胞的技術”“細胞融合技術是制備單克隆抗體的基礎”，這兩個概念的建構需要以下基本概念或證據的支持：
(1)可通過一定手段誘導兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞；(2)利用細胞融合技術和細胞篩選可以制備單克隆抗體。
課時概念解析
目錄 CONTENTS
1. 兩個或多個動物細胞經誘導可融合形成一個細胞
2.細胞融合技術是制備單克隆抗體的基礎
3.感悟真題
自主建構
合作探究
合作探究
課時概念圖
自主建構
動物細胞融合技術
融合因子
相同
不同
遠
新特性
細胞膜的流動性
聚乙二醇
電流刺激
單克隆抗體
×
[辨正誤]
(1)促進動物細胞融合的方法與誘導植物原生質體融合的方法相同，有PEG處理、電流刺激和滅活病毒誘導等。( )
提示：誘導植物原生質體融合的方法不包括滅活病毒誘導。
(2)1967年，科學家發現人鼠融合細胞中鼠的染色體優先丟失。( )
提示：人鼠融合細胞中人的染色體優先丟失。
(3)仙臺病毒被滅活后才可用于細胞融合，滅活的手段是經紫外線照射。( )
×
√
(生命科學史情境)1962年，科學家利用滅活的仙臺病毒，使體外培養的腹水瘤細胞成功融合。后來，科學家又成功誘導了不同種動物的體細胞融合(如下圖所示)，并且能將雜交細胞培養成活。
滅活的病毒誘導細胞融合的過程示意圖
(1)動物細胞融合的結構基礎是什么？
提示：細胞膜的流動性。
(2)除了滅活的病毒外，誘導動物細胞融合還有哪些常用的技術手段？
提示：聚乙二醇(PEG)、電流刺激等。
(3)經誘導后，是否所有細胞都能融合？只考慮兩兩融合，共能產生幾種融合細胞？
提示：否。3種。
1.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較
2.重組細胞、雜交細胞與雜種細胞
【典例應用 】
C
例1 (2024·浙江溫州高二期中)如圖為細胞融合的示意圖。下列敘述正確的是(　　)
A.若a細胞和b細胞是植物體細胞，二者融合成一個雜種細胞就是植物體細胞雜交
B.若a細胞和b細胞是植物細胞，需先脫分化再誘導融合
C.a細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現
D.c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因
解析：若a細胞和b細胞是植物體細胞，二者融合成一個雜種細胞后，再培育成一個雜種植株才是植物體細胞雜交，A錯誤；
若a細胞和b細胞是植物體細胞，要先去除細胞壁再誘導融合，B錯誤；
c細胞包含a細胞和b細胞所有的基因，但不會同時表達所有基因，D錯誤。
A.若a細胞和b細胞是植物體細胞，二者融合成一個雜種細胞就是植物體細胞雜交
B.若a細胞和b細胞是植物細胞，需先脫分化再誘導融合
C.a細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現
D.c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因
B
例2 對比動物細胞融合和植物體細胞雜交技術，下列論述合理的是(　　)
A.均可使用PEG、電刺激或滅活病毒的方法誘導細胞融合
B.兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離
C.兩者都需要用到纖維素酶和果膠酶
D.在適宜的條件下，均可發育成完整個體
解析：滅活病毒是動物細胞融合特有的，A錯誤；
動物細胞融合和植物體細胞雜交技術都可以打破生殖隔離，B正確；
植物體細胞雜交技術需要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，動物細胞融合不需要，C錯誤；
目前，動物細胞融合不能發育成完整個體，D錯誤。
抗原
1.抗體的早期生產
血清
低
低
差
2.單克隆抗體的制備
(1)單克隆抗體的定義：是指由一個B淋巴細胞增殖形成的細胞群所產生的單一型抗體分子。
(2)單克隆抗體的制備過程
B淋巴細胞
雜交瘤細胞
(3)單克隆抗體的優點
①純度____；②可大量制備；③特異性____、靈敏度____。
(4)單克隆抗體的“三大”應用
強
高
腫瘤
正常
高
√
[辨正誤]
(1)血清中獲取的抗體是由多種抗體混合在一起的多克隆抗體，能夠識別多種抗原，導致其特異性較差。( )
(2)能產生特定抗體的B淋巴細胞不能增殖，能增殖的瘤細胞不能產生抗體，而雜交瘤細胞既能迅速大量增殖，又能產生抗體。( )
(3)B淋巴細胞和瘤細胞融合后需要用HAT培養基進行篩選，親代細胞和同核體細胞不能在該培養基上生長，只有異核體細胞才能在該培養基上生長。( )
√
√
1.(生命科學史情境)1975年，英國科學家米爾斯坦和德國科學家科勒，將一種能產生特定抗體的B細胞與能在體外無限增殖的骨髓瘤細胞進行融合，形成了雜交瘤細胞，然后通過篩選和培養，獲得了單克隆抗體，并因此榮獲1984年的諾貝爾生理學或醫學獎。
下圖表示某種單克隆抗體的制備過程，據圖回答下列問題：
(1)由圖可知，單克隆抗體制備過程運用了哪些主要的動物細胞工程技術手段？
提示：動物細胞融合技術、動物細胞培養技術等。
(2)經第一次篩選，被淘汰的細胞有哪些類型？
提示：未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞。
(3)經第一次篩選，篩選出的是何種細胞？有何特點？
提示：雜交瘤細胞。既能迅速大量增殖，又能產生抗體。
(4)經第二次篩選，選出的細胞屬于什么類型？
提示：能產生特定抗體的雜交瘤細胞。
2.(生活、學習與實踐情境)使用高效的細胞毒素類藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞。但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害，這限制了它在臨床上的應用。抗體—藥物偶聯物(ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合，實現了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成，它的作用機制如圖所示。
(1)據圖分析，ADC進入腫瘤細胞的方式是什么？需不需要能量？
提示：胞吞。需要能量。
(2)ADC的抗體和藥物各具有什么作用？
提示：抗體具有靶向運輸作用；藥物具有殺死腫瘤細胞的作用。
(3)ADC與傳統的化療相比較具有什么優勢？
提示：ADC協同發揮了抗體特異性識別的靶向作用和細胞毒素對腫瘤細胞的殺傷作用，具有靶點清楚、毒副作用小的優點。
單克隆抗體制備過程中
兩次篩選的比較
B
例3 (2024·舟山質檢)下圖表示單克隆抗體制備部分流程圖，下列敘述正確的是(　　)
【典例應用 】
A.制備單克隆抗體的技術有動物細胞培養、
動物細胞融合和胚胎移植技術
B.若要將HAT培養基中的細胞分開培養，
一般不需要用胰蛋白酶處理
C.選育出產生高特異性抗體的細胞群體即為細胞系
