資源簡介

章末檢測試卷(一)　(分值：100分)
一、選擇題(本題包括20小題，每小題2.5分，共50分)
1．如表是微生物培養基的配方，下列相關敘述錯誤的是(　　)
成分 含量 成分 含量
NaNO3 3 g FeSO4 0.01 g
K2HPO4 1 g 葡萄糖 30 g
瓊脂 15 g H2O 定容至1 000 mL
MgSO4·7H2O 0.5 g 抗生素 0.1萬單位
A.依物理性質劃分，該培養基屬于固體培養基
B．由培養基的原料可知，所培養微生物是異養型，培養的微生物可以是酵母菌
C．本培養基中抗生素的添加滿足了微生物生長對特殊營養物質的要求
D．若用該培養基分離能分解尿素的細菌，應除去抗生素和NaNO3，并加入尿素
2．(2024·嘉興高二期末)在生產、生活和科研實踐中，避免雜菌的污染十分關鍵。下列關于無菌操作技術的敘述，正確的是(　　)
A．接種環在接種前需在酒精燈火焰上灼燒
B．塞入試管口、錐形瓶口的棉花需使用脫脂棉花
C．含尿素的培養基需500 g/cm2壓力滅菌30分鐘
D．接種環、涂布器等接種工具的滅菌方式只有灼燒滅菌
3．(2020·浙江7月選考，19)下列關于微生物培養及利用的敘述，錯誤的是(　　)
A．利用尿素固體培養基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B．配制培養基時應根據微生物的種類調整培養基的pH
C．酵母菌不能直接利用糯米淀粉發酵得到糯米酒
D．適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化
4．(2023·金華高二檢測)下列有關微生物篩選的敘述，不正確的是(　　)
A．用全營養LB培養基篩選大腸桿菌
B．用高NaCl的培養基篩選抗鹽突變菌株
C．用含酚紅的尿素培養基篩選鑒別出分解尿素的菌株
D．利用高溫條件篩選耐高溫的細菌
5．酵母菌的培養與分離實驗中，下列操作錯誤的是(　　)
A．斜面培養基制備完成后，剩余的培養基可用于制備固體培養基
B．制作棉塞需使用普通棉花以減少雜菌污染
C．使用接種環給液體培養基和斜面培養基接種
D．馬鈴薯蔗糖培養基不可用于培養酵母菌
6．巴氏殺菌乳是以生牛(羊)乳為原料，經巴氏殺菌等工序制得的液體產品，某興趣小組進行了新鮮牛奶合適的消毒溫度的探究。下列相關實驗操作不合理的是(　　)
A．配制牛肉膏蛋白胨培養基并在121 ℃(1 kg/cm2壓力)條件下處理15～20 min
B．將等量的新鮮牛奶分別置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒溫水浴鍋中處理15 min
C．對處理后的牛奶進行梯度稀釋后，利用涂布法接種平板并在30～37 ℃下培養1～2 d
D．統計培養基上全部菌落數，以菌落數最少組的處理溫度作為最適消毒溫度
7．(2024·溫州高二期中)剛果紅能與纖維素形成紅色復合物，但對纖維素水解后形成的纖維二糖和葡萄糖無作用。某同學利用剛果紅配制選擇培養基，分離土壤中能水解纖維素的微生物并統計菌落數。下列敘述正確的是(　　)
A．劃線接種后統計平板上的菌落數，統計值比活菌實際數高
B．選擇培養基中應以剛果紅作為唯一碳源，并加入瓊脂糖作凝固劑
C．培養基進行高壓滅菌時，滅菌時間應從電源插上開始計時
D．可以把濾紙埋在土壤中，經過一段時間后，再從已腐爛的濾紙上篩選目的菌
8．(2023·金華高二質檢)如圖為實驗室培養微生物的有關操作，下列相關敘述錯誤的是(　　)
A．步驟①中，需將接種工具灼燒至變紅，以殺滅雜菌
B．步驟②中，將接種工具冷卻時不宜距酒精燈火焰太遠
C．圖中接種方法的目的是使菌種逐漸稀釋，經培養后獲得單菌落
