資源簡介

主干知識排查
一、細胞培養是動物細胞工程的基礎
1．動物細胞培養需要適宜的溫度、濕度、pH和________條件；____________的條件；充足的________________________________________________________________________。
2．保證無菌、無毒條件的措施：
(1)培養材料、培養基、培養環境、操作過程嚴格控制無菌；
(2)在培養基中加入________，抑制細菌和真菌的生長，從而預防污染；
(3)定期____________。
3．培養動物細胞的培養基通常為________培養基，其基本成分包括水、無機鹽、氨基酸、________、糖類、生長因子等。另外，培養基中還要添加一定比例的________或其他天然成分。
4．動物細胞培養前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶消化組織中的膠原纖維和細胞外的其他成分，獲得單個細胞的細胞懸液，培養過程分______培養和________培養。
5. 體外培養的動物細胞往往具有____________和接觸抑制等特點。由于細胞之間有接觸抑制的特性，一般的正常細胞會________生長。癌細胞____接觸抑制。
6．需要將原培養瓶內的細胞分離并稀釋后轉到多個培養瓶中的原因：細胞發生____________或培養空間的限制及__________的消耗枯竭。
7．原代培養物經首次傳代成功后即成__________；通過一定的選擇或純化方法，從原代培養物或細胞系中獲得的具有____________的細胞稱為細胞株。
二、 通過細胞核移植克隆動物
1．動物細胞核移植是指將體細胞核移入一個________________中，并使其發育成________的過程。動物細胞核移植體現了________________________。
2．____________核的全能性比體細胞核更容易體現，低等動物細胞的全能性一般比高等動物容易體現。
3．動物細胞核移植的結論：
(1)__________的細胞經過一定技術處理，也可回復到類似受精卵時期的功能，表現出________________________________________________________________________。
(2)在胚胎和個體發育中，________具有調控細胞核發育的作用。
4．動物細胞核移植的應用價值：
(1)研究胚胎細胞的________。
(2)在藥物生產、________的培育和繁殖、拯救________、________克隆等方面，具有令人期待的實際應用價值。
5．通過核移植技術克隆動物存在著________低、某些克隆動物________等問題。
三、通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
1．動物細胞融合的原理：________________。結果：產生具有新特性的細胞。
2．誘導動物細胞融合的方法：____________處理、電脈沖融合、________誘導等。
3．單克隆抗體：由一個____________增殖形成的細胞群所產生的________抗體分子。
4．單克隆抗體的制備過程：誘導骨髓瘤細胞和______________融合，篩選后可獲得既能產生________________、又能在正常培養條件下進行________的________細胞。通過對________細胞進行____________，就能得到單克隆抗體。
5．單克隆抗體的優點：純度高，可____________，在應用時具有____________________的特點。
6．單克隆抗體的應用：
(1)作為特異性的________，研究相應抗原蛋白的結構、細胞學分布及功能。
(2)快捷、準確地________和________一些疾病。
(3)運載藥物。
7．將________連接到專門識別某種腫瘤細胞的單克隆抗體上，單克隆抗體就會像“生物導彈”一樣攜帶抗癌藥物________地聚集到腫瘤細胞，________地殺死腫瘤細胞。
四、對動物早期胚胎或配子進行處理可獲得目標個體
1．哺乳動物的精子________、卵子________后，可進行受精作用形成受精卵。
2．受精的標志：觀察到________極體或________________；受精完成的標志：雌、雄原核的染色體會合形成新核。
3．哺乳動物早期胚胎發育依次經過受精卵、__________、________(開始出現細胞分化)、________階段。
4．卵裂本質是有序的________分裂，產生的細胞越來越____，但總體積____________，________ 細胞期的每一個細胞都具有全能性，均可以發育成一個完整的個體。
5．囊胚的內細胞團不斷增殖分化，將發育成____________；滋養層發育成胚胎的附屬結構或胚外結構如______________等。
6．原腸胚期，三個胚層逐漸分化形成各種器官原基，最先形成的是____和脊髓原基——神經管。
7．胚胎工程的常見技術手段包括體外受精、胚胎體外培養、胚胎移植、胚胎分割等。