D.該技術不能用于制作新冠病毒抗原檢測試劑盒
解析：制備單克隆抗體的技術有動物細胞培養、動物細胞融合，A錯誤；
HAT培養基中的細胞本來就處于游離狀態，因此若要將HAT培養基中的細胞分開培養，一般不需要用胰蛋白酶處理，B正確；
原代培養物經首次傳代成功后即成細胞系，選育出產生高特異性抗體的細胞群體不是細胞系，C錯誤；
該技術制備的單克隆抗體，能用于制作新冠病毒抗原檢測試劑盒，D錯誤。
A.制備單克隆抗體的技術有動物細胞培養、動物細胞融合和胚胎移植技術
B.若要將HAT培養基中的細胞分開培養，一般不需要用胰蛋白酶處理
C.選育出產生高特異性抗體的細胞群體即為細胞系
D.該技術不能用于制作新冠病毒抗原檢測試劑盒
A
例4 (2024·嘉興高二期末)抗體—藥物偶聯物(ADC)通過將細胞毒素類藥物與單克隆抗體結合，實現對腫瘤細胞的選擇性殺傷，過程如圖所示。相關敘述正確的是(　　)
A.ADC進入腫瘤細胞的過程
體現了細胞膜的流動性
B.抗體進入細胞后激活溶酶
體酶導致腫瘤細胞凋亡
C.單克隆抗體攜帶的細胞毒素與腫瘤細胞特異結合
D.腫瘤細胞的溶酶體中含有能特異性水解藥物的酶
解析：根據題圖分析可知，ADC可通過胞吞的方式進入腫瘤細胞，體現了細胞膜的流動性，A正確；
抗體進入細胞后被溶酶體裂解，釋放的藥物導致細胞凋亡，B錯誤；
據圖可知，攜帶細胞毒素的單克隆抗體與腫瘤細胞膜上的特異性受體結合，C錯誤；
腫瘤細胞的溶酶體中含有能水解抗體—藥物偶聯物(ADC)的酶，從而將抗體—藥物偶聯物(ADC)水解，使藥物被釋放出來發揮作用，藥物并沒有被溶酶體內的酶水解，D錯誤。
A.ADC進入腫瘤細胞的過程體現了細胞膜的流動性
B.抗體進入細胞后激活溶酶體酶導致腫瘤細胞凋亡
C.單克隆抗體攜帶的細胞毒素與腫瘤細胞特異結合
D.腫瘤細胞的溶酶體中含有能特異性水解藥物的酶
D
1.(2023·北京卷，12)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關制備過程的敘述錯誤的是(　　)
A.需要使用動物細胞培養技術
B.需要制備用PTH免疫的小鼠
C.利用抗原－抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞
D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞
解析：單克隆抗體制備過程中需要對骨髓瘤細胞等進行培養，即需要使用動物細胞培養技術，A正確；
該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，故應用PTH刺激小鼠，使其產生相應的B細胞，B正確；
抗原與抗體的結合具有特異性，可利用抗原－抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞，C正確；
由于一種B細胞經分化形成漿細胞后通常只能產生一種抗體，故篩選出的單個雜交瘤細胞無法分泌多種抗體，D錯誤。
2.(2023·湖北卷，22節選)某病毒對動物養殖業危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術路線如圖所示。
回答下列問題：
(1)與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫脾細胞(含漿細胞)__________(填“需要”或“不需要”)通過原代培養擴大細胞數量；添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對細胞膜的作用是___________________________________。
不需要
增加細胞膜的流動性
(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養基(如HAT培養基)，該培養基對____________________和____________________________生長具有抑制作用。
(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是___________________________________________________________________。
未融合的親本細胞
融合的具有同種核的細胞
通過抗體檢測呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細胞
解析：(1)由于漿細胞的分裂能力比較差，與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫的脾細胞(含漿細胞)，不需要通過原代培養擴大細胞數量。脂溶性物質PEG可使細胞接觸處的磷脂分子重新排布，細胞膜打開，細胞發生融合。
(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，用特定的選擇培養基進行篩選，在該培養基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長。
(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，是運用了抗原－抗體雜交技術，抗體檢測呈陽性的細胞，即為所需的雜交瘤細胞。
3.(2020·江蘇卷，28改編)病毒可通過表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結合，侵入人體，引起感染。圖1為病毒侵入后，人體內發生的部分免疫反應示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的黏附或入侵，故抗體藥物的研發已成為治療新冠感染的研究熱點之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據圖回答下列問題：
(1)圖1中人體內吞噬細胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細胞表面，被________細胞表面的受體識別后激活該細胞。
(2)B細胞識別入侵的病毒后，在白細胞介素－2作用下，經過細胞的____________，形成_______________細胞。
輔助性T
增殖、分化
漿細胞和記憶B
(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學檢查，檢測病毒的________；采集血液樣本主要用于血清學檢查，檢測___________________________________________________________________。
核酸
抗新型冠狀病毒抗體
(4)據圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射____________________免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養基篩選獲得________細胞。因為同一種抗原可能激活________細胞，還需繼續篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細胞株。
