資源簡介

課時(shí)1　細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)
課時(shí)概念解析　本課時(shí)的概念為“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織，分散成單個(gè)細(xì)胞后，在適宜環(huán)境下讓細(xì)胞生長和增殖的過程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)”，該概念的建構(gòu)需要以下概念或證據(jù)的支持：
(1)動(dòng)物體細(xì)胞可在體外適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。
概念1　動(dòng)物體細(xì)胞可在體外適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念
從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織，分散成________細(xì)胞后，在適宜環(huán)境下讓細(xì)胞________和________的過程。
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的3個(gè)條件
[辨正誤]
(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中加入抗生素，可以抑制細(xì)菌和真菌的生長。(　　)
(2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度一般為37±0.5 ℃，適宜pH一般為7.2～7.4。(　　)
(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，CO2的作用是刺激動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞呼吸。(　　)
(生活、學(xué)習(xí)和實(shí)踐情境)某科研團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種治療抑郁的新藥，需要研究確定這種藥物對(duì)大腦神經(jīng)元的影響。它們利用剛出生的小鼠，分離得到小鼠的神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，然后進(jìn)行相關(guān)的離體實(shí)驗(yàn)。
請(qǐng)分析回答下列問題：
(1)利用剛出生的小鼠進(jìn)行神經(jīng)元培養(yǎng)，是因?yàn)閯偝錾∈蟮纳窠?jīng)元________。
A. 容易產(chǎn)生各種變異
B. 具有更強(qiáng)的全能性
C. 取材十分方便
D. 具有更強(qiáng)的分裂能力
(2)該科研團(tuán)隊(duì)在對(duì)小鼠神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基？其主要成分是什么？_____________________________________
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(3)在對(duì)小鼠神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，該科研團(tuán)隊(duì)向所用的培養(yǎng)基中加入了一定量的抗生素，其目的是什么？__________________________________________
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動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基
【典例應(yīng)用】
例1 下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所提供的物質(zhì)及其作用的描述錯(cuò)誤的是(　　)
選項(xiàng) 提供物質(zhì) 作用
A 抗生素 防止培養(yǎng)過程中被病毒感染
B 血清 補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)
C 氧氣 滿足細(xì)胞代謝的需要
D 二氧化碳 維持培養(yǎng)液的酸堿度
例2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要處于無菌、無毒的環(huán)境中，下列操作與其無關(guān)的是(　　)
A.對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理
B.在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素
C.定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累
D.向培養(yǎng)液中添加生長因子等成分
概念2　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程
2.細(xì)胞系與細(xì)胞株
3.細(xì)胞克隆
4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用
[辨正誤]
(1)動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理剪碎的組織塊，其目的是消化組織中的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分，獲得單個(gè)的成纖維細(xì)胞懸液。(　　)
(2)體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞都有貼壁生長和接觸抑制的特點(diǎn)。(　　)
(3)細(xì)胞克隆最基本的要求是必須保證分離出來的細(xì)胞是一個(gè)或多個(gè)同種細(xì)胞。(　　)
(生活、學(xué)習(xí)和實(shí)踐情境)在治療大面積燒傷病人時(shí)，通常取患者自身皮膚的成纖維細(xì)胞或皮膚干細(xì)胞，在體外培養(yǎng)獲得大量的自體健康皮膚(大致過程如下面概念圖所示)，再移植給患者進(jìn)行恢復(fù)性治療。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)構(gòu)建的人造皮膚
(1)①和③過程都需要使用胰蛋白酶處理，兩次處理的作用分別是什么？____________________________________________________________________
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(2)②和④過程中，細(xì)胞生長有什么特性？
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(3)有限細(xì)胞系和連續(xù)細(xì)胞系是否都有接觸抑制？____________________________________________________________________
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(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞全能性還是細(xì)胞增殖？___________________________________________________________________
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植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較
提醒：①通常認(rèn)為，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，而植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性；②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都要求無菌操作。
【典例應(yīng)用】
例3 (2024·天域名校聯(lián)考)下圖為幼鼠腎臟上皮細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖，已知腎臟上皮細(xì)胞屬于需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖的細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.甲→乙過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理
B.丙過程會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象
C.丙、丁過程均要在無菌、無毒的環(huán)境下進(jìn)行
D.丁過程為傳代培養(yǎng)，細(xì)胞都能進(jìn)行無限增殖
例4 (2024·麗水質(zhì)檢)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)細(xì)胞的生命期如下圖所示。下列敘述正確的是(　　)
A.可以使用稀釋涂布平板法或顯微鏡計(jì)數(shù)法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)
B.傳代培養(yǎng)前，常用胰蛋白酶處理使原培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞分散
C.隨著細(xì)胞傳代次數(shù)不斷增加，傳代間隔的時(shí)長越來越小
D.有限細(xì)胞系培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，而無限細(xì)胞系不會(huì)
1.(2024·浙江1月選考，13)某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時(shí)，需分裝培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)操作過程如圖。
下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離
B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖
C.③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度
D.整個(gè)過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行
2.(2021·浙江1月選考，18)下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是(　　)
A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行
B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離
C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理
D.步驟④培養(yǎng)過程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化
3.(2022·湖北卷，7)某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢，其原因不可能是(　　)
A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織
B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封