D．接種后應將培養皿倒置培養，培養后可以根據結果進行微生物計數
(2024·嘉興高二期中)閱讀下列材料，完成第9、10小題。
某學者利用“影印培養法”研究大腸桿菌抗鏈霉素性狀產生的原因，先將原始菌種接種在1號培養基上，培養出菌落后，將滅菌絨布在1號上印模，絨布沾上菌落并進行轉印，使絨布上的菌落按照原位接種到2號和3號培養基上。待3號上長出菌落后，在2號上找到對應的菌落，然后接種到不含鏈霉素的4號培養液中，培養后再接種到5號培養基上，并重復以上步驟。實驗過程如圖所示。
9．下列關于實驗操作的敘述，正確的是(　　)
A．大腸桿菌抗鏈霉素的產生是發生在與鏈霉素接觸之后
B．1號和5號采用平板劃線法將菌種接種在相應選擇培養基上
C．要檢測培養基是否滅菌徹底，可設置一個不接種菌液的平板在相同條件下培養作為對照
D．涂布操作前接種環要進行灼燒滅菌
10．下列相關敘述錯誤的是(　　)
A．大腸桿菌抗鏈霉素的性狀是由基因突變引起的
B．7號培養基中觀察到的菌落數一定等于初始時接種到該培養基上的菌體數
C．4號與8號培養液中，抗鏈霉素菌株的比例逐漸增大
D．在一定時間內，4號培養液中大腸桿菌的數量逐漸增多
11．如圖為“能分解尿素的微生物的分離與計數”的實驗過程，下列敘述錯誤的是(　　)
A．為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數
B．取不同稀釋倍數的土壤稀釋液各0.1 mL，分別涂布于LB固體培養基、尿素固體培養基上
C．將實驗組和對照組37 ℃恒溫培養24～48 h時，需將平板倒置
D．在尿素固體培養基上生長的細菌都是能分解尿素的細菌
12．如圖是將酵母菌培養液稀釋100倍后通過顯微鏡觀察到的結果圖像。下列相關敘述正確的是(　　)
A．制片時，先用吸管滴加樣液再將蓋玻片放在計數板上
B．利用血細胞計數板計數的方法屬于顯微鏡計數法
C．需用吸水紙在蓋玻片一側吸引以加速酵母菌沉降到計數區底部
D．依據題圖可估算出培養液中酵母菌密度約為6×107個·mL－1
13．幽門螺桿菌是急慢性胃炎和胃潰瘍的主要致病菌，它能將尿素分解成氨氣等物質。若從攜帶者胃黏膜樣本中分離幽門螺桿菌，下列相關實驗步驟和方法正確的是(　　)
A．配制培養基時應以尿素為唯一碳源
B．可利用酚紅指示劑鑒定幽門螺桿菌的菌落
C．培養微生物的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌
D．樣本可用蒸餾水稀釋后涂布平板，統計樣本中活菌數量
14．(2023·金華高二月考)如圖簡單示意葡萄酒的釀制過程，下列敘述錯誤的是(　　)
A．甲裝置一天攪拌2～3次主要是為了釋放產生的氣體
B．白糖為甲裝置中酵母菌提供能源物質
C．甲裝置與乙裝置中放出的氣體主要是CO2
D．夏季，打開丙裝置中的塞子，可能會有醋酸產生
15．在發酵技術中要避免雜菌污染，下列相關敘述錯誤的是(　　)
A．泡菜制作加食鹽、白酒等調味品，可有助于防止雜菌污染
B．通過控制發酵溫度，可在一定程度上抑制雜菌污染
C．與自然發酵相比，接種人工培養的菌種不易被雜菌污染
D．制成的果醋和泡菜需經高壓蒸汽滅菌來避免雜菌污染
16．下列對發酵產品的分離、提純和加工的說法，錯誤的是(　　)
A．為了獲得大量酵母菌，可采用離心等方法
B．釀制白酒時，常用蒸餾的方法提取發酵產品
C．吸附發酵需要用到吸附劑
D．發酵過程中的環境條件只影響微生物的生長繁殖，不影響微生物代謝產物的形成
(2024·寧波高二期中)閱讀下列材料，完成第17、18小題。
仙居楊梅除可以直接食用外，還可用于釀酒。智慧的勞動人民利用發酵工程技術(發酵罐如圖)，大規模生產楊梅酒，使仙居楊梅的價值大增。發酵型楊梅酒的工藝流程依次包括挑選楊梅、清洗、打漿、糖酸調整、加入酵母菌、倒罐、發酵、除酸、過濾、澄清、殺菌、陳釀、成品等。