刺突蛋白(或S蛋白)
雜交瘤
多種B
解析：(1)圖1中，吞噬細胞吞噬病毒，并將病毒抗原呈遞給輔助性T細胞，后者識別抗原后被激活，分泌白細胞介素－2。
(2)B細胞識別入侵的病毒后，在白細胞介素－2作用下，經過細胞的增殖、分化，形成漿細胞和記憶B細胞。
(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子用于病原學檢查時，檢測的是病毒的核酸；采集血液樣本用于血清學檢查時，檢測的是抗新型冠狀病毒抗體。
(4)為了誘導小鼠產生能夠分泌抗S蛋白抗體的B淋巴細胞，實驗時需先給小鼠注射S蛋白，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養基篩選可獲得雜交瘤細胞。因為同一種抗原可能激活多種B淋巴細胞，還需繼續篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細胞株。課時精練11　通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
(時間：30分鐘分值：50分)
選擇題：第1～10題，每小題3分，共30分。答案P172
【基礎對點】
題型1　動物細胞融合
1.有關動物細胞融合的敘述，正確的是(　　)
動物細胞融合的原理是細胞的全能性
只有兩個動物細胞結合成一個細胞的過程才叫動物細胞融合
滅活的仙臺病毒是動物細胞融合和植物體細胞雜交常用的促融劑
細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能
2.關于動物細胞融合的說法錯誤的是(　　)
常用于誘導動物細胞融合的方法有PEG法、電流刺激、紫外線照射法和滅活病毒誘導法等
動物細胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞
動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞的過程
細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能
3.如圖表示仙臺病毒誘導動物細胞融合的部分過程，下列敘述正確的是(　　)
細胞A和細胞B必須為同種細胞才能融合
細胞C同時有細胞A和細胞B的遺傳物質
該融合過程體現了細胞膜具有選擇透過性
此過程的原理是動物細胞具有全能性
題型2　單克隆抗體的制備
4.利用雜交瘤技術制備針對特定抗原的單克隆抗體過程如圖所示。下列敘述正確的是(　　)
用于融合的B淋巴細胞應從未受抗原刺激的動物中提取
單克隆抗體的制備與植物體細胞雜交技術均依據細胞全能性原理
篩選2過程需要用到抗原抗體特異性結合的特性
選出的雜交瘤細胞只能通過體外培養獲得大量單克隆抗體
5.(2024·海淀區高二期末)利用動物細胞融合方法，以SARS病毒刺突蛋白作為抗原制備出單克隆抗體(抗體D)。如圖為使用不同抗體抑制病毒感染細胞的檢測結果。下列相關敘述錯誤的是(　　)
對照抗體應不與SARS病毒特異性結合
將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內，可獲得大量抗體D
檢測抗體效果時需將SARS病毒與細胞混合一段時間后再加入抗體
抗體D需達到一定濃度才有明顯抑制效果
6.(2024·強基聯盟聯考)如圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT－)，在HAT選擇培養基中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述錯誤的是(　　)
可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合
兩兩融合的細胞都能在HAT培養基中生長
雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產
細胞膜的流動性是細胞融合的基礎
7.犬細小病毒(CPV)單克隆抗體(Cpv McAb)可抑制病毒對宿主細胞的侵染及病毒的復制，進而殺滅幼犬體內病毒。下列相關敘述，錯誤的是(　　)
在獲得能分泌Cpv McAb的雜交瘤細胞的過程中需進行一次篩選
給幼犬注射CPV后，CPV的抗體檢測呈陽性，說明發生了體液免疫反應
在Cpv McAb的制備過程中用到了動物細胞培養和動物細胞融合技術
對雜交瘤細胞培養時，需要無菌無毒環境，且溫度、氣體環境等條件要適宜
8.如圖，核苷酸合成有兩個途徑，物質A可以阻斷其中的全合成途徑。正常細胞內含有補救合成途徑所必需的轉化酶和激酶。制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞缺乏轉化酶。現用加入H、A、T三種物質的“HAT培養基”來篩選特定的雜交瘤細胞。關于篩選原理的敘述正確的是(　　)
免疫的B細胞及其相互融合細胞因全合成途徑被A阻斷，在HAT培養基上不能增殖
骨髓瘤細胞及其相互融合細胞因無法進行上述兩個途徑，而在HAT培養基上不能增殖
雜交瘤細胞因為可進行上述兩個途徑，能在HAT培養基上大量增殖
HAT培養基上篩選出的所有雜交瘤細胞，既能大量增殖又能產生較高純度的目標抗體
題型3　單克隆抗體的應用
9.下列關于單克隆抗體的說法，錯誤的是(　　)
單克隆抗體可以治療各種疾病
單克隆抗體的制備原理是細胞膜具有一定的流動性
單克隆抗體能準確地識別各種抗原物質的細微差別，并跟一定抗原發生特異性結合
單克隆抗體可以制成抗體—藥物偶聯物(ADC)
10.機體發生炎癥反應時，血漿中CD14水平會升高。利用小鼠制備抗CD14單克隆抗體，能夠用于CD14的檢測。下列相關敘述正確的是(　　)
反復將CD14注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體
滅活的病毒是唯一能誘導骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的因素
利用雜交瘤技術獲得的雜交瘤細胞都可以產生抗CD14抗體
雜交瘤細胞體外培養過程中需要提供CO2以調節培養液pH的相對穩定
【綜合提升】
11.(10分)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下面是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請分析回答問題：
(1)(2分)制備單克隆抗體過程中要用到__________________和__________技術。
(2)(3分)制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的HCG相當于____________，使小鼠產生分泌相應________的B淋巴細胞，此過程屬于特異性免疫中的________免疫。