C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基
D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性
課時(shí)1　細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)
概念1
自主建構(gòu)
1．單個(gè)　生長　增殖
2．37　7.2～7.4　pH　氧氣　培養(yǎng)環(huán)境　操作過程　抗生素　細(xì)菌和真菌　過濾　氨基酸　維生素　生長因子
辨正誤
(1)√　(2)√
(3)×　提示：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，CO2的作用是調(diào)節(jié)pH的相對(duì)穩(wěn)定。
合作探究
(1)提示：D
(2)提示：液體培養(yǎng)基。主要成分包括水、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、糖類、生長因子等。
(3)提示：抑制細(xì)菌和真菌的生長，預(yù)防污染。
典例應(yīng)用
例1　A　[抗生素抑制細(xì)菌和真菌的生長。]
例2　D　[對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理，可以為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供無菌環(huán)境，A正確；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，可以抑制真菌和細(xì)菌的生長，為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供無菌環(huán)境，B正確；定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累，可以為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供無毒的環(huán)境，C正確；向培養(yǎng)液中添加生長因子等成分可以促進(jìn)細(xì)胞生長、發(fā)育和增殖，但不能為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)創(chuàng)造無菌、無毒的環(huán)境，D錯(cuò)誤。]
概念2
自主建構(gòu)
1．1　胰蛋白　膠原蛋白　80%　酶消化
2．首次傳代　有限　選擇　純化　原代培養(yǎng)物　細(xì)胞系　染色體組型　抗性　連續(xù)　有限
3．單細(xì)胞　細(xì)胞群體　一　多　單個(gè)　基因型　遺傳性狀
4．正常或病變　損傷組織器官　動(dòng)物疫苗　干擾素
辨正誤
(1)√
(2)×　提示：來源于血液、淋巴組織的細(xì)胞以及某些腫瘤細(xì)胞不表現(xiàn)出貼壁生長的特點(diǎn)，而是呈懸浮生長狀態(tài)。
(3)×　提示：細(xì)胞克隆最基本的要求是必須保證分離出來的細(xì)胞是一個(gè)而不是多個(gè)，即必須肯定所建成的克隆來源于單個(gè)細(xì)胞。
合作探究
(1)提示：①第一次：用胰蛋白酶處理剪碎的動(dòng)物組織塊，目的是把組織塊分散為單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行培養(yǎng)，即原代培養(yǎng)；②第二次：細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)貼壁生長，用胰蛋白酶處理使其從瓶壁上脫離下來，分散成單個(gè)細(xì)胞，然后將其轉(zhuǎn)移到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。
(2)提示：貼壁生長和接觸抑制。
(3)提示：有限細(xì)胞系存在接觸抑制；連續(xù)細(xì)胞系中的惡性細(xì)胞系失去接觸抑制，但良性無限細(xì)胞系保留接觸抑制現(xiàn)象。
(4)提示：細(xì)胞增殖。
典例應(yīng)用
例3　D　[傳代培養(yǎng)一定時(shí)間后，只有少數(shù)細(xì)胞能夠無限增殖，D錯(cuò)誤。]
例4　B　[動(dòng)物細(xì)胞不能用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤；根據(jù)曲線圖可知，隨著細(xì)胞傳代次數(shù)不斷增加，傳代間隔的時(shí)長基本不變，C錯(cuò)誤；無限細(xì)胞系中的良性無限細(xì)胞系雖已獲得了不死性，但仍保留接觸抑制現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。]
感悟真題
1．B　[因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)貼壁生長，所以加消化液的目的是使細(xì)胞和瓶壁分離，A正確；②加培養(yǎng)液是為了終止消化液的作用，并對(duì)細(xì)胞加以稀釋，B錯(cuò)誤；分裝時(shí)要調(diào)整到合適的細(xì)胞密度，便于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)，C正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行，D正確。]
2．C　[步驟①的操作也需要在無菌環(huán)境下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；在制備動(dòng)物細(xì)胞懸液過程中要經(jīng)膠原蛋白酶或胰蛋白酶消化，使組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞，B錯(cuò)誤；原代培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞需經(jīng)胰蛋白酶處理后制成細(xì)胞懸液才能傳代，C正確；在傳代培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)的細(xì)胞可能轉(zhuǎn)化為連續(xù)細(xì)胞系，D錯(cuò)誤。]
3．A　[小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元，細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，不會(huì)造成生長緩慢，A符合題意；培養(yǎng)瓶瓶口密封會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧，影響細(xì)胞需氧呼吸，造成供能不足，可能使細(xì)胞生長緩慢，B不符合題意；血清經(jīng)過高溫處理后，其中大量活性成分變性，失去原有功能，細(xì)胞生存環(huán)境嚴(yán)重惡化，可能使細(xì)胞生長緩慢，C不符合題意；小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性，所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性，使細(xì)胞生存環(huán)境惡劣，可能造成細(xì)胞生長緩慢，D不符合題意。](共37張PPT)
第三章　動(dòng)物細(xì)胞工程
課時(shí)1　
細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)
本課時(shí)的概念為“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織，分散成單個(gè)細(xì)胞后，在適宜環(huán)境下讓細(xì)胞生長和增殖的過程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)”，該概念的建構(gòu)需要以下概念或證據(jù)的支持：
(1)動(dòng)物體細(xì)胞可在體外適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。
課時(shí)概念解析
目錄 CONTENTS
1.動(dòng)物體細(xì)胞可在體外適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)
3.感悟真題
自主建構(gòu)
合作探究
合作探究
課時(shí)概念圖
自主建構(gòu)
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念
從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織，分散成______細(xì)胞后，在適宜環(huán)境下讓細(xì)胞______和______的過程。
單個(gè)
生長
增殖
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的3個(gè)條件
37
7.2～7.4
pH
氧氣
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的3個(gè)條件
培養(yǎng)環(huán)
境
操作過程
抗生素
細(xì)菌和真菌
過濾
氨基酸
維生素
生長因子
√
[辨正誤]
(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中加入抗生素，可以抑制細(xì)菌和真菌的生長。( )
(2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度一般為37±0.5 ℃，適宜pH一般為7.2～7.4。( )
(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，CO2的作用是刺激動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞呼吸。( )
提示：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，CO2的作用是調(diào)節(jié)pH的相對(duì)穩(wěn)定。
√
×
(生活、學(xué)習(xí)和實(shí)踐情境)某科研團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種治療抑郁的新藥，需要研究確定這種藥物對(duì)大腦神經(jīng)元的影響。它們利用剛出生的小鼠，分離得到小鼠的神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，然后進(jìn)行相關(guān)的離體實(shí)驗(yàn)。
請(qǐng)分析回答下列問題：
(1)利用剛出生的小鼠進(jìn)行神經(jīng)元培養(yǎng)，是因?yàn)閯偝錾∈蟮纳窠?jīng)元________。
A. 容易產(chǎn)生各種變異 B. 具有更強(qiáng)的全能性
C. 取材十分方便 D. 具有更強(qiáng)的分裂能力
D
(2)該科研團(tuán)隊(duì)在對(duì)小鼠神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基？其主要成分是什么？
提示：液體培養(yǎng)基。主要成分包括水、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、糖類、生長因子等。
(3)在對(duì)小鼠神經(jīng)元進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，該科研團(tuán)隊(duì)向所用的培養(yǎng)基中加入了一定量的抗生素，其目的是什么？
提示：抑制細(xì)菌和真菌的生長，預(yù)防污染。
●動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中常含有在高溫條件下變性失去功能的物質(zhì)，如血清，對(duì)于這些成分應(yīng)如何保證無菌？
提示：過濾除菌。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基
【典例應(yīng)用 】