17．下列關于楊梅酒發酵的敘述，正確的是(　　)
A．圖中②為楊梅酒出口，通過檢測流出發酵液糖的濃度，決定何時終止發酵
B．圖中③為葉輪，可以加快酵母菌的繁殖
C．采用真空發酵技術不能提高果酒發酵速率
D．夏季高溫會促進發酵菌種的繁殖，大量獲得發酵產物
18．某同學采用塑料瓶等自制簡易楊梅醋發酵裝置，下列敘述錯誤的是(　　)
A．可以采用楊梅酒為原料
B．保持通氣，在發酵液表面會形成菌膜
C．發酵過程中，醋酸菌的生長繁殖和代謝產物的形成都與pH有關
D．吸取發酵液，在顯微鏡下觀察可看到菌落
19．(2024·浙江七彩陽光聯盟高二期中)發酵工程是重要的生物工程技術，可以為人類提供多樣的生物產品。下列關于發酵工程的敘述，錯誤的是(　　)
A．可利用誘變育種或轉基因技術改良菌種
B．菌種活化后須經擴大培養再接種進行發酵
C．發酵不同階段所需控制的條件不同
D．發酵產品均可通過過濾、沉淀獲得
20.(2021·山東，20)含硫蛋白質在某些微生物的作用下產生硫化氫導致生活污水發臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結合形成黑色沉淀。為探究發臭水體中甲、乙菌是否產生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養基上進行培養，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯誤的是(　　)
A．乙菌的運動能力比甲菌強
B．為不影響菌的運動需選用液體培養基
C．該實驗不能比較出兩種菌產生硫化氫的量
D．穿刺接種等接種技術的核心是防止雜菌的污染
二、非選擇題(本題包括5小題，共50分)
21．(每空1分，共9分)(2024·杭州高二期末)如表是某公司研發的一種培養大腸桿菌菌群的培養基配方，請根據表格和所學知識回答下列相關問題：
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑 瓊脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL
(1)若根據用途劃分，該培養基屬于________(填“選擇”或“鑒別”)培養基。若要用上述培養基來篩選出土壤中的尿素分解菌，培養基的營養成分中應將蛋白胨改成________，并用__________作為指示劑。
(2)在微生物培養的過程中，為防止雜菌污染，需要對培養基和培養皿進行__________；操作者的雙手需要進行清洗和__________。
(3)圖1和圖2是培養某細菌的結果圖，其對應的接種方法分別是____________和________________，這兩種方法接種后培養基上都可以得到由單個細胞繁殖所形成的__________。圖____所用的接種方法可用來對活菌進行計數。
22．(每空1分，共8分)(2024·嘉興高二期末)醬油制作在我國具有悠久的歷史，其中“海鹽沈蕩醬油釀造技藝”被列入嘉興市非物質文化遺產名錄。制作醬油的菌種主要有米曲霉、酵母菌、乳酸菌，基本流程如圖。回答下列問題：
(1)米曲霉發酵過程中，加入的黃豆和面粉可以為米曲霉提供營養物質，黃豆中為米曲霉生長提供氮源的主要物質是______________。從培養基的成分看，屬于______________培養基。米曲霉的代謝類型是__________________。
(2)抑制雜菌污染是保證醬油質量的重要因素。在“曬制發酵”過程中，________________(至少答出2種)等物質可以抑制雜菌生長。