8．體外受精：哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完成受精過程的技術。過程：人工采集精子(采集到的精子需________處理)→采集卵細胞(使用______________進行超數排卵)→人工體外受精(在體外合適的環境下共同培養一段時間)。
9．檢驗合格的胚胎一般情況下應移植到________的、生理狀態________的受體子宮內，在移植前應對受體進行____________處理。
10．胚胎體外培養培養液成分：________、有機物、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、________等。
11．胚胎移植：將雌性動物的____________或通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到________的、生理狀態________的其他雌性動物的體內，使之繼續發育為個體的技術。移植是胚胎工程的最后一道“工序”。
12．胚胎分割：借助____________技術將早期胚胎切割成幾等份，再移植到代孕動物子宮中發育，產生____________后代的技術。胚胎分割時選擇發育良好的早期胚胎(囊胚或囊胚期以前的胚胎)，屬于________生殖。
1．動物細胞培養需要添加血清的原因：________________________________________
________________________________________________________________________。
2．動物細胞培養時所需的氣體環境是__________________________________，95%的空氣是保證________________________，5%的CO2的主要作用是______________________。
3．動物細胞培養時定期更換培養液，目的是____________________________________
________________________________________________________________________。
4．幼齡動物的細胞與老齡動物的細胞比較，分化程度低的細胞與分化程度高的細胞比較，________________________________更易培養，原因是___________________________
________________________________________________________________________。
5．進行動物細胞傳代培養時用胰蛋白酶分散細胞，用胃蛋白酶可以嗎？為什么？________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
6．動物細胞培養時，要將動物組織分散成單個細胞的原因是___________________
________________________________________________________________________。
7．動物細胞的整個培養過程中可能多次用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶，第一次使用的目的是________________；貼壁細胞傳代培養時使用的目的是________________________
________________________________________________________________________。
8．在將體細胞的細胞核移植到卵細胞之前，必須先對卵細胞進行去核操作的目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
9．選擇卵細胞作為受體細胞的原因：_______________________________________
________________________________________________________________________。
10．克隆動物不是對體細胞供體動物100%的復制，原因有_____________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
11．誘導因素誘導動物細胞融合的原因：____________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
12．單克隆抗體制備過程中，首先給小鼠注射特定抗原的目的是________________
________________________________________________________________________。
13．單克隆抗體制備過程中涉及兩次篩選：第一次篩選的目的是______________________，方法是________________________；第二次篩選的目的是___________________________，