A
例1 下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所提供的物質(zhì)及其作用的描述錯(cuò)誤的是(　　)
選項(xiàng) 提供物質(zhì) 作用
A 抗生素 防止培養(yǎng)過程中被病毒感染
B 血清 補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)
C 氧氣 滿足細(xì)胞代謝的需要
D 二氧化碳 維持培養(yǎng)液的酸堿度
解析：抗生素抑制細(xì)菌和真菌的生長。
D
例2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要處于無菌、無毒的環(huán)境中，下列操作與其無關(guān)的是(　　)
A.對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理
B.在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素
C.定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累
D.向培養(yǎng)液中添加生長因子等成分
解析：對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理，可以為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供無菌環(huán)境，A正確；
在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，可以抑制真菌和細(xì)菌的生長，為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供無菌環(huán)境，B正確；
定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累，可以為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供無毒的環(huán)境，C正確；
向培養(yǎng)液中添加生長因子等成分可以促進(jìn)細(xì)胞生長、發(fā)育和增殖，但不能為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)創(chuàng)造無菌、無毒的環(huán)境，D錯(cuò)誤。
蛋白質(zhì)
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程
1
胰蛋白
膠原蛋白
80%
酶消化
2.細(xì)胞系與細(xì)胞株
首次傳代
有限
選擇
純化
原代培養(yǎng)物
細(xì)胞系
染色體組型
抗性
連續(xù)
有限
3.細(xì)胞克隆
單細(xì)胞
細(xì)胞群體
一
多
單個(gè)
基因型
遺傳性狀
4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用
正常或病變
損傷組織
器官
動(dòng)物疫苗
干擾素
√
[辨正誤]
(1)動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理剪碎的組織塊，其目的是消化組織中的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分，獲得單個(gè)的成纖維細(xì)胞懸液。( )
(2)體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞都有貼壁生長和接觸抑制的特點(diǎn)。( )
提示：來源于血液、淋巴組織的細(xì)胞以及某些腫瘤細(xì)胞不表現(xiàn)出貼壁生長的特點(diǎn)，而是呈懸浮生長狀態(tài)。
(3)細(xì)胞克隆最基本的要求是必須保證分離出來的細(xì)胞是一個(gè)或多個(gè)同種細(xì)胞。( )
提示：細(xì)胞克隆最基本的要求是必須保證分離出來的細(xì)胞是一個(gè)而不是多個(gè)，即必須肯定所建成的克隆來源于單個(gè)細(xì)胞。
×
×
(生活、學(xué)習(xí)和實(shí)踐情境)在治療大面積燒傷病人時(shí)，通常取患者自身皮膚的成纖維細(xì)胞或皮膚干細(xì)胞，在體外培養(yǎng)獲得大量的自體健康皮膚(大致過程如下面概念圖所示)，再移植給患者進(jìn)行恢復(fù)性治療。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)構(gòu)建的人造皮膚
(1)①和③過程都需要使用胰蛋白酶處理，兩次處理的作用分別是什么？
提示：①第一次：用胰蛋白酶處理剪碎的動(dòng)物組織塊，目的是把組織塊分散為單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行培養(yǎng)，即原代培養(yǎng)；②第二次：細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)貼壁生長，用胰蛋白酶處理使其從瓶壁上脫離下來，分散成單個(gè)細(xì)胞，然后將其轉(zhuǎn)移到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。
(2)②和④過程中，細(xì)胞生長有什么特性？
提示：貼壁生長和接觸抑制。
(3)有限細(xì)胞系和連續(xù)細(xì)胞系是否都有接觸抑制？
提示：有限細(xì)胞系存在接觸抑制；連續(xù)細(xì)胞系中的惡性細(xì)胞系失去接觸抑制，但良性無限細(xì)胞系保留接觸抑制現(xiàn)象。
(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞全能性還是細(xì)胞增殖？
提示：細(xì)胞增殖。
植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較
植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較
提醒：①通常認(rèn)為，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，而植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性；②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都要求無菌操作。
D
例3 (2024·天域名校聯(lián)考)下圖為幼鼠腎臟上皮細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖，已知腎臟上皮細(xì)胞屬于需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖的細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
【典例應(yīng)用 】
A.甲→乙過程需要用胰蛋白酶或
膠原蛋白酶處理
B.丙過程會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象
C.丙、丁過程均要在無菌、無毒的環(huán)境下進(jìn)行
D.丁過程為傳代培養(yǎng)，細(xì)胞都能進(jìn)行無限增殖
解析：傳代培養(yǎng)一定時(shí)間后，只有少數(shù)細(xì)胞能夠無限增殖，D錯(cuò)誤。
B
例4 (2024·麗水質(zhì)檢)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)細(xì)胞的生命期如下圖所示。下列敘述正確的是(　　)
A.可以使用稀釋涂布平板法或顯微鏡計(jì)數(shù)法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)
B.傳代培養(yǎng)前，常用胰蛋白酶處理使原培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞分散
C.隨著細(xì)胞傳代次數(shù)不斷增加，傳代間隔的時(shí)長越來越小
D.有限細(xì)胞系培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，而無限細(xì)胞系不會(huì)
解析：動(dòng)物細(xì)胞不能用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤；
根據(jù)曲線圖可知，隨著細(xì)胞傳代次數(shù)不斷增加，傳代間隔的時(shí)長基本不變，C錯(cuò)誤；
無限細(xì)胞系中的良性無限細(xì)胞系雖已獲得了不死性，但仍保留接觸抑制現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。
A.可以使用稀釋涂布平板法或顯微鏡計(jì)數(shù)法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)
B.傳代培養(yǎng)前，常用胰蛋白酶處理使原培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞分散
C.隨著細(xì)胞傳代次數(shù)不斷增加，傳代間隔的時(shí)長越來越小
D.有限細(xì)胞系培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，而無限細(xì)胞系不會(huì)
B
1.(2024·浙江1月選考，13)某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時(shí)，需分裝培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)操作過程如圖。
下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.①加消化液的目的是使細(xì)胞
與瓶壁分離
B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖
C.③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度
D.整個(gè)過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行
解析：因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)貼壁生長，所以加消化液的目的是使細(xì)胞和瓶壁分離，A正確；
②加培養(yǎng)液是為了終止消化液的作用，并對(duì)細(xì)胞加以稀釋，B錯(cuò)誤；
分裝時(shí)要調(diào)整到合適的細(xì)胞密度，便于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)，C正確；
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行，D正確。
下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離
B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖
C.③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度
D.整個(gè)過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行
C
2.(2021·浙江1月選考，18)下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是( 　)
A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行
B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離
C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理
D.步驟④培養(yǎng)過程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化
