資源簡介

課時1　微生物的培養需要適宜條件
課時概念解析　本課時的概念為“無菌技術是在培養某種微生物時，保持無菌物品及無菌區域不被微生物污染的技術”“滅菌是獲得純凈的微生物培養物的前提”。這兩個概念的建構需要以下概念或證據的支持：
(1)細胞是生物體結構與生命活動的基本單位。(2)細胞的生存需要能量和營養物質，并通過分裂實現增殖。
概念1　培養基為目標微生物提供適宜的生長環境
1.培養基的定義、成分及理化性質
2.培養基的類型
提醒：固體培養基表面的微生物生長速度比液體培養基中慢，原因是細胞與固體培養基的接觸面積較小，細胞與環境間物質交換速度相對較慢。
[辨正誤]
(1)培養基的主要成分為水、碳源、氮源、無機鹽和生長因子等。(　　)
(2)平板屬于固體培養基，常用于菌種保存。(　　)
(3)細菌通常要求在中性偏酸的環境中生長。(　　)
1.(科學實驗和探究情境)下表為微生物的培養基配方，完成下列問題：
KH2 PO4 Na2 HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 H2O
1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 定容至 1 000 mL
(1)培養基中的碳源主要是________，尿素主要為微生物的生長提供__________，瓊脂的作用是________。
(2)從化學成分來看，該培養基屬于________培養基；從物理性質來看，該培養基屬于________培養基。
2.(科學實驗和探究情境)下表為某種培養基的配方，請分析回答問題：
編號 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
(1)該培養基按物理性質分屬于哪類培養基？判斷的依據是什么？___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
(2)該培養基適合用來培養自養型還是異養型微生物？為什么？____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
1.培養基的成分及功能
2.幾種常見微生物的碳源、氮源與能源供應
【典例應用】
例1 (2024·舟山質檢)下列關于培養基的敘述，錯誤的是(　　)
A.液體培養基常用于大規模快速繁殖某種微生物
B.固體培養基表面的微生物生長速度比在液體培養基中快
C.平板固體培養基常用于觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落
D.斜面固體培養基常用于菌種保存
例2 (2024·湖州高二期末)下表是關于對四種生物能源、碳源、氮源的來源和新陳代謝類型的描述，其中正確的一組是(　　)
項目 硝化細菌 乳酸菌 根瘤菌 衣藻
能源 NH3 乳酸 N2 光能
碳源 CO2 糖類 糖類 CO2
氮源 NH3 N2 N2 NO
代謝類型 自養需氧型 異養厭氧型 自養需氧型 自養需氧型
A.硝化細菌與乳酸菌 　 B.乳酸菌與根瘤菌
C.根瘤菌與衣藻 　 D.硝化細菌與衣藻
1.培養自養型微生物，通常需要提供無機碳源，如CO2、NaHCO3等；而培養異養型微生物，則需要提供有機碳源，如糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等。
2.如果培養基里不含有機碳源，則通常培養的是自養型微生物；若含有機碳源，則通常培養的是異養型微生物。
3.培養基的配方中沒有瓊脂，則通常為液體培養基；培養基的配方中含有瓊脂，則通常為固體培養基。　　　
概念2　滅菌和無菌技術可以排除非目標微生物的干擾
1.實驗器具與培養基的滅菌
2.特殊有機物的滅菌
3.使用過的器皿、廢棄物的處理
所有使用過的器皿、廢棄物等必須先經過____________后再洗滌或傾倒。
4.接種過程中的滅菌和無菌操作
(1)接種工具的滅菌
(2)瓶口或試管口的滅菌：接種過程中，打開塞子____________和塞上塞子____________都要將瓶口或試管口在酒精燈火焰上____________滅菌。
(3)接種時要靠近酒精燈的________。
5.配制可用于培養酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養基(活動)
(1)20%馬鈴薯蔗糖培養基的配方
去皮馬鈴薯絲(或小塊)20 g，________2 g，瓊脂1.5～2 g，水100 mL(自然pH)。
(2)方法步驟
[辨正誤]
(1)波長在256～266 nm的紫外線可使菌體的蛋白質和核酸變性，有很強的殺菌作用。(　　)
(2)在使用涂布器接種時，應該將涂布器在酒精燈的火焰上進行灼燒，然后立即進行涂布，以防止其他微生物進入。(　　)
(3)由于葡萄糖在115 ℃以上會焦化，因此對于含葡萄糖的培養基不能采用高壓滅菌方法滅菌。(　　)
(科學實驗和探究情境)在培養某種微生物時，防止其他微生物混入，保持無菌物品及無菌區域不被污染的操作技術，稱為無菌技術。
(1)培養基、雙手和接種環分別采用什么方法進行滅菌或消毒處理？____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
(2)培養工作結束后，培養基等廢棄物能否直接傾倒，為什么？____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
(3)接種時為什么要靠近酒精燈的火焰？
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
滅菌、消毒與防腐的比較
【典例應用】
例3 (2024·紹興高二期末)微生物的培養和分離實驗通常需要進行高壓蒸汽滅菌。下列相關敘述正確的是(　　)