方法是_______________________________________________________________________。
14．篩選出來的雜交瘤細胞的特點：_____________________________________________。
15．采集的精子需進行獲能處理，目的是_________________________________________。
16．胚胎移植實際上是_________________________________________________________。
17．進行胚胎移植的優勢：_____________________________________________________
____________________________________________________________________________。
18．鑒定性別時，常取囊胚的滋養層細胞進行DNA分析的原因：___________________。
19．胚胎在受體內能存活的原因：______________________________________________。
20．胚胎分割可以看作動物無性繁殖或克隆的方法之一，其原因是__________________。
答案精析
知識梳理
一、
1．氣體　無菌、無毒　營養物質
2．(2)抗生素　(3)更換培養液
3．液體　維生素　血清
4．原代　傳代
5．貼壁生長　單層　無
6．接觸抑制　營養物質
7．細胞系　特殊性質
二、
1．去核的卵母細胞　動物個體　動物細胞核的全能性
2．胚胎細胞
3．(1)高度分化　全能性　(2)細胞質
4．(1)分化　(2)優良種畜　瀕危動物　治療性
5．成功率　早衰
三、
1．細胞膜的流動性
2．聚乙二醇　病毒
3．B淋巴細胞　單一型
4．B淋巴細胞　特異性抗體　無限增殖　雜交瘤　雜交瘤　傳代培養
5．大量制備　特異性強、靈敏度高
6．(1)探針　(2)診斷　治療
7．抗癌藥物　準確　專一
四、
1．獲能　成熟
2．兩個　雌、雄原核
3．桑葚胚　囊胚　原腸胚
4．有絲　小　基本不變　2～8
5．完整的胚胎　絨毛膜、胎盤
6．腦
8．獲能　促性腺激素
9．同種　相同　同期發情
10．無機鹽　血清
11．早期胚胎　同種　相同
12．顯微操作　同卵多仔　無性
長句表達
1．血清中含有尚未全部研究清楚的細胞所需的營養物質
2．95%的空氣和5%的CO2　細胞呼吸對氧氣的需要　調節pH的相對穩定
3．防止細胞代謝產生的有毒物質危害細胞
4．幼齡動物的細胞和分化程度低的細胞　這些細胞的分裂能力強
5．不可以；多數動物細胞生存的適宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶(適宜pH為2左右)在此環境中沒有活性
6．分散后的單個細胞能與培養液充分接觸，更容易進行物質交換
7．使組織細胞分散開　使細胞從瓶壁上脫離下來，分散成單個細胞，便于分瓶培養
8．使核移植的胚胎或動物的核遺傳物質全部來自提供體細胞的動物
9．卵細胞的細胞質具有調控細胞核發育的作用
10．克隆動物細胞核中的遺傳物質來自供體動物，但細胞質中的遺傳物質基本來自受體卵細胞；生物性狀還受環境因素的影響等
11．在誘導因素的作用下，細胞膜會發生一定程度的損傷，細胞就可以實現相互粘連而融合在一起
12．誘導小鼠產生能夠分泌特定抗體的B淋巴細胞
13．篩選出雜交瘤細胞　用HAT選擇培養基進行篩選　篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細胞　通過抗體檢測進行篩選
14．既能產生特異性抗體，又能無限增殖
15．使其具備與卵細胞受精的能力
16．生產胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過程
17．充分發揮優良母畜的繁殖潛力，在短期內獲得大量目標個體
18．囊胚的內細胞團將發育成完整的胚胎，滋養層將來發育成絨毛膜和胎盤等，對胚胎發育影響更小
19．受體對外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應
20．來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(共17張PPT)
主干知識排查
第三章 動物細胞工程
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一、細胞培養是動物細胞工程的基礎
1.動物細胞培養需要適宜的溫度、濕度、pH和 條件； 的條件；充足的 。
2.保證無菌、無毒條件的措施：
(1)培養材料、培養基、培養環境、操作過程嚴格控制無菌；
(2)在培養基中加入 ，抑制細菌和真菌的生長，從而預防污染；
(3)定期 。
知識梳理
氣體
無菌、無毒
營養物質
抗生素
更換培養液
3.培養動物細胞的培養基通常為 培養基，其基本成分包括水、無機鹽、氨基酸、 、糖類、生長因子等。另外，培養基中還要添加一定比例的 或其他天然成分。