解析：步驟①的操作也需要在無菌環(huán)境下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；
在制備動(dòng)物細(xì)胞懸液過程中要經(jīng)膠原蛋白酶或胰蛋白酶消化，使組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞，B錯(cuò)誤；
原代培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞需經(jīng)胰蛋白酶處理后制成細(xì)胞懸液才能傳代，C正確；
在傳代培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)的細(xì)胞可能轉(zhuǎn)化為連續(xù)細(xì)胞系，D錯(cuò)誤。
A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行
B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離
C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理
D.步驟④培養(yǎng)過程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化
A
3.(2022·湖北卷，7)某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢，其原因不可能是(　　)
A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織
B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封
C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基
D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性
解析：小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元，細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，不會(huì)造成生長緩慢，A符合題意；
培養(yǎng)瓶瓶口密封會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧，影響細(xì)胞需氧呼吸，造成供能不足，可能使細(xì)胞生長緩慢，B不符合題意；
血清經(jīng)過高溫處理后，其中大量活性成分變性，失去原有功能，細(xì)胞生存環(huán)境嚴(yán)重惡化，可能使細(xì)胞生長緩慢，C不符合題意；
小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性，所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性，使細(xì)胞生存環(huán)境惡劣，可能造成細(xì)胞生長緩慢，D不符合題意。課時(shí)精練9 細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)
(時(shí)間：30分鐘分值：50分)
選擇題：第1～12題，每小題3分，共36分。
【基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)】
題型1　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件
1.治療大面積燒傷，常常從患者身上獲取少量皮膚樣本，并將皮膚細(xì)胞在體外培養(yǎng)，逐漸形成的“皮膚”組織用于移植、覆蓋在傷口上，實(shí)現(xiàn)愈合。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
從患者身上獲取皮膚樣本的優(yōu)點(diǎn)是移植后不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)
往CO2恒溫培養(yǎng)箱中通入5%的CO2是為了調(diào)節(jié)pH相對(duì)穩(wěn)定
為了防止污染，實(shí)現(xiàn)無菌培養(yǎng)，可以在培養(yǎng)基中加入抗生素
培養(yǎng)過程往往在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行，以便于分離出“皮膚”組織
2.(2024·湖州質(zhì)檢)一般來說，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件是(　　)
①無毒的環(huán)境　②無菌的環(huán)境　③使用合成培養(yǎng)基，但通常需要加血清等天然成分　④溫度與動(dòng)物的體溫相近　⑤因在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，故不需要O2　⑥適宜的pH
①②③④⑤⑥ ①②③④
①②④⑤⑥ ①②③④⑥
3.植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要用到滅菌和無菌操作。下列操作和敘述正確的是(　　)
倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋
培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清可抑制細(xì)菌和真菌的生長
用于植物組織培養(yǎng)的外植體，可在普通房間的酒精燈火焰旁接種
微生物培養(yǎng)結(jié)束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須先經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再處理
題型2　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程
4.如圖表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程，下列有關(guān)該過程的說法，正確的是(　　)
乙中進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)通入適量的CO2以調(diào)節(jié)pH
宜用胃蛋白酶將甲中的動(dòng)物組織塊分散為單個(gè)的細(xì)胞
甲中用于培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞宜取自成年動(dòng)物
丙中細(xì)胞大量繁殖后，細(xì)胞之間相互接觸能促進(jìn)細(xì)胞的分裂
5.(2024·紹興診斷)如圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)的接觸抑制現(xiàn)象，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
正常動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中均會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
癌細(xì)胞無接觸抑制因而培養(yǎng)時(shí)可形成多層細(xì)胞
出現(xiàn)接觸抑制時(shí)細(xì)胞將停止分裂活動(dòng)
出現(xiàn)接觸抑制后需要利用胰蛋白酶處理后才可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
6.如圖為實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的過程，下列敘述正確的是(　　)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性
乙過程對(duì)皮膚組織可用胃蛋白酶處理
丙過程為原代培養(yǎng)，遺傳物質(zhì)一定不變
丁過程中某些細(xì)胞可能會(huì)無限增殖
7.如圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是(　　)
通過步驟③得到的是細(xì)胞系，步驟④得到的是細(xì)胞株
步驟②和步驟④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理細(xì)胞
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌條件，步驟①需對(duì)相應(yīng)組織進(jìn)行滅菌
若步驟④中細(xì)胞發(fā)生了轉(zhuǎn)化，則細(xì)胞一定失去了接觸抑制的特性
題型3　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用
8.(2024·海淀區(qū)高二期末)敲除大鼠心肌細(xì)胞H的T基因，對(duì)照組與敲除組的H細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，檢測兩組細(xì)胞的數(shù)量變化，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述不合理的是(　　)
體外培養(yǎng)H細(xì)胞需要添加動(dòng)物血清
可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞便于計(jì)數(shù)
敲除T基因的H細(xì)胞失去了分裂能力
提高T基因表達(dá)可能促進(jìn)心臟損傷修復(fù)
9.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也可用于病毒的培養(yǎng)，因?yàn)檫@一技術(shù)(　　)
能實(shí)現(xiàn)病毒的獨(dú)立代謝
需要在無菌的條件下進(jìn)行
能為動(dòng)物病毒提供足量的宿主
培養(yǎng)的細(xì)胞具有全能性
10.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)
可用于檢測某種物質(zhì)的毒性
可通過培養(yǎng)各種病變細(xì)胞，用于藥理等方面的研究
可通過動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素等
經(jīng)過脫分化、再分化，可構(gòu)建人造皮膚
【綜合提升】
11.(2024·石景山區(qū)高二檢測)為檢測某藥物X的抗癌活性，在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞，使其貼壁生長，實(shí)驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬的藥物X，培養(yǎng)72小時(shí)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組每個(gè)孔中細(xì)胞數(shù)目。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清等天然成分
可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)
對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無菌蒸餾水，其他條件一致
若實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)低于對(duì)照組，可初步判斷此藥物有抗癌效果
12.(2024·九省聯(lián)考黑、吉卷，9)為探究H基因?qū)δ[瘤細(xì)胞M增殖能力的影響，分別將H基因和突變h基因過量表達(dá)的細(xì)胞M在含瓊脂的半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，檢測細(xì)胞克隆(由單個(gè)細(xì)胞分裂形成的肉眼可見的細(xì)胞群)數(shù)量如下表，作為判斷腫瘤細(xì)胞惡性程度的指標(biāo)之一。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