A.實驗前，可采用高壓蒸汽滅菌法對實驗器具和培養基進行滅菌
B.培養基中有尿素時，通過降低高壓蒸汽滅菌的壓力與溫度即可
C.經高壓蒸汽滅菌后的器具可直接用于微生物實驗
D.實驗后的培養基不需要進行高壓滅菌，直接丟棄
例4 (2024·百校聯盟高二聯考)配制培養基是培養微生物的第一步，下列敘述正確的是(　　)
A.配制培養基時，需要在酒精燈火焰旁操作
B.獲得純凈培養物的關鍵是阻止一切微生物生長
C.制作棉塞不能使用醫用的脫脂棉
D.在分裝時培養基濺在三角瓶口和內壁上可以繼續使用
1.(2021·天津卷，1)下列操作能達到滅菌目的的是(　　)
A.用免洗酒精凝膠擦手
B.制作泡菜前用開水燙洗容器
C.在火焰上灼燒接種環
D.防疫期間用石炭酸噴灑教室
2.(2018·全國卷Ⅱ，37節選)在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：
(1)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優點是_____________________________________________________。
(2)密閉空間內的空氣可采用紫外線照射滅菌，其原因是紫外線能__________________________________________________________________。
(3)水廠供應的自來水通常是經過__________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。
課時1　微生物的培養需要適宜條件
概念1
自主建構
1．生長繁殖　積累代謝產物　無機鹽　碳源　氮源　中性偏堿　中性偏酸
2．(1)凝固劑　大規模快速繁殖某種微生物　分離、鑒定、活菌計數　菌種保存　(2)可重復性強　不恒定　生物發酵工業
辨正誤
(1)√
(2)×　提示：平板和斜面都屬于固體培養基，平板常用微生物的分離、鑒定和活菌計數等，斜面常用于菌種保存。
(3)×　提示：細菌通常要求在中性偏堿的環境中生長。
合作探究
1．(1)葡萄糖　氮源　凝固劑　(2)合成　固體
2．(1)提示：液體培養基。依據為培養基中不含凝固劑。
(2)提示：自養型。因為培養基中無有機碳源。
典例應用
例1　B　[由于細胞與固體培養基的接觸面積較小，細胞與環境間物質交換速度相對較慢，培養基表面的微生物生長速度比在液體培養基中慢，B錯誤。]
例2　D　[硝化細菌能將NH3氧化成亞硝酸和硝酸，并利用該過程釋放的化學能，將CO2和水合成有機物，屬于自養需氧型生物，其氮源和能源都是NH3，碳源是CO2；乳酸菌是異養厭氧型生物，不能直接利用N2，氮源是硝酸根離子等，碳源和能源為糖類；根瘤菌是能固氮的異養需氧型生物，進行生命活動所需要的能量來自糖類等有機物的氧化分解，氮源是N2，碳源和能源是糖類；衣藻是低等植物，能利用光能進行光合作用制造有機物，屬于自養需氧型生物，其能源是光能，碳源是CO2，氮源是NO等。]
概念2
自主建構
1．烘箱中烘干　超凈工作臺
2．G6玻璃砂漏斗　溫度　壓力
3．高壓滅菌
4．(1)灼燒　冷卻　酒精　灼燒　冷卻　(2)后　前　灼燒　(3)火焰
5．(1)蔗糖　(2)煮沸　過濾　加熱溶化　大　小　普通棉花
辨正誤
(1)√
(2)×　提示：在使用涂布器接種時，應將涂布器浸泡在75%的酒精中，接種前將表面殘留著少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后用于涂布。
(3)×　提示：可采用適當降低溫度、壓力(112 ℃，500 g/cm2)以及延長時間(30 min)的高壓滅菌方法滅菌。
合作探究
(1)提示：高壓蒸汽滅菌、酒精擦拭、火焰灼燒。
(2)提示：不能，因為實驗使用過的廢棄物對環境有不確定性的影響，必須先經過高壓滅菌后再傾倒。
(3)提示：利用燃燒產生的上升氣流減少空氣中微生物落入培養基的可能性。
典例應用
例3　A　[無菌操作的首要條件是各種器具必須是無菌的，這些器具可用高壓蒸汽滅菌法滅菌，A正確；尿素受熱會分解，只能用G6玻璃砂漏斗進行過濾除菌，但玻璃砂漏斗使用前也要在121 ℃下高壓蒸汽滅菌，B錯誤；通常要將高壓蒸汽滅菌后的實驗器具放入60～80 ℃的烘箱中烘干后再使用，C錯誤；為防止污染環境，實驗后的培養基需要高壓滅菌后再丟棄，D錯誤。]
例4　C　[配制培養基時，不需要在酒精燈火焰旁操作，接種時需要在酒精燈火焰旁操作，A錯誤；獲得純凈培養物的關鍵是無菌操作，保證目標微生物的生長，B錯誤；在分裝時培養基濺在三角瓶口和內壁上不能繼續使用，D錯誤。]
感悟真題
1．C　[用免洗酒精凝膠擦手的目的為消毒，A錯誤；制作泡菜前用開水燙洗容器屬于消毒操作，B錯誤；在火焰上灼燒接種環能達到滅菌目的，C正確；防疫期間用石炭酸噴灑教室，屬于消毒操作，D錯誤。]
2．(1)在達到消毒目的的同時，營養物質損失較少
(2)使菌體的蛋白質和核酸變性
(3)氯氣
解析　(1)巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法與煮沸消毒法相比，其優點表現為在達到消毒目的的同時，營養物質損失較少。(2)紫外線照射能滅菌的原因是其能夠使菌體的蛋白質和核酸變性。(3)自來水通常采用氯氣消毒。(共33張PPT)
第一章　發酵工程
課時1　
微生物的培養需要適宜條件
本課時的概念為“無菌技術是在培養某種微生物時，保持無菌物品及無菌區域不被微生物污染的技術”“滅菌是獲得純凈的微生物培養物的前提”。這兩個概念的建構需要以下概念或證據的支持：
(1)細胞是生物體結構與生命活動的基本單位。(2)細胞的生存需要能量和營養物質，并通過分裂實現增殖。
課時概念解析
目錄 CONTENTS