4.動物細胞培養前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶消化組織中的膠原纖維和細胞外的其他成分，獲得單個細胞的細胞懸液，培養過程分 培養和 培養。
5.體外培養的動物細胞往往具有 和接觸抑制等特點。由于細胞之間有接觸抑制的特性，一般的正常細胞會 生長。癌細胞 接觸抑制。
液體
維生素
血清
原代
傳代
貼壁生長
單層
無
6.需要將原培養瓶內的細胞分離并稀釋后轉到多個培養瓶中的原因：細胞發生 或培養空間的限制及 的消耗枯竭。
7.原代培養物經首次傳代成功后即成 ；通過一定的選擇或純化方法，從原代培養物或細胞系中獲得的具有 的細胞稱為細胞株。
接觸抑制
營養物質
細胞系
特殊性質
二、通過細胞核移植克隆動物
1.動物細胞核移植是指將體細胞核移入一個 中，并使其發育成 的過程。動物細胞核移植體現了 。
2. 核的全能性比體細胞核更容易體現，低等動物細胞的全能性一般比高等動物容易體現。
3.動物細胞核移植的結論：
(1) 的細胞經過一定技術處理，也可回復到類似受精卵時期的功能，表現出 。
(2)在胚胎和個體發育中， 具有調控細胞核發育的作用。
去核的卵母細胞
動物個體
動物細胞核的全能性
胚胎細胞
高度分化
全能性
細胞質
4.動物細胞核移植的應用價值：
(1)研究胚胎細胞的 。
(2)在藥物生產、 的培育和繁殖、拯救 、 克隆等方面，具有令人期待的實際應用價值。
5.通過核移植技術克隆動物存在著 低、某些克隆動物 等問題。
分化
優良種畜
瀕危動物
治療性
成功率
早衰
三、通過細胞融合可產生具有新特性的細胞
1.動物細胞融合的原理： 。結果：產生具有新特性的
細胞。
2.誘導動物細胞融合的方法： 處理、電脈沖融合、 誘導等。
3.單克隆抗體：由一個 增殖形成的細胞群所產生的 抗體分子。
4.單克隆抗體的制備過程：誘導骨髓瘤細胞和 融合，篩選后可獲得既能產生 、又能在正常培養條件下進行 的
細胞。通過對 細胞進行 ，就能得到單克隆抗體。
細胞膜的流動性
聚乙二醇
病毒
B淋巴細胞
單一型
B淋巴細胞
特異性抗體
無限增殖
雜交瘤
雜交瘤
傳代培養
5.單克隆抗體的優點：純度高，可 ，在應用時具有__________
_________的特點。
6.單克隆抗體的應用：
(1)作為特異性的 ，研究相應抗原蛋白的結構、細胞學分布及功能。
(2)快捷、準確地 和 一些疾病。
(3)運載藥物。
7.將 連接到專門識別某種腫瘤細胞的單克隆抗體上，單克隆抗體就會像“生物導彈”一樣攜帶抗癌藥物 地聚集到腫瘤細胞，_____地殺死腫瘤細胞。
大量制備
特異性強、
靈敏度高
探針
診斷
治療
抗癌藥物
準確
專一
四、對動物早期胚胎或配子進行處理可獲得目標個體
1.哺乳動物的精子 、卵子 后，可進行受精作用形成受精卵。
2.受精的標志：觀察到 極體或 ；受精完成的標志：雌、雄原核的染色體會合形成新核。
3.哺乳動物早期胚胎發育依次經過受精卵、 、 (開始出現細胞分化)、 階段。
4.卵裂本質是有序的 分裂，產生的細胞越來越 ，但總體積_____
_____， 細胞期的每一個細胞都具有全能性，均可以發育成一個完整的個體。
獲能
成熟
兩個
雌、雄原核
桑葚胚
囊胚
原腸胚
有絲
小
基本
不變
2～8
5.囊胚的內細胞團不斷增殖分化，將發育成 ；滋養層發育成胚胎的附屬結構或胚外結構如 等。
6.原腸胚期，三個胚層逐漸分化形成各種器官原基，最先形成的是 和脊髓原基——神經管。
7.胚胎工程的常見技術手段包括體外受精、胚胎體外培養、胚胎移植、胚胎分割等。
8.體外受精：哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完成受精過程的技術。過程：人工采集精子(采集到的精子需 處理)→采集卵細胞(使用 進行超數排卵)→人工體外受精(在體外合適的環境下共同培養一段時間)。
完整的胚胎
絨毛膜、胎盤
腦
促性腺激素
獲能
9.檢驗合格的胚胎一般情況下應移植到 的、生理狀態 的受體子宮內，在移植前應對受體進行 處理。
10.胚胎體外培養培養液成分： 、有機物、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、 等。
11.胚胎移植：將雌性動物的 或通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到 的、生理狀態 的其他雌性動物的體內，使之繼續發育為個體的技術。移植是胚胎工程的最后一道“工序”。
12.胚胎分割：借助 技術將早期胚胎切割成幾等份，再移植到代孕動物子宮中發育，產生 后代的技術。胚胎分割時選擇發育良好的早期胚胎(囊胚或囊胚期以前的胚胎)，屬于 生殖。
同種
相同
同期發情
無機鹽
血清
早期胚胎
同種
相同
顯微操作
同卵多仔
無性
1.動物細胞培養需要添加血清的原因：_____________________________
___________________。
2.動物細胞培養時所需的氣體環境是 ,95%的空氣是保證 ，5%的CO2的主要作用是_____________
______。
3.動物細胞培養時定期更換培養液，目的是_________________________