(3)(3分)在細胞內DNA的合成一般有兩條途徑，主要途徑是在細胞內由糖和氨基酸合成核苷酸，進而合成DNA，而氨基蝶呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有此輔助途徑。
①利用DNA合成途徑不同的特點配制的HAT培養基含有多種成分，其中添加的________具有篩選雜交瘤細胞的作用。
②最終篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是______________________________
___________________________________________________________________。
(4)(2分)此過程生產的單克隆抗體可以與________________________________
__________________________________________特異性結合，從而診斷早孕。
12.(10分)科研人員在雜交瘤細胞的基礎上，獲得了雙雜交瘤細胞，能夠產生雙特異性抗體，該抗體可以同時結合兩種抗原。
(1)(4分)科研人員將抗原α、β分別注射到小鼠體內，引起機體的________免疫，________分泌相應抗體。
(2)(6分)科研人員獲得上述小鼠的脾臟細胞，制備兩種雜交瘤細胞。每種雜交瘤細胞產生的抗體結構、與抗原結合的情況如圖1所示。
制備雜交瘤細胞時，需將上述小鼠的脾臟組織，用________________處理獲得單細胞后，再與小鼠的骨髓瘤細胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細胞。將兩種雜交瘤細胞用________試劑處理促進其融合，在培養基中加入________(天然成分)培養。如果兩種細胞成功融合，則會同時表達出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細胞稱作雙雜交瘤細胞。
課時精練11　通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
1．D　[動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性，A錯誤；動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，一般多數為兩個細胞的融合，B錯誤；滅活的病毒只能用于誘導動物細胞融合，不能用于植物體細胞雜交，植物體細胞雜交常用聚乙二醇，C錯誤。]
2．A　[常用于誘導動物細胞融合的方法有PEG法、電流刺激和滅活病毒誘導法等，A錯誤；動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞的過程，細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能，C、D正確。]
3．B　[不同種的細胞也能融合，如人鼠細胞融合，A錯誤；由題圖可知，細胞A、B融合成一個細胞，細胞C同時有細胞A和細胞B的遺傳物質，B正確；該融合過程體現了細胞膜具有流動性，C錯誤；此過程的原理是動物細胞膜具有流動性，D錯誤。]
4．C　[用于融合的B淋巴細胞應從受特定抗原刺激的動物中提取，A錯誤；單克隆抗體的制備是利用細胞膜的流動性將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，形成的雜交細胞具有兩種細胞的遺傳信息，植物體細胞雜交技術依據的是細胞全能性，B錯誤；為獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，可以通過抗原－抗體特異性結合進行篩選，C正確；選出的雜交瘤細胞可通過植入小鼠腹腔中增殖或體外培養獲得大量單克隆抗體，D錯誤。]
5．C　[檢測抗體效果時可將SARS病毒與抗體混合，C錯誤。]
6．B　[動物細胞融合可以用滅活的仙臺病毒進行誘導，或用PEG、電流刺激等進行誘導，A正確；B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行兩兩融合產生的融合細胞有：B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞、雜交瘤細胞，據題干信息骨髓瘤細胞在HAT培養基上無法生長，因此骨髓瘤細胞自身融合細胞在HAT培養基上無法生長，而B淋巴細胞不能在體外長期培養，故只有雜交瘤細胞可以在HAT培養基上生長，B錯誤；融合后產生的雜交瘤細胞并不是都能產生所需的單克隆抗體，需要進一步篩選，C正確；動物細胞融合依據的原理是細胞膜的流動性，D正確。]
7．A　[單克隆抗體制備過程至少要經過兩次篩選，第一次是利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，第二次是利用抗原－抗體雜交篩選出能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，A錯誤；抗原侵入機體后，發生體液免疫，體內產生抗犬細小病毒的抗體，B正確；在單克隆抗體的制備過程中使用的細胞工程技術有動物細胞融合和動物細胞培養，C正確；對雜交瘤細胞進行培養時，需要無菌無毒的環境，及營養、溫度、pH和氣體環境適宜的條件，D正確。]
8．B　[免疫的B細胞及其相互融合細胞是有補救合成途徑的，但是因為這兩種細胞本身不增殖，所以在HAT培養基上不會有這兩種細胞的增殖，A錯誤；骨髓瘤細胞及其相互融合細胞因無法進行上述兩個途徑，在HAT培養基上不能增殖，B正確；雜交瘤細胞因為可以進行補救合成途徑，所以能在HAT培養基上大量增殖，C錯誤；HAT培養基上篩選出的雜交瘤細胞，并不都能產生較高純度的目標抗體，D錯誤。]
9．A
10．D　[單克隆抗體是利用細胞融合的手段產生的，A錯誤；誘導動物細胞融合可以用聚乙二醇、電流刺激、滅活病毒等方法，B錯誤；每個B淋巴細胞分泌一種特異性抗體，故需篩選才能獲得產生抗CD14抗體的雜交瘤細胞，C錯誤。]
11．(1)動物細胞培養　動物細胞融合
(2)抗原　抗體　體液
(3)①氨基蝶呤　②能無限增殖并分泌所需抗體
(4)人絨毛膜促性腺激素(或HCG)
解析　(1)制備單克隆抗體過程中要用到動物細胞培養技術培養骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞，動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞。(2)制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的HCG相當于抗原，使小鼠產生能分泌相應抗體的B淋巴細胞，此過程屬于特異性免疫中的體液免疫。(3)①利用DNA合成途徑不同的特點：氨基蝶呤可以阻斷合成DNA的主要途徑；次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下可合成DNA，而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有此輔助途徑。可知在配制的HAT培養基中添加的氨基蝶呤具有篩選雜交瘤細胞的作用。②最終篩選獲得的雜交瘤細胞具有能無限增殖并分泌所需抗體的特點。(4)人絨毛膜促性腺激素(HCG) 是女性懷孕后胎盤滋養層細胞分泌的一種糖蛋白，此過程產生的單克隆抗體可以與它特異性結合，從而診斷早孕。