組別 條件及結(jié)果　　　　 ① ② ③ ④
10%血清 － ＋ ＋ ＋
H基因 － － ＋ －
突變h基因 － － － ＋
細(xì)胞克隆數(shù)量/個(gè) 5 9 15 27
注：“＋”表示加入或過量表達(dá)；“－”表示未加入或無表達(dá)。
血清為細(xì)胞M的生長增殖提供了營養(yǎng)物質(zhì)等天然成分
克隆間相互離散，能有效避免克隆內(nèi)細(xì)胞的接觸抑制
H基因的過量表達(dá)導(dǎo)致克隆數(shù)增加，說明其不是抑癌基因
突變h基因過量表達(dá)，容易引起細(xì)胞M在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移
13.(14分)2019年11月18日上午，中國誕生了第一塊“人造肉”，即“細(xì)胞培養(yǎng)肉”。下圖是“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造流程圖，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問題：
(1) (3分)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造的關(guān)鍵技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用________酶將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞以制備細(xì)胞懸液。貼壁是有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)生存和生長發(fā)育的基本方式，包括細(xì)胞與________間的相互接觸和細(xì)胞與____________之間的相互接觸。
(2)(3分)當(dāng)細(xì)胞由于移動(dòng)而相互靠近發(fā)生接觸時(shí)，細(xì)胞不再移動(dòng)，接觸區(qū)域的細(xì)胞膜皺褶樣活動(dòng)停止，最終細(xì)胞分裂停止，這種現(xiàn)象稱為___________________________________________________________________，
它是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)_________________________________型細(xì)胞生長的特性。
(3)(4分)一般的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要向培養(yǎng)基中添加一定量的________，以保證細(xì)胞順利地生長增殖；還需要添加一定量的抗生素，以抑制________的生長，從而預(yù)防污染。但從食品安全的角度考慮，在生物制造“細(xì)胞培養(yǎng)肉”時(shí)，這兩種成分均不能添加。
(4)(4分)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造過程中，肌肉細(xì)胞培養(yǎng)需要利用合適的支架體系，請(qǐng)推測其原因_____________________________________________________
___________________________________________________________________。
課時(shí)精練9　細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)
1．D　[動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常用液體培養(yǎng)基，為了調(diào)節(jié)pH相對(duì)穩(wěn)定，通常往CO2恒溫培養(yǎng)箱中通入5%的CO2，B正確，D錯(cuò)誤；抗生素能抑制細(xì)菌和真菌的生長，可以防止動(dòng)物培養(yǎng)基被污染，C正確。]
2．D　[動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境，①②正確；用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基需要加入糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，通常還需要加入一定比例的血清等天然成分，③正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度和pH，其中溫度要與動(dòng)物體溫相近，④⑥正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，為95%的空氣和5%的CO2的混合氣體，⑤錯(cuò)誤。]
3．D　[倒平板過程中不能完全打開培養(yǎng)皿的皿蓋，以防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；為了防止動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素，動(dòng)物血清不能抑制細(xì)菌和真菌的生長，B錯(cuò)誤；用于植物組織培養(yǎng)的外植體，應(yīng)在消毒的實(shí)驗(yàn)室的超凈工作臺(tái)酒精燈火焰旁接種，C錯(cuò)誤；微生物培養(yǎng)結(jié)束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須先經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再處理，防止菌體污染環(huán)境和實(shí)驗(yàn)者，D正確。]
4．A　[動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要加入一定濃度的CO2以維持培養(yǎng)液的pH，A正確；將甲中的動(dòng)物組織塊分散為單個(gè)的細(xì)胞應(yīng)該用胰蛋白酶或膠原蛋白酶，不能用胃蛋白酶，B錯(cuò)誤；甲中用于培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞宜取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織，C錯(cuò)誤；丙中細(xì)胞大量繁殖后，細(xì)胞之間相互接觸能抑制細(xì)胞的分裂，D錯(cuò)誤。]
5．A　[接觸抑制是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)貼附型細(xì)胞生長的特性，故正常動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中不都會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，如來源于血液、淋巴組織的細(xì)胞，A錯(cuò)誤。]
6．D　[動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)沒有體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，A錯(cuò)誤；乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使細(xì)胞分散開，B錯(cuò)誤；丙過程屬于原代培養(yǎng)，有些細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變，C錯(cuò)誤；丁過程屬于傳代培養(yǎng)，某些細(xì)胞可能會(huì)無限增殖，D正確。]
7．B　[步驟④得到的是細(xì)胞系，從步驟③或步驟④中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞為細(xì)胞株，A錯(cuò)誤；步驟①需對(duì)相應(yīng)組織進(jìn)行消毒，C錯(cuò)誤；連續(xù)細(xì)胞系被認(rèn)為是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系(遺傳物質(zhì)發(fā)生改變)，有的連續(xù)細(xì)胞系是惡性細(xì)胞系，有的連續(xù)細(xì)胞系雖已獲得了不死性，但保留了接觸抑制現(xiàn)象，不致癌，是良性無限細(xì)胞系，D錯(cuò)誤。]
8．C　[體外培養(yǎng)心肌細(xì)胞所需的合成培養(yǎng)基中通常需要添加血清等一些天然成分，以補(bǔ)充對(duì)未知成分的需要，A合理；為便于細(xì)胞計(jì)數(shù)，可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞，使其分散成單個(gè)細(xì)胞，B合理；由圖示曲線可知，與對(duì)照組相比，敲除T基因的H細(xì)胞分裂能力減弱，但并未失去分裂能力，C不合理；由C選項(xiàng)信息可知，T基因的表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)H細(xì)胞分裂，因此提高T基因表達(dá)可能促進(jìn)心臟損傷修復(fù)，D合理。]
9．C
10．D　[動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)沒有脫分化與再分化過程，D錯(cuò)誤。]
11．C　[培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清等天然成分，A正確；對(duì)于已經(jīng)貼壁生長的動(dòng)物細(xì)胞，可用胰蛋白酶處理，使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)，B正確；實(shí)驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X，故對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞礬(溶劑)，C錯(cuò)誤；若添加藥物X的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)低于對(duì)照組，可以初步判斷藥物X有抗癌效果，D正確。]
12．B　[在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中通常需加入血清等一些天然成分，以補(bǔ)充對(duì)未知成分的需要，A正確；細(xì)胞M是腫瘤細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞克隆時(shí)不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；抑癌基因編碼的蛋白質(zhì)是正常細(xì)胞增殖過程中的負(fù)調(diào)控因子，抑癌基因突變喪失其細(xì)胞增殖的負(fù)調(diào)控作用，則導(dǎo)致細(xì)胞周期失控而發(fā)生癌變，因此H基因的過量表達(dá)導(dǎo)致克隆數(shù)增加，說明其不是抑癌基因，C正確；②、④組相比，④組中突變h基因過量表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞克隆數(shù)量增多，容易引起細(xì)胞M在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移，D正確。]
13．(1)胰蛋白(或膠原蛋白)　細(xì)胞　細(xì)胞外基質(zhì)
(2)接觸抑制　貼壁
(3)血清　細(xì)菌和真菌
(4)模擬體內(nèi)肌肉生長環(huán)境，輔助形成細(xì)胞組織的三維結(jié)構(gòu)