1. 培養基為目標微生物提供適宜的生長環境
2.滅菌和無菌技術可以排除非目標微生物的干擾
3.感悟真題
自主建構
合作探究
合作探究
課時概念圖
自主建構
生長繁殖
1.培養基的定義、成分及理化性質
積累
代謝產物
無機鹽
碳源
氮源
中性
偏堿
中性偏酸
2.培養基的類型
提醒：固體培養基表面的微生物生長速度比液體培養基中慢，原因是細胞與固體培養基的接觸面積較小，細胞與環境間物質交換速度相對較慢。
凝固劑
大規模快速繁殖某
種微生物
分離、鑒定、活菌計數
菌種保存
可重復性強
不恒定
生物發酵工業
√
[辨正誤]
(1)培養基的主要成分為水、碳源、氮源、無機鹽和生長因子等。( )
(2)平板屬于固體培養基，常用于菌種保存。( )
提示：平板和斜面都屬于固體培養基，平板常用微生物的分離、鑒定和活菌計數等，斜面常用于菌種保存。
(3)細菌通常要求在中性偏酸的環境中生長。( )
提示：細菌通常要求在中性偏堿的環境中生長。
×
×
1.(科學實驗和探究情境)下表為微生物的培養基配方，完成下列問題：
KH2 PO4 Na2 HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 H2O
1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 定容至
1 000 mL
(1)培養基中的碳源主要是________，尿素主要為微生物的生長提供______，瓊脂的作用是________。
(2)從化學成分來看，該培養基屬于______培養基；從物理性質來看，該培養基屬于______培養基。
葡萄糖
氮源
凝固劑
合成
固體
2.(科學實驗和探究情境)下表為某種培養基的配方，請分析回答問題：
編號 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
(1)該培養基按物理性質分屬于哪類培養基？判斷的依據是什么？
提示：液體培養基。依據為培養基中不含凝固劑。
(2)該培養基適合用來培養自養型還是異養型微生物？為什么？
提示：自養型。因為培養基中無有機碳源。
1.培養基的成分及功能
2.幾種常見微生物的碳源、氮源與能源供應
【典例應用 】
B
例1 (2024·舟山質檢)下列關于培養基的敘述，錯誤的是(　　)
A.液體培養基常用于大規模快速繁殖某種微生物
B.固體培養基表面的微生物生長速度比在液體培養基中快
C.平板固體培養基常用于觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落
D.斜面固體培養基常用于菌種保存
解析：由于細胞與固體培養基的接觸面積較小，細胞與環境間物質交換速度相對較慢，培養基表面的微生物生長速度比在液體培養基中慢，B錯誤。
例2 (2024·湖州高二期末)下表是關于對四種生物能源、碳源、氮源的來源和新陳代謝類型的描述，其中正確的一組是(　　)
D
A.硝化細菌與乳酸菌 　 B.乳酸菌與根瘤菌
C.根瘤菌與衣藻 　 D.硝化細菌與衣藻
1.培養自養型微生物，通常需要提供無機碳源，如CO2、NaHCO3等；而培養異養型微生物，則需要提供有機碳源，如糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等。
2.如果培養基里不含有機碳源，則通常培養的是自養型微生物；若含有機碳源，則通常培養的是異養型微生物。
3.培養基的配方中沒有瓊脂，則通常為液體培養基；培養基的配方中含有瓊脂，則通常為固體培養基。
烘箱中烘干
1.實驗器具與培養基的滅菌
超凈工作臺
2.特殊有機物的滅菌
G6
玻璃砂漏斗
溫度
壓力
3.使用過的器皿、廢棄物的處理
所有使用過的器皿、廢棄物等必須先經過__________后再洗滌或傾倒。
高壓滅菌
4.接種過程中的滅菌和無菌操作
(1)接種工具的滅菌
(2)瓶口或試管口的滅菌：接種過程中，打開塞子____和塞上塞子____都要將瓶口或試管口在酒精燈火焰上______滅菌。
(3)接種時要靠近酒精燈的______。
灼燒
冷卻
酒精
灼燒
冷卻
后
前
灼燒
火焰
5.配制可用于培養酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養基(活動)
(1)20%馬鈴薯蔗糖培養基的配方
去皮馬鈴薯絲(或小塊)20 g，______2 g，瓊脂1.5～2 g，水100 mL(自然pH)。
蔗糖
(2)方法步驟
煮沸
過濾
加熱溶
化
大
小
普通棉花
√
[辨正誤]
(1)波長在256～266 nm的紫外線可使菌體的蛋白質和核酸變性，有很強的殺菌作用。( )
(2)在使用涂布器接種時，應該將涂布器在酒精燈的火焰上進行灼燒，然后立即進行涂布，以防止其他微生物進入。( )
提示：在使用涂布器接種時，應將涂布器浸泡在75%的酒精中，接種前將表面殘留著少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后用于涂布。
(3)由于葡萄糖在115 ℃以上會焦化，因此對于含葡萄糖的培養基不能采用高壓滅菌方法滅菌。( )
提示：可采用適當降低溫度、壓力(112 ℃，500 g/cm2)以及延長時間(30 min)的高壓滅菌方法滅菌。
×
×
(科學實驗和探究情境)在培養某種微生物時，防止其他微生物混入，保持無菌物品及無菌區域不被污染的操作技術，稱為無菌技術。
(1)培養基、雙手和接種環分別采用什么方法進行滅菌或消毒處理？
提示：高壓蒸汽滅菌、酒精擦拭、火焰灼燒。
(2)培養工作結束后，培養基等廢棄物能否直接傾倒，為什么？
提示：不能，因為實驗使用過的廢棄物對環境有不確定性的影響，必須先經過高壓滅菌后再傾倒。
(3)接種時為什么要靠近酒精燈的火焰？
提示：利用燃燒產生的上升氣流減少空氣中微生物落入培養基的可能性。