12．(1)體液　效應B(漿)細胞
(2)胰蛋白酶或膠原蛋白酶　PEG(或聚乙二醇)　血清
解析　(1)抗原進入小鼠體內能夠引起機體的體液免疫，使效應B(漿)細胞分泌抗體。(2)制備雜交瘤細胞，將小鼠的脾臟組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理獲得單細胞。動物細胞的融合需要使用PEG進行誘導，再加入血清進行培養。(共42張PPT)
課時精練11
通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
(時間：30分鐘　滿分：50分)
D
題型1　動物細胞融合
1.有關動物細胞融合的敘述，正確的是(　　)
A.動物細胞融合的原理是細胞的全能性
B.只有兩個動物細胞結合成一個細胞的過程才叫動物細胞融合
C.滅活的仙臺病毒是動物細胞融合和植物體細胞雜交常用的促融劑
D.細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
解析：動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性，A錯誤；
動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，一般多數為兩個細胞的融合，B錯誤；
滅活的病毒只能用于誘導動物細胞融合，不能用于植物體細胞雜交，植物體細胞雜交常用聚乙二醇，C錯誤。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
●將人細胞與小鼠細胞融合，培養出的雜種細胞可能會隨機丟失來自人細胞的染色體。在丟失人的1號染色體的融合細胞中，不能合成人的尿苷單磷酸激酶。下列有關敘述中不合理的是(　　)
A.與人和小鼠細胞相比，融合細胞發生了遺傳物質的改變
B.研究方法中需要選擇適當的培養基和細胞融合誘導技術
C.融合細胞經過培養，產生了新的動物個體
D.尿苷單磷酸激酶的基因很可能在1號染色體上
C
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
解析：融合細胞會隨機丟失來自人細胞的染色體，即發生了遺傳物質的改變，A正確；
選擇適當的培養基用來培養和篩選細胞，細胞融合時常用PEG、滅活病毒和電流刺激來誘導融合，B正確；
該過程沒有將雜交細胞培養成個體，C錯誤；
在丟失人的1號染色體的融合細胞中，不能合成人的尿苷單磷酸激酶，說明尿苷單磷酸激酶的基因很可能在1號染色體上，D正確。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
2.關于動物細胞融合的說法錯誤的是(　　)
A.常用于誘導動物細胞融合的方法有PEG法、電流刺激、紫外線照射法和滅活病毒誘導法等
B.動物細胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞
C.動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞的過程
D.細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能
A
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
解析：常用于誘導動物細胞融合的方法有PEG法、電流刺激和滅活病毒誘導法等，A錯誤；
動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞的過程，細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能，C、D正確。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
3.如圖表示仙臺病毒誘導動物細胞融合的部分過程，下列敘述正確的是(　　)
B
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
A.細胞A和細胞B必須為同種細胞才能融合
B.細胞C同時有細胞A和細胞B的遺傳物質
C.該融合過程體現了細胞膜具有選擇透過性
D.此過程的原理是動物細胞具有全能性
解析：不同種的細胞也能融合，如人鼠細胞融合，A錯誤；
由題圖可知，細胞A、B融合成一個細胞，細胞C同時有細胞A和細胞B的遺傳物質，B正確；
該融合過程體現了細胞膜具有流動性，C錯誤；
此過程的原理是動物細胞膜具有流動性，D錯誤。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
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08
09
類題
10
類題
11
12
A.細胞A和細胞B必須為同種細胞才能融合
B.細胞C同時有細胞A和細胞B的遺傳物質
C.該融合過程體現了細胞膜具有選擇透過性
D.此過程的原理是動物細胞具有全能性
題型2　單克隆抗體的制備
●下列有關制備單克隆抗體的敘述，錯誤的是(　　)
A.采用的細胞工程技術包括動物細胞培養和動物細胞融合
B.兩次篩選的目的分別是篩選出雜交瘤細胞和篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞
C.要先用胃蛋白酶處理得到單個細胞，然后用誘導劑處理得到雜交瘤細胞
D.運用的生物學原理包括細胞增殖和細胞膜具有一定的流動性
C
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
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類題
10
類題
11
12
解析：制備單克隆抗體采用的細胞工程技術包括動物細胞培養和動物細胞融合技術，A正確；
單克隆抗體的制備過程需要兩次篩選，第一次是用選擇培養基篩選獲得雜交瘤細胞，去除未融合的細胞和自身融合細胞；第二次篩選是從雜交瘤細胞中篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞，B正確；
分散細胞獲得單個細胞，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，C錯誤。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