解析　(1)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞以制備細(xì)胞懸液。貼壁是有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)生存和生長發(fā)育的基本方式，包括細(xì)胞與細(xì)胞間的相互接觸和細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的相互接觸。(2)當(dāng)細(xì)胞由于移動(dòng)而相互靠近發(fā)生接觸時(shí)，細(xì)胞不再移動(dòng)，接觸區(qū)域的細(xì)胞膜皺褶樣活動(dòng)停止，最終細(xì)胞分裂停止，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制，它是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)貼壁型細(xì)胞生長的特性。(3)一般的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要向培養(yǎng)基中添加一定量的血清，以保證細(xì)胞順利地生長增殖；還需要添加一定量的抗生素，以抑制細(xì)菌和真菌的生長，從而預(yù)防污染。(4)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”最終目標(biāo)是要得到類似于從動(dòng)物組織中取得的“肌肉”，這就要求細(xì)胞生長的環(huán)境也跟體內(nèi)肌肉生長環(huán)境類似，所以采用支架體系主要就是模擬體內(nèi)肌肉生長環(huán)境，輔助形成細(xì)胞組織的三維結(jié)構(gòu)。(共38張PPT)
課時(shí)精練9
細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)
(時(shí)間：30分鐘　滿分：50分)
D
題型1　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件
1.治療大面積燒傷，常常從患者身上獲取少量皮膚樣本，并將皮膚細(xì)胞在體外培養(yǎng)，逐漸形成的“皮膚”組織用于移植、覆蓋在傷口上，實(shí)現(xiàn)愈合。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.從患者身上獲取皮膚樣本的優(yōu)點(diǎn)是移植后不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)
B.往CO2恒溫培養(yǎng)箱中通入5%的CO2是為了調(diào)節(jié)pH相對(duì)穩(wěn)定
C.為了防止污染，實(shí)現(xiàn)無菌培養(yǎng)，可以在培養(yǎng)基中加入抗生素
D.培養(yǎng)過程往往在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行，以便于分離出“皮膚”組織
基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)
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解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常用液體培養(yǎng)基，為了調(diào)節(jié)pH相對(duì)穩(wěn)定，通常往CO2恒溫培養(yǎng)箱中通入5%的CO2，B正確，D錯(cuò)誤；
抗生素能抑制細(xì)菌和真菌的生長，可以防止動(dòng)物培養(yǎng)基被污染，C正確。
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2.(2024·湖州質(zhì)檢)一般來說，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件是(　　)
①無毒的環(huán)境　②無菌的環(huán)境　③使用合成培養(yǎng)基，但通常需要加血清等天然成分　④溫度與動(dòng)物的體溫相近　⑤因在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，故不需要O2　⑥適宜的pH
A.①②③④⑤⑥ B.①②③④ C.①②④⑤⑥ D.①②③④⑥
解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境，①②正確；用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基需要加入糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，通常還需要加入一定比例的血清等天然成分，③正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度和pH，其中溫度要與動(dòng)物體溫相近，④⑥正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，為95%的空氣和5%的CO2的混合氣體，⑤錯(cuò)誤。
D
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3.植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要用到滅菌和無菌操作。下列操作和敘述正確的是(　　)
A.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋
B.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清可抑制細(xì)菌和真菌的生長
C.用于植物組織培養(yǎng)的外植體，可在普通房間的酒精燈火焰旁接種
D.微生物培養(yǎng)結(jié)束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須先經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再處理
D
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解析：倒平板過程中不能完全打開培養(yǎng)皿的皿蓋，以防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；
為了防止動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素，動(dòng)物血清不能抑制細(xì)菌和真菌的生長，B錯(cuò)誤；
用于植物組織培養(yǎng)的外植體，應(yīng)在消毒的實(shí)驗(yàn)室的超凈工作臺(tái)酒精燈火焰旁接種，C錯(cuò)誤；
微生物培養(yǎng)結(jié)束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須先經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再處理，防止菌體污染環(huán)境和實(shí)驗(yàn)者，D正確。
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題型2　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程
4.如圖表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程，下列有關(guān)該過程的說法，正確的是(　　)
A
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A.乙中進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)通入適量的CO2以調(diào)節(jié)pH
B.宜用胃蛋白酶將甲中的動(dòng)物組織塊分散為單個(gè)的細(xì)胞
C.甲中用于培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞宜取自成年動(dòng)物
D.丙中細(xì)胞大量繁殖后，細(xì)胞之間相互接觸能促進(jìn)細(xì)胞的分裂
解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要加入一定濃度的CO2以維持培養(yǎng)液的pH，A正確；
將甲中的動(dòng)物組織塊分散為單個(gè)的細(xì)胞應(yīng)該用胰蛋白酶或膠原蛋白酶，不能用胃蛋白酶，B錯(cuò)誤；
甲中用于培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞宜取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織，C錯(cuò)誤；
丙中細(xì)胞大量繁殖后，細(xì)胞之間相互接觸能抑制細(xì)胞的分裂，D錯(cuò)誤。
A.乙中進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)通入適量的CO2以調(diào)節(jié)pH
B.宜用胃蛋白酶將甲中的動(dòng)物組織塊分散為單個(gè)的細(xì)胞
C.甲中用于培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞宜取自成年動(dòng)物
D.丙中細(xì)胞大量繁殖后，細(xì)胞之間相互接觸能促進(jìn)細(xì)胞的分裂
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●動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，其培養(yǎng)過程的順序是(　　)
①胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，形成分散的懸浮細(xì)胞　②傳代培養(yǎng)　③定期用酶消化貼附生長的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液　④原代培養(yǎng)
A.①②③④ B.①③④②
C.①④②③ D.①④③②
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解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物工程技術(shù)的基礎(chǔ)，其培養(yǎng)過程為：取動(dòng)物組織塊——剪碎組織——用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞——制成細(xì)胞懸液——轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))——放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)——貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液——轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))——放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，由以上分析可知，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的順序?yàn)棰佗堍邰凇?br/>基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)
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5.(2024·紹興診斷)如圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)的接觸抑制現(xiàn)象，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A