(3)菌種是影響醬油風味的關鍵因素，米曲霉能分泌蛋白酶、淀粉酶等多種酶類，產生風味獨特的成分。若平板培養基以淀粉為唯一碳源，接種菌液并培養，平板上長出菌落后加入顯色劑，則可篩選出產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是______________，該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是___________________________________________________________。根據__________________________的大小，可粗略估計出菌株是否產淀粉酶及其產酶能力。若要保存優質菌種，可挑取單菌落，使用________法接種到斜面培養基上。
23．(每空1分，共10分)啤酒是一種含多種氨基酸、低分子糖等物質的低酒精濃度飲料。回答下列問題：
(1)啤酒釀造過程中起主要作用的微生物是____________，下列生物中與該微生物在結構上存在明顯區別的是________(多選)。
A．噬菌體 B．青霉菌
C．乳酸菌 D．農桿菌
(2)從物理特征看，工業釀酒的培養基屬于________培養基。啤酒釀造以剛萌發的大麥種子(麥芽)為原料，從培養基成分來看，麥芽為微生物生長提供了____________________。
(3)啤酒花是桑科葎草屬植物，其雌花序和果穗可用于啤酒釀造，賦予啤酒獨特的香味和苦味等。將適量啤酒花加入過濾后的麥芽汁中，煮沸1小時，目的不僅是使啤酒花中的物質溶出，且能夠________________。啤酒花還具有抑菌作用，為研究啤酒花的抑菌作用，在LB固體培養基中添加不同濃度的啤酒花提取液，經滅菌后制成________，采用________________法接種大腸桿菌后置于恒溫箱中培養24小時，觀察并比較菌落數量及生長情況。
(4)發酵過程中發酵罐內的泡沫先逐漸增多后減少，泡沫減少的主要原因是______________。經測定發酵消耗的糖中，98.5%形成了酒精和其他發酵產物，其余則用于_____________。
(5)啤酒的不同風味由多種因素造成，請列舉兩種因素：______________________________。
24．(每空1分，共10分)(2024·浙江精誠聯盟高二月考)科學家運用合成生物學方法構建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖)為原料，在實驗室發酵生產PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價值，工藝流程如圖所示。回答下列問題：
(1)發酵工程一般包括菌種的選育、擴大培養、培養基的配制、__________、接種、發酵、產品的__________________等方面。
(2)三位同學用稀釋涂布平板法測定某一時間段內嗜鹽單胞菌H的數量，他們的操作及統計結果如下：甲同學涂布了兩個平板，統計的菌落數是236和260，取平均值248；乙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是21、212和256，取平均值163；丙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是209、240和250，取平均值233。在三位同學的統計中，______同學的統計是正確的。該方法要經過較長時間的培養，待____________________后進行統計。該方法統計出的結果往往偏低，原因是____________________________________________________。