4.利用雜交瘤技術制備針對特定抗原的單克隆抗體過程如圖所示。下列敘述正確的是(　　)
C
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
A.用于融合的B淋巴細胞應從未受抗原刺激的動物中提取
B.單克隆抗體的制備與植物體細胞雜交技術均依據細胞全能性原理
C.篩選2過程需要用到抗原－抗體特異性結合的特性
D.選出的雜交瘤細胞只能通過體外培養獲得大量單克隆抗體
解析：用于融合的B淋巴細胞應從受特定抗原刺激的動物中提取，A錯誤；
單克隆抗體的制備是利用細胞膜的流動性將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，形成的雜交細胞具有兩種細胞的遺傳信息，植物體細胞雜交技術依據的是細胞全能性，B錯誤；
為獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，可以通過抗原－抗體特異性結合進行篩選，C正確；
選出的雜交瘤細胞可通過植入小鼠腹腔中增殖或體外培養獲得大量單克隆抗體，D錯誤。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
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類題
06
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類題
10
類題
11
12
A.用于融合的B淋巴細胞應從未受抗原刺激的動物中提取
B.單克隆抗體的制備與植物體細胞雜交技術均依據細胞全能性原理
C.篩選2過程需要用到抗原－抗體特異性結合的特性
D.選出的雜交瘤細胞只能通過體外培養獲得大量單克隆抗體
5.(2024·海淀區高二期末)利用動物細胞融合方法，以SARS病毒刺突蛋白作為抗原制備出單克隆抗體(抗體D)。如圖為使用不同抗體抑制病毒感染細胞的檢測結果。下列相關敘述錯誤的是(　　)
C
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
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類題
06
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類題
10
類題
11
12
A.對照抗體應不與SARS病毒特異性結合
B.將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞注射到
小鼠腹腔內，可獲得大量抗體D
C.檢測抗體效果時需將SARS病毒與細胞混合
一段時間后再加入抗體
D.抗體D需達到一定濃度才有明顯抑制效果
解析：檢測抗體效果時可將SARS病毒與抗體混合，C錯誤。
●(2024·朝陽區高二期末)科學家將某些誘導基因轉入小鼠成纖維細胞中成功獲取誘導多能干細胞，這類細胞可用于一系列的研究，具體過程如下圖所示。
D
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
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類題
10
類題
11
12
以下說法錯誤的是(　　)
A.過程②實質是基因的選擇性表達
B.過程③可用聚乙二醇誘導細胞融合
C.培養誘導多能干細胞時，需要定期更換培養液
D.可將丁細胞注射到小鼠脾臟中提取單克隆抗體
解析：可以將能產生特定抗體的雜交瘤細胞(丁)注射入小鼠腹腔內進行培養，最后從腹水中分離出單克隆抗體；也可以采用體外培養的方法，最后從培養液中分離得到單克隆抗體；但不能將丁細胞注射到小鼠脾臟中提取單克隆抗體，D錯誤。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
A.過程②實質是基因的選擇性表達
B.過程③可用聚乙二醇誘導細胞融合
C.培養誘導多能干細胞時，需要定期更換培養液
D.可將丁細胞注射到小鼠脾臟中提取單克隆抗體
6.(2024·強基聯盟聯考)如圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT－)，在HAT選擇培養基中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述錯誤的是(　　)
B
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
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類題
06
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類題
10
類題
11
12
A.可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合
B.兩兩融合的細胞都能在HAT培養基中生長
C.雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產
D.細胞膜的流動性是細胞融合的基礎
解析：動物細胞融合可以用滅活的仙臺病毒進行誘導，或用PEG、電流刺激等進行誘導，A正確；
B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行兩兩融合產生的融合細胞有：B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞、雜交瘤細胞，據題干信息骨髓瘤細胞在HAT培養基上無法生長，因此骨髓瘤細胞自身融合細胞在HAT培養基上無法生長，而B淋巴細胞不能在體外長期培養，故只有雜交瘤細胞可以在HAT培養基上生長，B錯誤；
融合后產生的雜交瘤細胞并不是都能產生所需的單克隆抗體，需要進一步篩選，C正確；
動物細胞融合依據的原理是細胞膜的流動性，D正確。
A.可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合
B.兩兩融合的細胞都能在HAT培養基中生長
C.雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產
D.細胞膜的流動性是細胞融合的基礎
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
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09
類題
10
類題
11
12
7.犬細小病毒(CPV)單克隆抗體(Cpv McAb)可抑制病毒對宿主細胞的侵染及病毒的復制，進而殺滅幼犬體內病毒。下列相關敘述，錯誤的是(　　)
A.在獲得能分泌Cpv McAb的雜交瘤細胞的過程中需進行一次篩選
B.給幼犬注射CPV后，CPV的抗體檢測呈陽性，說明發生了體液免疫反應