●(生活、學習和實踐情境)市售的牛奶中有部分是采用巴氏消毒法殺菌的，通常稱為“巴氏殺菌乳”(如圖)。這種牛奶一般來說儲存時間較短，其原因是什么？
提示：巴氏消毒法是采用相對溫和的加熱方式進行的消毒方法，該方法僅僅殺死物體表面或內部的一部分微生物(不包括芽孢和孢子)，因此長時間儲存時，微生物有可能會慢慢繁殖起來，改變牛奶的品質，甚至產生有毒有害物質，危害健康。
滅菌、消毒與防腐的比較
【 典例應用 】
A
例3 (2024·紹興高二期末)微生物的培養和分離實驗通常需要進行高壓蒸汽滅菌。下列相關敘述正確的是(　　)
A.實驗前，可采用高壓蒸汽滅菌法對實驗器具和培養基進行滅菌
B.培養基中有尿素時，通過降低高壓蒸汽滅菌的壓力與溫度即可
C.經高壓蒸汽滅菌后的器具可直接用于微生物實驗
D.實驗后的培養基不需要進行高壓滅菌，直接丟棄5
解析：無菌操作的首要條件是各種器具必須是無菌的，這些器具可用高壓蒸汽滅菌法滅菌，A正確；
尿素受熱會分解，只能用G6玻璃砂漏斗進行過濾除菌，但玻璃砂漏斗使用前也要在121 ℃下高壓蒸汽滅菌，B錯誤；
通常要將高壓蒸汽滅菌后的實驗器具放入60～80 ℃的烘箱中烘干后再使用，C錯誤；
為防止污染環境，實驗后的培養基需要高壓滅菌后再丟棄，D錯誤。
例4 (2024·百校聯盟高二聯考)配制培養基是培養微生物的第一步，下列敘述正確的是(　　)
A.配制培養基時，需要在酒精燈火焰旁操作
B.獲得純凈培養物的關鍵是阻止一切微生物生長
C.制作棉塞不能使用醫用的脫脂棉
D.在分裝時培養基濺在三角瓶口和內壁上可以繼續使用
C
解析：配制培養基時，不需要在酒精燈火焰旁操作，接種時需要在酒精燈火焰旁操作，A錯誤；
獲得純凈培養物的關鍵是無菌操作，保證目標微生物的生長，B錯誤；
在分裝時培養基濺在三角瓶口和內壁上不能繼續使用，D錯誤。
C
1.(2021·天津卷，1)下列操作能達到滅菌目的的是(　　)
A.用免洗酒精凝膠擦手 B.制作泡菜前用開水燙洗容器
C.在火焰上灼燒接種環 D.防疫期間用石炭酸噴灑教室
解析：用免洗酒精凝膠擦手的目的為消毒，A錯誤；
制作泡菜前用開水燙洗容器屬于消毒操作，B錯誤；
在火焰上灼燒接種環能達到滅菌目的，C正確；
防疫期間用石炭酸噴灑教室，屬于消毒操作，D錯誤。
2.(2018·全國卷Ⅱ，37節選)在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：
(1)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優點是____________________________________________________。
(2)密閉空間內的空氣可采用紫外線照射滅菌，其原因是紫外線能______________________________________________。
(3)水廠供應的自來水通常是經過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。
在達到消毒目的的同時，營養物質損失較少
使菌體的蛋白質和核酸變性
氯氣
解析：(1)巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法與煮沸消毒法相比，其優點表現為在達到消毒目的的同時，營養物質損失較少。
(2)紫外線照射能滅菌的原因是其能夠使菌體的蛋白質和核酸變性。
(3)自來水通常采用氯氣消毒。課時精練1 微生物的培養需要適宜條件
(時間：30分鐘分值：50分)
選擇題：第1～16題，每小題2分，共32分。
【基礎對點】
題型1　培養基的成分和類型
1.欲觀察某種微生物的菌落特征，應選擇的培養基類型為(　　)
液體培養基 固體培養基
合成培養基 天然培養基
2.下列有關細菌培養的敘述，正確的是(　　)
固體培養基不含水分
培養細菌的培養基通常要將pH調整到中性偏酸
向液體培養基中通入氧氣能促進破傷風桿菌的生長
有的物質既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量
3.(2024·9＋1聯盟高二聯考)不同的微生物對營養物質的需求各不相同。下列有關一種以CO2為唯一碳源的自養型微生物營養的描述中，錯誤的是(　　)
氮源物質為該微生物提供必要的氮素
碳源物質也是該微生物的能源物質
無機鹽是該微生物不可缺少的營養物質
水是該微生物的營養要素之一
4.如表所示為某培養基的配方，下列敘述錯誤的是(　　)
成分 NaNO3 K2HPO4 MgSO4·7H2O (CH2O) 蒸餾水 青霉素
含量 3 g 1 g 0.5 g 30 g 定容至1 000 mL 0.1萬單位
根據物理特征劃分，該培養基屬于液體培養基
微生物無法在該培養基表面形成肉眼可見的菌落
根據培養基的配方可知，該培養基培養的微生物的同化作用類型是異養型
固體培養基中加入少量水即可形成液體培養基
5.(2024·Z20聯盟高二聯考)甲、乙、丙為三種微生物，下表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養微生物的三種培養基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是(　　)
項目 粉狀 硫10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g (NH4)2SO4 0.4 g H2O 100 mL MgSO4 9.25 g CaCl2 0.5 g
Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋
Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋
Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示培養基中加入了這種物質，“－”表示培養基中沒有加入這種物質。
甲、乙、丙都是異養型微生物
甲、乙都是自養型微生物，丙是異養型微生物
甲是異養型微生物，乙是固氮微生物，丙是自養型微生物
甲是固氮微生物，乙是自養型微生物，丙是異養型微生物
題型2　滅菌和無菌技術
6.下列實驗用品通常需要進行高壓蒸汽滅菌的是(　　)
A B
C D
7.下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是(　　)
高壓蒸汽滅菌 　　 紫外燈照射
70%酒精浸泡滅菌 　　 過濾滅菌
8.(2024·溫州新力量聯盟高二聯考)2020年，疫情中的最美逆行者，在給患者治療時，要充分消毒并防護，以下說法中正確的是(　　)
醫務人員進入工作區要全身滅菌
接種疫苗前要對注射區域進行消毒
消毒與滅菌的含義本質是相同的
常用的消毒方法有灼燒法和高壓蒸汽法
9.(2024·臺州高二期末)下列有關生物技術實踐實驗中的滅菌方法，錯誤的是(　　)
用高壓蒸汽滅菌法對涂布器進行滅菌
尿素培養基用G6玻璃砂漏斗過濾滅菌即可
含葡萄糖的培養基須在500 g/cm2壓力下滅菌30 min
接種環在使用的過程中常通過灼燒滅菌
10.(2024·環大羅山聯盟高二聯考)下列關于滅菌及無菌操作的敘述，錯誤的是(　　)
微生物實驗中通常用121 ℃(1 kg/cm2壓力)對實驗器具和培養基進行15～20 min的滅菌處理
接種間、培養間應定期采用紫外線或藥物熏蒸的方法進行消毒或滅菌
接種過程中，打開塞子后和塞上塞子前都要將瓶口或試管口在酒精燈火焰上灼燒滅菌
全部培養工作結束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須直接徹底洗滌或專門傾倒
11.金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，實驗中下列做法錯誤的是(　　)
對接種環進行灼燒處理
帶菌培養基必須經高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉
帶菌培養基必須經加熱后才能倒掉
操作者對雙手進行酒精處理屬于消毒
12.(2024·百校聯盟聯考)在器械滅菌時，通常會在高壓蒸汽滅菌鍋中放置生物指示劑來檢驗滅菌效果，自含型生物指示劑如圖所示。為檢驗生物指示劑是否出現陽性變化，需用工具在塑料瓶外擠破安瓿瓶，使菌片浸沒在培養液內。最終根據滅菌與未滅菌的生物指示劑的陽性變化情況，判斷器械滅菌效果。下列敘述錯誤的是(　　)
安瓿瓶中培養液的作用是使芽孢復蘇
菌片中芽孢的耐熱性大于器械上的可能污染菌
擠破安瓿瓶后，需培養一段時間再觀察是否出現陽性變化
若滅菌與未滅菌的生物指示劑均不出現陽性變化，則說明滅菌效果良好
題型3　配制馬鈴薯蔗糖培養基
13.(2024·七彩陽光聯盟聯考)為了培養酵母菌，需預先配制用于培養酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養基。下列說法正確的是(　　)
制備斜面培養基時，試管中液體的量約為試管長度的1/3
1 kg/cm3、121 ℃高壓蒸汽滅菌20 min后，應將斜面培養基擺成斜面
固體培養基的瓊脂屬于糖類，可以為酵母菌生長提供碳源
制作棉塞時，應該使用醫用的脫脂棉，不能使用普通棉花
14.下列關于制備用于培養酵母菌的馬鈴薯蔗糖斜面培養基的敘述，正確的是(　　)
應將瓊脂加熱溶化后加入馬鈴薯浸汁中
應先將培養基高壓蒸汽滅菌再分裝到試管中
應在高壓蒸汽滅菌后將斜面培養基擺成斜面
分裝時，試管中培養液的量應約為試管長度的1/2
15.下列有關微生物培養的敘述，錯誤的是(　　)
配制斜面培養基時要注意控制好溫度，防止培養基提前凝固
配制液體培養基時，按需要量稱取瓊脂
試管的棉塞粗細要適當，不能使用醫用的脫脂棉
微生物實驗材料丟棄前一定要滅菌
【綜合提升】
16.(2024·南京期中)無菌技術是獲得純凈微生物培養物的關鍵。下列相關敘述正確的是(　　)
實驗過程中所有器皿、培養基及生物材料均需進行滅菌處理
酒精能使細胞中的蛋白質變性失活，70%的酒精用來滅菌效果最好
試管口、瓶口等易被污染的部位，接種時可通過火焰灼燒來滅菌
不耐高溫的牛奶可使用巴氏消毒法，其優點是能夠殺死全部微生物，保留牛奶風味
17.(18分)如表所示為某培養基的配方，請回答下列問題：
成分 NaNO3 K2HPO4 MgSO4·7H2O (CH2O) 蒸餾水 青霉素
含量 3 g 1 g 0.5 g 30 g 定容至 1 000 mL 0.1萬 單位
(1)(4分)從培養基的物理特征上看，該培養基屬于________培養基，判斷的依據是__________________________________________________________________
____________________________________________________________________。
(2)(4分)從培養基的化學成分上看，該培養基屬于________培養基，判斷的依據是__________________________________________________________________
____________________________________________________________________。
(3)(2分)該培養基中葡萄糖的主要作用是___________________________________________________________________