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A.正常動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中均會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
B.癌細(xì)胞無接觸抑制因而培養(yǎng)時(shí)可形成多層細(xì)胞
C.出現(xiàn)接觸抑制時(shí)細(xì)胞將停止分裂活動(dòng)
D.出現(xiàn)接觸抑制后需要利用胰蛋白酶處理后才可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
解析：接觸抑制是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)貼附型細(xì)胞生長的特性，故正常動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中不都會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，如來源于血液、淋巴組織的細(xì)胞，A錯(cuò)誤。
●他莫昔芬(Tam)是一種治療乳腺癌的藥物，長期使用Tam的患者的癌細(xì)胞系R相比初次使用Tam的患者的癌細(xì)胞系C，死亡率明顯下降，氧氣消耗速率降低，葡萄糖攝取速率顯著提高，有關(guān)細(xì)胞系R的推斷不合理的是(　　)
A.線粒體數(shù)量減少
B.乳酸產(chǎn)生量降低
C.可能對(duì)Tam產(chǎn)生了耐藥性
D.加快葡萄糖攝取以獲取足夠的物質(zhì)和能量
B
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解析：線粒體是進(jìn)行需氧呼吸的主要場所，據(jù)題可知該細(xì)胞氧氣消耗速率降低，說明需氧呼吸減弱，則線粒體數(shù)量減少，A不符合題意；
人體細(xì)胞進(jìn)行厭氧呼吸產(chǎn)生乳酸，據(jù)題可知該細(xì)胞氧氣消耗速率降低，葡萄糖攝取速率顯著提高，說明該細(xì)胞厭氧呼吸增強(qiáng)，乳酸的產(chǎn)生量應(yīng)該增多，B符合題意；
長期使用Tam的患者癌細(xì)胞的死亡率下降，說明癌細(xì)胞對(duì)Tam產(chǎn)生了耐藥性，C不符合題意；
葡萄糖是主要的能源物質(zhì)，該細(xì)胞葡萄糖攝取速率顯著提高，可以為癌細(xì)胞獲取足夠的物質(zhì)和能量，D不符合題意。
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6.如圖為實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的過程，下列敘述正確的是(　　)
D
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A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性
B.乙過程對(duì)皮膚組織可用胃蛋白酶處理
C.丙過程為原代培養(yǎng)，遺傳物質(zhì)一定不變
D.丁過程中某些細(xì)胞可能會(huì)無限增殖
解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)沒有體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，A錯(cuò)誤；
乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使細(xì)胞分散開，B錯(cuò)誤；
丙過程屬于原代培養(yǎng)，有些細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變，C錯(cuò)誤；
丁過程屬于傳代培養(yǎng)，某些細(xì)胞可能會(huì)無限增殖，D正確。
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A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性
B.乙過程對(duì)皮膚組織可用胃蛋白酶處理
C.丙過程為原代培養(yǎng)，遺傳物質(zhì)一定不變
D.丁過程中某些細(xì)胞可能會(huì)無限增殖
7.如圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是(　　)
B
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A.通過步驟③得到的是細(xì)胞系，步驟④得到的是細(xì)胞株
B.步驟②和步驟④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理細(xì)胞
C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌條件，步驟①需對(duì)相應(yīng)組織進(jìn)行滅菌
D.若步驟④中細(xì)胞發(fā)生了轉(zhuǎn)化，則細(xì)胞一定失去了接觸抑制的特性
解析：步驟④得到的是細(xì)胞系，從步驟③或步驟④中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞為細(xì)胞株，A錯(cuò)誤；
步驟①需對(duì)相應(yīng)組織進(jìn)行消毒，C錯(cuò)誤；
連續(xù)細(xì)胞系被認(rèn)為是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系(遺傳物質(zhì)發(fā)生改變)，有的連續(xù)細(xì)胞系是惡性細(xì)胞系，有的連續(xù)細(xì)胞系雖已獲得了不死性，但保留了接觸抑制現(xiàn)象，不致癌，是良性無限細(xì)胞系，D錯(cuò)誤。
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A.通過步驟③得到的是細(xì)胞系，步驟④得到的是細(xì)胞株
B.步驟②和步驟④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理細(xì)胞
C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌條件，步驟①需對(duì)相應(yīng)組織進(jìn)行滅菌
D.若步驟④中細(xì)胞發(fā)生了轉(zhuǎn)化，則細(xì)胞一定失去了接觸抑制的特性
題型3　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用
8.(2024·海淀區(qū)高二期末)敲除大鼠心肌細(xì)胞H的T基因，對(duì)照組與敲除組的H細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，檢測兩組細(xì)胞的數(shù)量變化，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述不合理的是(　　)
C
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類題
A.體外培養(yǎng)H細(xì)胞需要添加動(dòng)物血清
B.可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞便于計(jì)數(shù)
C.敲除T基因的H細(xì)胞失去了分裂能力
D.提高T基因表達(dá)可能促進(jìn)心臟損傷修復(fù)
解析：體外培養(yǎng)心肌細(xì)胞所需的合成培養(yǎng)基中通常需要添加血清等一些天然成分，以補(bǔ)充對(duì)未知成分的需要，A合理；
為便于細(xì)胞計(jì)數(shù)，可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞，使其分散成單個(gè)細(xì)胞，B合理；
由圖示曲線可知，與對(duì)照組相比，敲除T基因的H細(xì)胞分裂能力減弱，但并未失去分裂能力，C不合理；
由C選項(xiàng)信息可知，T基因的表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)H細(xì)胞分裂，因此提高T基因表達(dá)可能促進(jìn)心臟損傷修復(fù)，D合理。
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A.體外培養(yǎng)H細(xì)胞需要添加動(dòng)物血清
B.可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞便于計(jì)數(shù)
C.敲除T基因的H細(xì)胞失去了分裂能力
D.提高T基因表達(dá)可能促進(jìn)心臟損傷修復(fù)
9.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也可用于病毒的培養(yǎng)，因?yàn)檫@一技術(shù)(　　)
A.能實(shí)現(xiàn)病毒的獨(dú)立代謝
B.需要在無菌的條件下進(jìn)行
C.能為動(dòng)物病毒提供足量的宿主
D.培養(yǎng)的細(xì)胞具有全能性
C
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10.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)
A.可用于檢測某種物質(zhì)的毒性
B.可通過培養(yǎng)各種病變細(xì)胞，用于藥理等方面的研究
C.可通過動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素等
D.經(jīng)過脫分化、再分化，可構(gòu)建人造皮膚
解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)沒有脫分化與再分化過程，D錯(cuò)誤。
D
基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)
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11.(2024·石景山區(qū)高二檢測)為檢測某藥物X的抗癌活性，在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞，使其貼壁生長，實(shí)驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬的藥物X，培養(yǎng)72小時(shí)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組每個(gè)孔中細(xì)胞數(shù)目。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清等天然成分
B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)
C.對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無菌蒸餾水，其他條件一致
D.若實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)低于對(duì)照組，可初步判斷此藥物有抗癌效果
C
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解析：培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清等天然成分，A正確；
對(duì)于已經(jīng)貼壁生長的動(dòng)物細(xì)胞，可用胰蛋白酶處理，使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)，B正確；
實(shí)驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X，故對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞礬(溶劑)，C錯(cuò)誤；