C.在Cpv McAb的制備過程中用到了動物細胞培養和動物細胞融合技術
D.對雜交瘤細胞培養時，需要無菌無毒環境，且溫度、氣體環境等條件要適宜
A
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
12
解析：單克隆抗體制備過程至少要經過兩次篩選，第一次是利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，第二次是利用抗原－抗體雜交篩選出能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，A錯誤；
抗原侵入機體后，發生體液免疫，體內產生抗犬細小病毒的抗體，B正確；
在單克隆抗體的制備過程中使用的細胞工程技術有動物細胞融合和動物細胞培養，C正確；
對雜交瘤細胞進行培養時，需要無菌無毒的環境，及營養、溫度、pH和氣體環境適宜的條件，D正確。
基礎對點
01
類題
02
03
類題
04
05
類題
06
07
08
09
類題
10
類題
11
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8.如圖，核苷酸合成有兩個途徑，物質A可以阻斷其中的全合成途徑。正常細胞內含有補救合成途徑所必需的轉化酶和激酶。制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞缺乏轉化酶。現用加入H、A、T三種物質的“HAT培養基”來篩選特定的雜交瘤細胞。關于篩選原理的敘述正確的是(　　)
B
基礎對點
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類題
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A.免疫的B細胞及其相互融合細胞因全合成
途徑被A阻斷，在HAT培養基上不能增殖
B.骨髓瘤細胞及其相互融合細胞因無法進行
上述兩個途徑，而在HAT培養基上不能增殖
C.雜交瘤細胞因為可進行上述兩個途徑，能在HAT培養基上大量增殖
D.HAT培養基上篩選出的所有雜交瘤細胞，既能大量增殖又能產生較高純度的目標抗體
解析：免疫的B細胞及其相互融合細胞是有補救合成途徑的，但是因為這兩種細胞本身不增殖，所以在HAT培養基上不會有這兩種細胞的增殖，A錯誤；
骨髓瘤細胞及其相互融合細胞因無法進行上述兩個途徑，在HAT培養基上不能增殖，B正確；
雜交瘤細胞因為可以進行補救合成途徑，所以能在HAT培養基上大量增殖，C錯誤；
HAT培養基上篩選出的雜交瘤細胞，并不都能產生較高純度的目標抗體，D錯誤。
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A.免疫的B細胞及其相互融合細胞因全合成途徑被A阻斷，在HAT培養基上不能增殖
B.骨髓瘤細胞及其相互融合細胞因無法進行上述兩個途徑，而在HAT培養基上不能增殖
C.雜交瘤細胞因為可進行上述兩個途徑，能在HAT培養基上大量增殖
D.HAT培養基上篩選出的所有雜交瘤細胞，既能大量增殖又能產生較高純度的目標抗體
題型3　單克隆抗體的應用
9.下列關于單克隆抗體的說法，錯誤的是( 　)
A.單克隆抗體可以治療各種疾病
B.單克隆抗體的制備原理是細胞膜具有一定的流動性
C.單克隆抗體能準確地識別各種抗原物質的細微差別，并跟一定抗原發生特異性結合
D.單克隆抗體可以制成抗體—藥物偶聯物(ADC)
A
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●將人、鼠細胞懸液混合并誘導細胞融合(只考慮細胞兩兩融合)后，在HAT培養基上，同時含有T、H基因(獨立遺傳)的細胞才能存活和增殖，增殖過程中，細胞內人染色體隨機丟失，只殘留一條或幾條，對處于分裂中期細胞的鏡檢結果如表。下列敘述正確的是(　　)
基礎對點
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細胞 融合細胞 人 鼠 細胞樣編號 殘留人染色體
ttHH TThh ① 17
② 10、10、17
③ 17、X
B
A.在HAT培養基上，融合細胞均能存活和增殖
B.可以確定①的基因組成為TTTTHHhhhh
C.可以確定①②③的相關基因組成相同
D.可以將T(t)基因定位于人第17號染色體
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解析：由題意知，在HAT培養基上，同時含有T、H基因(獨立遺傳)的細胞才能存活和增殖，A錯誤；
由表格信息可知，①細胞含有一條人體染色體，由細胞同時具有T、H基因在HAT培養基上才能存活，因此該染色體上含有H基因，由于有絲分裂中期一條染色體上含有2個染色單體，因此此時細胞中含有HH基因，鼠染色體上的基因型是TTTThhhh，所以融合細胞①的基因型是TTTTHHhhhh，B正確；
①②③相關基因組成可能不同，C錯誤；
由B項分析可知，H(h)基因位于人第17號染色體，D錯誤。
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10.機體發生炎癥反應時，血漿中CD14水平會升高。利用小鼠制備抗CD14單克隆抗體，能夠用于CD14的檢測。下列相關敘述正確的是(　　)
A.反復將CD14注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體
B.滅活的病毒是唯一能誘導骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的因素
C.利用雜交瘤技術獲得的雜交瘤細胞都可以產生抗CD14抗體
D.雜交瘤細胞體外培養過程中需要提供CO2以調節培養液pH的相對穩定
D
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解析：單克隆抗體是利用細胞融合的手段產生的，A錯誤；
誘導動物細胞融合可以用聚乙二醇、電流刺激、滅活病毒等方法，B錯誤；
每個B淋巴細胞分泌一種特異性抗體，故需篩選才能獲得產生抗CD14抗體的雜交瘤細胞，C錯誤。
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●如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯后重新偶聯可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是(　　)
D
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A.雙抗可同時與2種抗原結合
B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞
C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原