____________________________________________________________________。
(4)(2分)該培養基的氮源為________。
(5)(2分)該培養基中加入0.1萬單位的青霉素，其作用可能是____________________________________________________________________。
(6)(4分)從無菌操作的角度分析，向該培養基中加入葡萄糖時，應采用的方法是____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
____________________________________________________________________。
課時精練1　微生物的培養需要適宜條件
1．B　[微生物在固體培養基表面生長會形成肉眼可見的菌落。]
2．D　[固體培養基中也含有水分，因為含有凝固劑，所以呈固態，A錯誤；培養細菌的培養基通常要將pH調整到中性偏堿，B錯誤；破傷風桿菌的代謝類型屬于異養厭氧型，向其培養基中通入氧氣會抑制其生長，C錯誤；有的物質既可作碳源也可作氮源，如蛋白胨，碳源并不都能提供能量，如CO2等，D正確。]
3．B　[CO2為無機物，只能做碳源而不能作為能源物質，B錯誤。]
4．D　[液體培養基中加入凝固劑(如瓊脂)可形成固體培養基，題表所示的培養基配方中沒有加凝固劑，因此屬于液體培養基，A正確、D錯誤；微生物在固體培養基表面生長，可形成肉眼可見的菌落，B正確；該培養基中的(CH2O)可作為有機碳源，因此其培養的微生物的同化作用類型是異養型，C正確。]
5．D　[由題表數據可知，Ⅰ是無氮培養基，只有能固氮的微生物才能在其上正常生長繁殖；Ⅱ是不含碳源的培養基，只有自養型微生物才能在其上正常生長繁殖；Ⅲ培養基含有氮源和碳源，營養成分全面，適合多種微生物生長繁殖。再結合題干分析可知，甲是固氮微生物、乙是自養型微生物、丙是異養型微生物，D正確。]
6．D　[接種環和涂布器通常需要進行灼燒滅菌，A、B錯誤；酒精燈不需要進行滅菌，C錯誤；試管需要進行高壓蒸汽滅菌，D正確。]
7．D　[由于尿素受熱會分解，對尿素溶液進行滅菌最好用過濾滅菌法，D正確。 ]
8．B　[醫務人員進入工作區要全身消毒，A錯誤；滅菌是采用強烈的物理、化學方法殺滅物體表面以及內部的一切微生物的方法，在經過滅菌后的物體中，不再存在任何活著的生命；消毒則是采用較溫和的物理、化學方法僅殺死物體表面或內部一部分不需要的微生物，C錯誤；常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法等，D錯誤。]
9．B　[尿素需用G6玻璃砂漏斗過濾滅菌后加入經高壓蒸汽滅菌過的培養基中，制成尿素培養基，B錯誤。]
10．D　[全部培養工作結束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須先經過高壓滅菌后再洗滌或傾倒，D錯誤。]
11．C　[帶菌培養基必須經高壓蒸汽滅菌后才能倒掉，簡單的加熱達不到滅菌效果，B正確，C錯誤。]
12．D　[檢驗生物指示劑是否出現陽性變化時，有活性的芽孢呈陽性，因此需要培養液使芽孢復蘇，A正確；芽孢是細菌的休眠體，可以幫助細菌度過不良環境。因此菌片中芽孢的耐熱性大于器械上的可能污染菌，B正確；芽孢復蘇需要時間，所以擠破安瓿瓶后，需培養一段時間再觀察是否出現陽性變化，C正確；若滅菌與未滅菌的生物指示劑均不出現陽性變化，則說明滅菌前沒有活性芽孢，也就無法說明滅菌效果，D錯誤。]
13．B　[制備斜面培養基時，試管中液體的量約為試管長度的1/4，A錯誤；培養基中的瓊脂雖屬于糖類，但酵母菌無法分解利用，因此不能為酵母菌生長提供碳源，C錯誤；由于醫用脫脂棉吸水后易引起污染，因此制作棉塞時應該使用普通棉花，不能使用醫用脫脂棉，D錯誤。]
14．C　[應將瓊脂加入馬鈴薯浸汁后再加熱溶化，A錯誤；應先將培養基分裝到試管中再進行高壓蒸汽滅菌，B錯誤；分裝時，試管中培養液的量應約為試管長度的1/4，D錯誤。]
15．B　[配制固體培養基時，按需要量稱取瓊脂，B錯誤。]
16．C　[微生物培養的器皿、接種用具和培養基等均需要滅菌，生物材料依據情況消毒或滅菌，A錯誤；酒精能使細胞中的蛋白質變性失活，酒精用于消毒，不是滅菌，B錯誤；消毒是指采用較溫和的物理、化學方法僅殺死物體表面或內部一部分不需要的微生物的過程，D錯誤。]
17．(1)液體　其成分中不含凝固劑
(2)合成　其化學成分完全清楚
(3)為微生物的生長提供碳源和能源
(4)NaNO3
(5)抑制細菌的生長
(6)可采用已在121 ℃下滅菌的、孔徑最小的G6玻璃砂漏斗對葡萄糖進行過濾除菌后，再在超凈工作臺內添加到培養基中；或采用適當降低溫度、壓力(112 ℃，500 g/cm2)以及延長時間(30 min)的高壓蒸汽滅菌方法滅菌(共29張PPT)
課時精練1
微生物的培養需要適宜條件
(時間：30分鐘　滿分：50分)
B
題型1　培養基的成分和類型
1.欲觀察某種微生物的菌落特征，應選擇的培養基類型為(　　)
A.液體培養基 B.固體培養基
C.合成培養基 D.天然培養基
解析：微生物在固體培養基表面生長會形成肉眼可見的菌落。
2.下列有關細菌培養的敘述，正確的是(　　)
A.固體培養基不含水分
B.培養細菌的培養基通常要將pH調整到中性偏酸
C.向液體培養基中通入氧氣能促進破傷風桿菌的生長
D.有的物質既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量
D
解析：固體培養基中也含有水分，因為含有凝固劑，所以呈固態，A錯誤；
培養細菌的培養基通常要將pH調整到中性偏堿，B錯誤；
破傷風桿菌的代謝類型屬于異養厭氧型，向其培養基中通入氧氣會抑制其生長，C錯誤；