____________。
長句表達
血清中含有尚未全部研究清楚的
細胞所需的營養物質
95%的空氣和5%的CO2
細胞呼吸對氧氣的需要
調節pH的相對
穩定
防止細胞代謝產生的有毒物
質危害細胞
4.幼齡動物的細胞與老齡動物的細胞比較，分化程度低的細胞與分化程度高的細胞比較， 更易培養，原因是 。
5.進行動物細胞傳代培養時用胰蛋白酶分散細胞，用胃蛋白酶可以嗎？為什么？_______________________________________________________
________________________________。
6.動物細胞培養時，要將動物組織分散成單個細胞的原因是___________
_____________________________________________。
幼齡動物的細胞和分化程度低的細胞
這些細胞的分裂能力強
不可以；多數動物細胞生存的適宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶(適宜pH為2左右)在此環境中沒有活性
個細胞能與培養液充分接觸，更容易進行物質交換
分散后的單
7.動物細胞的整個培養過程中可能多次用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶，第一次使用的目的是 ；貼壁細胞傳代培養時使用的目的是 。
8.在將體細胞的細胞核移植到卵細胞之前，必須先對卵細胞進行去核操作的目的是_____________________________________________________
_____。
9.選擇卵細胞作為受體細胞的原因：_______________________________
_________。
使組織細胞分散開
使細胞從瓶壁上脫離下來，分散成單個細胞，便于分瓶培養
使核移植的胚胎或動物的核遺傳物質全部來自提供體細胞的動物
卵細胞的細胞質具有調控細胞核發
育的作用
10.克隆動物不是對體細胞供體動物100%的復制，原因有_____________
___________________________________________________________________________________________________。
11.誘導因素誘導動物細胞融合的原因：____________________________
__________________________________________________________。
12.單克隆抗體制備過程中，首先給小鼠注射特定抗原的目的是________
___________________________________。
克隆動物細胞核中的遺傳物質來自供體動物，但細胞質中的遺傳物質基本來自受體卵細胞；生物性狀還受環境因素的影響等
在誘導因素的作用下，細胞膜會發生一定程度的損傷，細胞就可以實現相互粘連而融合在一起
誘導小鼠產生能夠分泌特定抗體的B淋巴細胞
13.單克隆抗體制備過程中涉及兩次篩選：第一次篩選的目的是________
_________，方法是 ；第二次篩選的目的是
__________________________________，方法是 。
14.篩選出來的雜交瘤細胞的特點： 。
15.采集的精子需進行獲能處理，目的是 。
16.胚胎移植實際上是____________________________________________
_____。
篩選出雜
交瘤細胞
用HAT選擇培養基進行篩選
篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細胞
通過抗體檢測進行篩選
既能產生特異性抗體，又能無限增殖
使其具備與卵細胞受精的能力
生產胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的
過程
17.進行胚胎移植的優勢：________________________________________
_______________。
18.鑒定性別時，常取囊胚的滋養層細胞進行DNA分析的原因：________
______________________________________________________________________________。
19.胚胎在受體內能存活的原因：__________________________________
________。
20.胚胎分割可以看作動物無性繁殖或克隆的方法之一，其原因是______
__________________________________。
充分發揮優良母畜的繁殖潛力，在短期內獲得大量目標個體
囊胚的內細胞團將發育成完整的胚胎，滋養層將來發育成絨毛膜和胎盤等，對胚胎發育影響更小
受體對外來胚胎基本上不發生免疫排
斥反應
同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質
來自

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