(3)為獲得對蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可將蔗糖作為液體培養基的__________，并不斷提高其濃度，多代培養選擇。從功能上看，所用培養基為______________。
(4)基于菌株H嗜鹽、對酸堿耐受能力強等特性，研究人員設計了一種不需要滅菌的發酵系統，其培養基鹽濃度設為60 g/L、pH為10，菌株H可正常持續發酵60 d以上。該系統不需要滅菌，分析原因：一是培養基的鹽濃度設為60 g/L，其他雜菌因____________而死亡；二是pH為10的條件下，其他雜菌的______變性失活，生長繁殖受抑制。
(5)研究人員在工廠進行擴大培養，在適宜的營養物濃度、溫度、pH條件下發酵，結果發現發酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，說明發酵過程中，____________可能是高密度培養的限制因素。
25．(13分)隨著抗生素臨床使用及不合理使用的增加，細菌耐藥性增加，抗生素的療效下降。蛋白質的分泌對于細菌的毒性和生長必不可少，尋找新型抗生素抑制細菌蛋白質的分泌對于治療細菌性疾病有重要的意義。現有一種新型抗生素(抗生素R)，為探究其作用效果，根據以下材料用具，寫出實驗思路，并分析實驗結果。
實驗材料：若干個培養瓶、培養液、無毒細菌M稀釋液、新型抗生素R溶液。(要求與說明：細菌數目和蛋白質的含量可用儀器測定，試劑、儀器、用具及操作不作要求；實驗條件適宜。)
(1)實驗思路：
①取若干培養瓶編號為甲、乙，每個培養瓶中加入等量的_______________________________；
②_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________；
③甲組培養瓶中加入適量抗生素R溶液，乙組培養瓶加入________________________；
④在適宜條件下培養，每隔一段時間測定細胞數和分泌蛋白含量；
⑤對所得實驗數據進行________________。
(2)若抗生素R有療效，預測實驗結果(請設計一個坐標系，并繪制預測單位數量的細菌分泌蛋白含量的變化曲線)。
(3)(3分)實驗所用的培養瓶在使用前進行____________處理，以防雜菌污染。細菌耐藥性的性狀是由______________而產生的，抗生素的使用導致耐藥性增強是______(填“人工”或“自然”)選擇的結果。
答案精析
1．C　[從培養基成分看，配方中含有瓊脂，屬于固體培養基，A正確；從培養基成分看，配方中的葡萄糖屬于有機碳源，因此所培養微生物的同化作用類型是異養型，抗生素能夠抑制細菌的生長，因此培養的微生物可以是酵母菌，B正確，C錯誤。]
2．A　[塞入試管口、錐形瓶口的棉塞制作需使用普通棉花，因為脫脂棉吸水后容易引起污染，B錯誤；高溫會使尿素分解，含有尿素的培養基不能加熱滅菌，通常使用已滅菌的G6玻璃砂漏斗對其進行過濾除菌，C錯誤；接種環、涂布器等接種工具的滅菌方式還有高壓滅菌、干熱滅菌，D錯誤。]
3．A　[以尿素為唯一氮源的固體培養基是選擇培養基，讓能利用尿素的微生物生長，其他微生物不能生長，但不能迅速殺死其他微生物，A錯誤；不同微生物生長的適宜pH不同，B正確；釀酒時酵母菌直接利用的物質是葡萄糖，因此酵母菌不能直接利用糯米淀粉發酵得到糯米酒，C正確；醋酸發酵時，適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化，較高濃度的酒精會抑制醋酸菌的活化，D正確。]