D.同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產雙抗的漿細胞
解析：根據抗原和抗體發生特異性結合的原理推測，雙抗可同時與2種抗原結合，A正確；
根據抗原與抗體能夠發生特異性結合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞，從而使藥物發揮相應的作用，B正確；
由于雙抗是2種不同的單克隆抗體分子在體外解偶聯后重新偶聯制備的，因此，篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進行抗原－抗體檢測，從而實現對雙抗的篩選，C正確；
同時注射2種抗原可刺激B細胞分化形成產生不同抗體的漿細胞，而不是分化成產雙抗的漿細胞，D錯誤。
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A.雙抗可同時與2種抗原結合
B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞
C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原
D.同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產雙抗的漿細胞
11.人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下面是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請分析回答問題：
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(1)制備單克隆抗體過程中要用到_______________和__________________技術。
(2)制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的HCG相當于________，使小鼠產生分泌相應________的B淋巴細胞，此過程屬于特異性免疫中的________免疫。
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動物細胞培養
動物細胞融合
抗原
抗體
體液
(3)在細胞內DNA的合成一般有兩條途徑，主要途徑是在細胞內由糖和氨基酸合成核苷酸，進而合成DNA，而氨基蝶呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有此輔助途徑。
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①利用DNA合成途徑不同的特點配制的HAT培養基含有多種成分，其中添加的________具有篩選雜交瘤細胞的作用。
②最終篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是_________________________________。
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氨基蝶呤
能無限增殖并分泌所需抗體
(4)此過程生產的單克隆抗體可以與____________________________________
特異性結合，從而診斷早孕。
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人絨毛膜促性腺激素(或HCG)
解析：(1)制備單克隆抗體過程中要用到動物細胞培養技術培養骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞，動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞。
(2)制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的HCG相當于抗原，使小鼠產生能分泌相應抗體的B淋巴細胞，此過程屬于特異性免疫中的體液免疫。
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(3)①利用DNA合成途徑不同的特點：氨基蝶呤可以阻斷合成DNA的主要途徑；次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下可合成DNA，而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有此輔助途徑。可知在配制的HAT培養基中添加的氨基蝶呤具有篩選雜交瘤細胞的作用。②最終篩選獲得的雜交瘤細胞具有能無限增殖并分泌所需抗體的特點。
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(4)人絨毛膜促性腺激素(HCG) 是女性懷孕后胎盤滋養層細胞分泌的一種糖蛋白，此過程產生的單克隆抗體可以與它特異性結合，從而診斷早孕。
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12.科研人員在雜交瘤細胞的基礎上，獲得了雙雜交瘤細胞，能夠產生雙特異性抗體，該抗體可以同時結合兩種抗原。
(1)科研人員將抗原α、β分別注射到小鼠體內，引起機體的________免疫，________________分泌相應抗體。
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體液
效應B(漿)細胞
(2)科研人員獲得上述小鼠的脾臟細胞，制備兩種雜交瘤細胞。每種雜交瘤細胞產生的抗體結構、與抗原結合的情況如圖1所示。
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制備雜交瘤細胞時，需將上述小鼠的脾臟組織，用________________________處理獲得單細胞后，再與小鼠的骨髓瘤細胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細胞。將兩種雜交瘤細胞用____________________試劑處理促進其融合，在培養基中加入________(天然成分)培養。如果兩種細胞成功融合，則會同時表達出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細胞稱作雙雜交瘤細胞。
胰蛋白酶或膠原蛋白酶
PEG(或聚乙二醇)
血清
解析：(1)抗原進入小鼠體內能夠引起機體的體液免疫，使效應B(漿)細胞分泌抗體。
(2)制備雜交瘤細胞，將小鼠的脾臟組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理獲得單細胞。動物細胞的融合需要使用PEG進行誘導，再加入血清進行培養。
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