若添加藥物X的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)低于對(duì)照組，可以初步判斷藥物X有抗癌效果，D正確。
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12.(2024·九省聯(lián)考黑、吉卷，9)為探究H基因?qū)δ[瘤細(xì)胞M增殖能力的影響，分別將H基因和突變h基因過量表達(dá)的細(xì)胞M在含瓊脂的半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，檢測細(xì)胞克隆(由單個(gè)細(xì)胞分裂形成的肉眼可見的細(xì)胞群)數(shù)量如下表，作為判斷腫瘤細(xì)胞惡性程度的指標(biāo)之一。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
B
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組別 條件及結(jié)果　　　　 ① ② ③ ④
10%血清 － ＋ ＋ ＋
H基因 － － ＋ －
突變h基因 － － － ＋
細(xì)胞克隆數(shù)量/個(gè) 5 9 15 27
注：“＋”表示加入或過量表達(dá)；“－”表示未加入或無表達(dá)。
A.血清為細(xì)胞M的生長增殖提供了營養(yǎng)物質(zhì)等天然成分
B.克隆間相互離散，能有效避免克隆內(nèi)細(xì)胞的接觸抑制
C.H基因的過量表達(dá)導(dǎo)致克隆數(shù)增加，說明其不是抑癌基因
D.突變h基因過量表達(dá)，容易引起細(xì)胞M在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移
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解析：在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中通常需加入血清等一些天然成分，以補(bǔ)充對(duì)未知成分的需要，A正確；
細(xì)胞M是腫瘤細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞克隆時(shí)不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；
抑癌基因編碼的蛋白質(zhì)是正常細(xì)胞增殖過程中的負(fù)調(diào)控因子，抑癌基因突變喪失其細(xì)胞增殖的負(fù)調(diào)控作用，則導(dǎo)致細(xì)胞周期失控而發(fā)生癌變，因此H基因的過量表達(dá)導(dǎo)致克隆數(shù)增加，說明其不是抑癌基因，C正確；
②、④組相比，④組中突變h基因過量表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞克隆數(shù)量增多，容易引起細(xì)胞M在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移，D正確。
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13.2019年11月18日上午，中國誕生了第一塊“人造肉”，即“細(xì)胞培養(yǎng)肉”。下圖是“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造流程圖，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問題：
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(1) “細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造的關(guān)鍵技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用____________________酶將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞以制備細(xì)胞懸液。貼壁是有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)生存和生長發(fā)育的基本方式，包括細(xì)胞與________間的相互接觸和細(xì)胞與__________之間的相互接觸。
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胰蛋白(或膠原蛋白)
細(xì)胞
細(xì)胞外基質(zhì)
(2)當(dāng)細(xì)胞由于移動(dòng)而相互靠近發(fā)生接觸時(shí)，細(xì)胞不再移動(dòng)，接觸區(qū)域的細(xì)胞膜皺褶樣活動(dòng)停止，最終細(xì)胞分裂停止，這種現(xiàn)象稱為_____________，
它是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)____________型細(xì)胞生長的特性。
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接觸抑制
貼壁
(3)一般的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要向培養(yǎng)基中添加一定量的________，以保證細(xì)胞順利地生長增殖；還需要添加一定量的抗生素，以抑制____________的生長，從而預(yù)防污染。但從食品安全的角度考慮，在生物制造“細(xì)胞培養(yǎng)肉”時(shí)，這兩種成分均不能添加。
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血清
細(xì)菌和真菌
(4)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造過程中，肌肉細(xì)胞培養(yǎng)需要利用合適的支架體系，請(qǐng)推測其原因____________________________________________________________________。
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模擬體內(nèi)肌肉生長環(huán)境，輔助形成細(xì)胞組織的
三維結(jié)構(gòu)
解析：(1)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞以制備細(xì)胞懸液。貼壁是有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)生存和生長發(fā)育的基本方式，包括細(xì)胞與細(xì)胞間的相互接觸和細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的相互接觸。
(2)當(dāng)細(xì)胞由于移動(dòng)而相互靠近發(fā)生接觸時(shí)，細(xì)胞不再移動(dòng)，接觸區(qū)域的細(xì)胞膜皺褶樣活動(dòng)停止，最終細(xì)胞分裂停止，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制，它是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)貼壁型細(xì)胞生長的特性。
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(3)一般的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要向培養(yǎng)基中添加一定量的血清，以保證細(xì)胞順利地生長增殖；還需要添加一定量的抗生素，以抑制細(xì)菌和真菌的生長，從而預(yù)防污染。
(4)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”最終目標(biāo)是要得到類似于從動(dòng)物組織中取得的“肌肉”，這就要求細(xì)胞生長的環(huán)境也跟體內(nèi)肌肉生長環(huán)境類似，所以采用支架體系主要就是模擬體內(nèi)肌肉生長環(huán)境，輔助形成細(xì)胞組織的三維結(jié)構(gòu)。
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●吳茱萸是一種中藥，其主要成分為吳茱萸堿(EVO)。為研究EVO對(duì)人胃癌細(xì)胞增殖的影響及作用機(jī)制，科研人員做了以下實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題：
(1)檢測EVO對(duì)胃癌細(xì)胞BGC－823增殖的影響。
①用含動(dòng)物血清的DME/F－12培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)BGC－823，動(dòng)物血清的作用是_________________________________________________________。
②取出上述培養(yǎng)的細(xì)胞，加入胰蛋白酶制成___________，置于加入不同濃度EVO的多孔板中進(jìn)行培養(yǎng)。
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補(bǔ)充培養(yǎng)基中動(dòng)物細(xì)胞生長需要的未知營養(yǎng)物質(zhì)
單細(xì)胞懸液
③EVO對(duì)BGC－823細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明_______________________________________________________
___________________________________________________________________。
吳茱萸堿抑制BGC－823細(xì)胞增殖；作用效果與作用時(shí)間和
濃度呈正相關(guān)
(2)檢測EVO對(duì)BGC－823細(xì)胞周期的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表。
細(xì)胞周期中各期的細(xì)胞比例
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組別 G0/G1期/% S期/% G2/M期/%
對(duì)照組 42.62 17.65 23.37
EVO組 8.57 19.30 54.13
據(jù)表可知，EVO能誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯于________期。
G2/M
解析：(1)①由于人們并沒有完全了解動(dòng)物細(xì)胞所需要的全部物質(zhì)，故在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常加入一定比例的動(dòng)物血清以補(bǔ)充培養(yǎng)基中動(dòng)物細(xì)胞生長需要的未知營養(yǎng)物質(zhì)。②胰蛋白酶或膠原蛋白酶的作用是將細(xì)胞分散開而制成單細(xì)胞懸液。③由題圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，隨EVO濃度升高和作用時(shí)間的延長，細(xì)胞增殖活性的相對(duì)值降低，即表明EVO可抑制BGC－823細(xì)胞增殖，且作用效果與作用時(shí)間和濃度呈正相關(guān)。
(2)由題表中數(shù)據(jù)可知，EVO組與對(duì)照組相比，G2/M期比例明顯升高，且G0/G1期比例明顯下降，故推測EVO能誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯于G2/M期，導(dǎo)致細(xì)胞無法進(jìn)入下一個(gè)時(shí)期，從而使G0/G1期比例下降。
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