4．A　[大多數微生物在全營養的LB培養基上都可以生長，所以不能用全營養LB培養基篩選大腸桿菌，A錯誤；在高NaCl的培養基中生活的微生物能抗鹽，因此可實現篩選抗鹽突變菌株的目的，B正確；分解尿素的菌株可將培養基中的尿素分解為氨，使培養基的pH升高，使酚紅變紅，C正確。]
5．D　[斜面培養基中含有凝固劑，可用于制備固體培養基，A 正確；脫脂棉吸水后容易引起污染，所以制作棉塞時應該使用普通棉花，B正確；給液體培養基接種、用劃線法給平板和斜面培養基接種都要用到接種環，C正確；馬鈴薯蔗糖培養基含有酵母菌所需要的營養物質，適用于培養酵母菌，D錯誤。]
6．D　[配制的牛肉膏蛋白胨培養基需使用高壓蒸汽滅菌法滅菌，即在121 ℃(1 kg/cm2壓力)條件下處理15～20 min，將培養基徹底滅菌，以避免培養基上的微生物影響實驗結果，A正確；新鮮牛奶應使用巴氏消毒法消毒，為了探究新鮮牛奶合適的消毒溫度，可將等量的新鮮牛奶分別置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒溫水浴鍋中處理15 min，并檢測不同溫度處理下的牛奶中微生物的數量并進行比較，B正確；若要統計消毒后的牛奶中微生物的數量，可用稀釋涂布平板法，所以可對處理后的牛奶進行梯度稀釋后，利用涂布法接種平板并在30～37 ℃下培養1～2 d，C正確；由于溫度過高會影響蛋白質的結構，進而破壞牛奶中的營養成分，所以菌落數最少的組對應的溫度不一定是最適的消毒溫度，D錯誤。]
7．D　[劃線接種不能用于菌落的計數，A錯誤；剛果紅相當于指示劑，要用以纖維素為唯一碳源的選擇培養基，B錯誤；培養基進行高壓滅菌時，滅菌時間應從達到設定的溫度或壓力值后開始計時，C錯誤；濾紙的主要成分是纖維素，可以通過題述操作獲得能夠分解纖維素的微生物，D正確。]
8．D　[圖中所示的接種方法是平板劃線法，目的是使接種的菌種逐漸稀釋，經培養后獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，C正確；圖示的平板劃線法不能用于微生物的計數，D錯誤。]
9．C　[大腸桿菌抗鏈霉素的性狀是由基因突變引起的，該突變發生在與鏈霉素接觸之前，A錯誤；由題圖可知，1號和5號采用稀釋涂布平板法將菌種接種在相應選擇培養基上，B錯誤；若要檢測培養基是否滅菌徹底，最有效的方法是將未接種的培養基作為對照組放在相同條件下培養，若出現菌落，則說明培養基沒有滅菌徹底，C正確；進行稀釋涂布操作時，將需要用到的涂布器進行灼燒滅菌，D錯誤。]
10．B　[當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故7號培養基中觀察到的菌落數可能少于初始時接種到該培養基上的菌體數，B錯誤；3號與2號、7號與6號培養基中的菌落數的比值是抗性菌落占全部菌落的比例，由此可推測4號與8號培養液中，抗鏈霉素菌株的比例逐漸增大，C正確；在接種大腸桿菌后，因4號培養液中的營養充足、條件適宜，故在一定時間內大腸桿菌的數量會隨著自身的分裂增殖而逐漸增多，D正確。]
11．D　[在尿素固體培養基上生長的細菌大多數是能分解尿素、以尿素為氮源的細菌，還有一些是能利用空氣中的氮的微生物等，D錯誤。]
12．B　[制片時，應先將專用的蓋玻片蓋在計數板上，再用吸管滴加樣液，A錯誤；顯微鏡計數法是測定細菌數量的常用方法，利用血細胞計數板計數的方法屬于顯微鏡計數法，B正確；將蓋玻片放在計數板上，用滴管在蓋玻片邊緣滴加菌液后，讓菌液自行滲入，多余的菌液再用濾紙吸去，C錯誤；此血細胞計數板的計數區是25×16型，即大方格內分為25中方格，每一中方格又分為16小方格，計數區的規格為1 mm×1 mm×0.1 mm，圖中每個中方格的平均酵母菌數為24，酵母菌培養液稀釋100倍，則1 mL培養液中酵母菌數約為24×25×100÷0.1×1 000＝6×108(個)，D錯誤。]