有的物質既可作碳源也可作氮源，如蛋白胨，碳源并不都能提供能量，如CO2等，D正確。
3.(2024·9＋1聯盟高二聯考)不同的微生物對營養物質的需求各不相同。下列有關一種以CO2為唯一碳源的自養型微生物營養的描述中，錯誤的是(　　)
A.氮源物質為該微生物提供必要的氮素
B.碳源物質也是該微生物的能源物質
C.無機鹽是該微生物不可缺少的營養物質
D.水是該微生物的營養要素之一
解析：CO2為無機物，只能做碳源而不能作為能源物質，B錯誤。
B
4.如表所示為某培養基的配方，下列敘述錯誤的是(　　)
D
成分 NaNO3 K2HPO4 MgSO4·7H2O (CH2O) 蒸餾水 青霉素
含量 3 g 1 g 0.5 g 30 g 定容至 1 000 mL 0.1萬
單位
A.根據物理特征劃分，該培養基屬于液體培養基
B.微生物無法在該培養基表面形成肉眼可見的菌落
C.根據培養基的配方可知，該培養基培養的微生物的同化作用類型是異養型
D.固體培養基中加入少量水即可形成液體培養基
解析：液體培養基中加入凝固劑(如瓊脂)可形成固體培養基，題表所示的培養基配方中沒有加凝固劑，因此屬于液體培養基，A正確、D錯誤；
微生物在固體培養基表面生長，可形成肉眼可見的菌落，B正確；
該培養基中的(CH2O)可作為有機碳源，因此其培養的微生物的同化作用類型是異養型，C正確。
5.(2024·Z20聯盟高二聯考)甲、乙、丙為三種微生物，下表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養微生物的三種培養基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是(　　)
D
項目 粉狀 硫10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g (NH4)2SO4 0.4 g H2O 100 mL MgSO4 9.25 g CaCl2
0.5 g
Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋
Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋
Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示培養基中加入了這種物質，“－”表示培養基中沒有加入這種物質。
A.甲、乙、丙都是異養型微生物
B.甲、乙都是自養型微生物，丙是異養型微生物
C.甲是異養型微生物，乙是固氮微生物，丙是自養型微生物
D.甲是固氮微生物，乙是自養型微生物，丙是異養型微生物
解析：由題表數據可知，Ⅰ是無氮培養基，只有能固氮的微生物才能在其上正常生長繁殖；Ⅱ是不含碳源的培養基，只有自養型微生物才能在其上正常生長繁殖；Ⅲ培養基含有氮源和碳源，營養成分全面，適合多種微生物生長繁殖。再結合題干分析可知，甲是固氮微生物、乙是自養型微生物、丙是異養型微生物，D正確。
題型2　滅菌和無菌技術
6.下列實驗用品通常需要進行高壓蒸汽滅菌的是(　　)
D
解析：接種環和涂布器通常需要進行灼燒滅菌，A、B錯誤；
酒精燈不需要進行滅菌，C錯誤；
試管需要進行高壓蒸汽滅菌，D正確。
7.下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是(　　)
A.高壓蒸汽滅菌 　　 B.紫外燈照射
C.70%酒精浸泡滅菌 　　 D.過濾滅菌
解析：由于尿素受熱會分解，對尿素溶液進行滅菌最好用過濾滅菌法，D正確。
D
8.(2024·溫州新力量聯盟高二聯考)2020年，疫情中的最美逆行者，在給患者治療時，要充分消毒并防護，以下說法中正確的是(　　)
A.醫務人員進入工作區要全身滅菌
B.接種疫苗前要對注射區域進行消毒
C.消毒與滅菌的含義本質是相同的
D.常用的消毒方法有灼燒法和高壓蒸汽法
B
解析：醫務人員進入工作區要全身消毒，A錯誤；
滅菌是采用強烈的物理、化學方法殺滅物體表面以及內部的一切微生物的方法，在經過滅菌后的物體中，不再存在任何活著的生命；消毒則是采用較溫和的物理、化學方法僅殺死物體表面或內部一部分不需要的微生物，C錯誤；
常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法等，D錯誤。
9.(2024·臺州高二期末)下列有關生物技術實踐實驗中的滅菌方法，錯誤的是(　　)
A.用高壓蒸汽滅菌法對涂布器進行滅菌
B.尿素培養基用G6玻璃砂漏斗過濾滅菌即可
C.含葡萄糖的培養基須在500 g/cm2壓力下滅菌30 min
D.接種環在使用的過程中常通過灼燒滅菌
解析：尿素需用G6玻璃砂漏斗過濾滅菌后加入經高壓蒸汽滅菌過的培養基中,制成尿素培養基，B錯誤。
B
10.(2024·環大羅山聯盟高二聯考)下列關于滅菌及無菌操作的敘述，錯誤的是(　　)
A.微生物實驗中通常用121 ℃(1 kg/cm2壓力)對實驗器具和培養基進行15～20 min的滅菌處理
B.接種間、培養間應定期采用紫外線或藥物熏蒸的方法進行消毒或滅菌
C.接種過程中，打開塞子后和塞上塞子前都要將瓶口或試管口在酒精燈火焰上灼燒滅菌
D.全部培養工作結束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須直接徹底洗滌或專門傾倒
解析：全部培養工作結束后，所有使用過的器皿、廢棄物等都必須先經過高壓滅菌后再洗滌或傾倒，D錯誤。
D
11.金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，實驗中下列做法錯誤的是(　　)
A.對接種環進行灼燒處理
B.帶菌培養基必須經高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉
C.帶菌培養基必須經加熱后才能倒掉
D.操作者對雙手進行酒精處理屬于消毒
解析：帶菌培養基必須經高壓蒸汽滅菌后才能倒掉，簡單的加熱達不到滅菌效果，B正確，C錯誤。
C
12.(2024·百校聯盟聯考)在器械滅菌時，通常會在高壓蒸汽滅菌鍋中放置生物指示劑來檢驗滅菌效果，自含型生物指示劑如圖所示。為檢驗生物指示劑是否出現陽性變化，需用工具在塑料瓶外擠破安瓿瓶，使菌片浸沒在培養液內。最終根據滅菌與未滅菌的生物指示劑的陽性變化情況，判斷器械滅菌效果。下列敘述錯誤的是(　　)
D
A.安瓿瓶中培養液的作用是使芽孢復蘇
B.菌片中芽孢的耐熱性大于器械上的可能污染菌
C.擠破安瓿瓶后，需培養一段時間再觀察是否出
現陽性變化
D.若滅菌與未滅菌的生物指示劑均不出現陽性變化，則說明滅菌效果良好
解析：檢驗生物指示劑是否出現陽性變化時，有活性的芽孢呈陽性，因此需要培養液使芽孢復蘇，A正確；
芽孢是細菌的休眠體，可以幫助細菌度過不良環境。因此菌片中芽孢的耐熱性大于器械上的可能污染菌，B正確；
芽孢復蘇需要時間，所以擠破安瓿瓶后，需培養一段時間再觀察是否出現陽性變化，C正確；
若滅菌與未滅菌的生物指示劑均不出現陽性變化，則說明滅菌前沒有活性芽孢，也就無法說明滅菌效果，D錯誤。
A.安瓿瓶中培養液的作用是使芽孢復蘇
B.菌片中芽孢的耐熱性大于器械上的可能污染菌
C.擠破安瓿瓶后，需培養一段時間再觀察是否出現陽性變化
D.若滅菌與未滅菌的生物指示劑均不出現陽性變化，則說明滅菌效果良好
題型3　配制馬鈴薯蔗糖培養基
13.(2024·七彩陽光聯盟聯考)為了培養酵母菌，需預先配制用于培養酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養基。下列說法正確的是(　　)
A.制備斜面培養基時，試管中液體的量約為試管長度的1/3
B.1 kg/cm3、121 ℃高壓蒸汽滅菌20 min后，應將斜面培養基擺成斜面
C.固體培養基的瓊脂屬于糖類，可以為酵母菌生長提供碳源
D.制作棉塞時，應該使用醫用的脫脂棉，不能使用普通棉花
B
解析：制備斜面培養基時，試管中液體的量約為試管長度的1/4，A錯誤；
培養基中的瓊脂雖屬于糖類，但酵母菌無法分解利用，因此不能為酵母菌生長提供碳源，C錯誤；
由于醫用脫脂棉吸水后易引起污染，因此制作棉塞時應該使用普通棉花，不能使用醫用脫脂棉，D錯誤。
14.下列關于制備用于培養酵母菌的馬鈴薯蔗糖斜面培養基的敘述，正確的是(　　)
A.應將瓊脂加熱溶化后加入馬鈴薯浸汁中
B.應先將培養基高壓蒸汽滅菌再分裝到試管中
C.應在高壓蒸汽滅菌后將斜面培養基擺成斜面
D.分裝時，試管中培養液的量應約為試管長度的1/2
C
解析：應將瓊脂加入馬鈴薯浸汁后再加熱溶化，A錯誤；
應先將培養基分裝到試管中再進行高壓蒸汽滅菌，B錯誤；
分裝時，試管中培養液的量應約為試管長度的1/4，D錯誤。
15.下列有關微生物培養的敘述，錯誤的是(　　)
A.配制斜面培養基時要注意控制好溫度，防止培養基提前凝固
B.配制液體培養基時，按需要量稱取瓊脂
C.試管的棉塞粗細要適當，不能使用醫用的脫脂棉
D.微生物實驗材料丟棄前一定要滅菌
解析：配制固體培養基時，按需要量稱取瓊脂，B錯誤。
B
16.(2024·南京期中)無菌技術是獲得純凈微生物培養物的關鍵。下列相關敘述正確的是(　　)
A.實驗過程中所有器皿、培養基及生物材料均需進行滅菌處理
B.酒精能使細胞中的蛋白質變性失活，70%的酒精用來滅菌效果最好
C.試管口、瓶口等易被污染的部位，接種時可通過火焰灼燒來滅菌
D.不耐高溫的牛奶可使用巴氏消毒法，其優點是能夠殺死全部微生物，保留牛奶風味
C
解析：微生物培養的器皿、接種用具和培養基等均需要滅菌，生物材料依據情況消毒或滅菌，A錯誤；
酒精能使細胞中的蛋白質變性失活，酒精用于消毒，不是滅菌，B錯誤；
消毒是指采用較溫和的物理、化學方法僅殺死物體表面或內部一部分不需要的微生物的過程，D錯誤。
17.如表所示為某培養基的配方，請回答下列問題：
成分 NaNO3 K2HPO4 MgSO4 ·7H2O 葡萄糖 蒸餾水 青霉素
含量 3 g 1 g 0.5 g 30 g 定容至 1 000 mL 0.1萬單位
(1)從培養基的物理特征上看，該培養基屬于________培養基，判斷的依據是_____________________________。
液體
其成分中不含凝固劑
(2)從培養基的化學成分上看，該培養基屬于________培養基，判斷的依據是_______________________________________。
(3)該培養基中葡萄糖的主要作用是_____________________________________。
(4)該培養基的氮源為________。
合成
其化學成分完全清楚
為微生物的生長提供碳源和能源
NaNO3
(5)該培養基中加入0.1萬單位的青霉素，其作用可能是___________________________________________________________________。
(6)從無菌操作的角度分析，向該培養基中加入葡萄糖時，應采用的方法是____________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________________。
抑制細菌的生長
可采用已在121 ℃下滅菌的、孔徑最小的G6玻璃砂漏斗對葡萄糖進行過濾除菌后，再在超凈工作臺內添加到培養基中；或采用適當降低溫度、壓力(112 ℃，500 g/cm2)以及延長時間(30 min)的高壓蒸汽滅菌方法滅菌

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