13．B　[選擇培養基時應以尿素為唯一氮源，A錯誤；在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素，為幽門螺桿菌的菌落，B正確；尿素溶液不能用高壓蒸汽滅菌法滅菌，C錯誤；稀釋涂布平板法的樣本需要用無菌水進行稀釋，D錯誤。]
14．A　[甲裝置一天攪拌2～3次主要是為了增加溶氧量，讓酵母菌進行需氧呼吸從而大量繁殖，添加白糖主要是為酵母菌提供能源物質，A錯誤，B正確；甲裝置中酵母菌主要進行需氧呼吸，乙裝置中酵母菌進行厭氧呼吸，兩個裝置中放出的氣體主要是CO2，C正確；夏季，打開丙裝置中的塞子，空氣中的醋酸菌可能進入容器中，在有氧、高溫條件下，醋酸菌將乙醇氧化為醋酸，D正確。]
15．D　[泡菜制作時加入食鹽可以抑制雜菌生長，同時還要加入少量白酒，使泡菜更加脆爽、清香的同時也能起到抑制雜菌生長的作用，A正確；不同微生物發酵的適宜溫度不同，因此通過控制發酵溫度，可在一定程度上抑制雜菌的生長繁殖，B正確；與自然發酵相比，人工接種過程中采取了嚴格的滅菌措施，可以防止其他雜菌污染，且發酵獲得的產品品質更好，C正確；制成的果醋和泡菜不需要經高壓蒸汽滅菌，否則會破壞其風味，D錯誤。]
16．D　[生物代謝產物是經化學反應生成的，生物體內的化學反應幾乎都需要酶的催化，與溫度、pH、氧氣等環境條件都有關系，D錯誤。]
17．B　[圖中①為冷卻水的進口，②為冷卻水的出口，不能通過②檢測流出發酵液糖的濃度，A錯誤；圖中③為葉輪，葉輪的攪拌不僅能使氣泡與發酵液混合，而且使微生物細胞與發酵液中的營養物質接觸，可以加快酵母菌的繁殖，B正確；在無氧條件下，酵母菌能進行厭氧發酵，因此，采用真空發酵技術能提高果酒發酵速率，C錯誤；酵母菌生長繁殖的適宜溫度范圍是18～30 ℃，夏季高溫不能促進發酵菌種的繁殖，D錯誤。]
18．D　[醋酸菌在有氧條件下可將乙醇氧化為醋酸，因此可以采用楊梅酒為原料制作楊梅醋，A正確；菌落是在適宜固體培養基表面或內部形成的一團肉眼可見的、有一定形態構造的子細胞集團，吸取發酵液，在顯微鏡下不能看到菌落，可直接看到微生物，D錯誤。]
19．D　[可以從自然界中篩選優良菌種，也可以通過人工誘變或基因工程選育新菌株用于發酵，A正確；確定菌種后，還要將菌種進行多次擴大培養，以培養出足夠多的菌種，再進行接種，這樣可以縮短菌種在發酵罐中發酵的時間，B正確；根據菌種不同、發酵時間不同，發酵過程中需要控制的條件不同，C正確；如果發酵的產品是菌體本身(如酵母菌)，可采用過濾、沉淀等方法從培養液中分離出來，但如果發酵產品是微生物的代謝產物，則可采用真空發酵、吸附發酵、萃取發酵等方法進行提取，D錯誤。]
20．B　[從圖中可以看出，甲菌在試管中分布范圍小于乙菌，說明乙菌的運動能力比甲菌強，A正確；為了不影響菌的運動需選用半固體培養基，B錯誤；該實驗可以根據黑色沉淀的多少初步比較細菌產生硫化氫的能力，但不能測定產生硫化氫的量，C正確；微生物接種技術的核心是防止雜菌的污染，D正確。]
21．(1)鑒別　尿素　酚紅　(2)滅菌　消毒　(3)稀釋涂布平板法　平板劃線法　單菌落　1
解析　(1)分析表格可知，該培養基具備碳源、氮源、無機鹽等營養成分，并且該培養基加入了指示劑，因此屬于鑒別培養基。篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，該配方中的蛋白胨需要改成尿素；由于尿素分解菌可以產生脲酶將尿素分解為氨，使培養基pH升高，故培養基中加酚紅指示劑。(2)微生物培養過程中，應注意無菌操作，需要對培養基和培養皿進行滅菌，操作者的雙手需要進行清洗和消毒。
22．(1)蛋白質　天然　異養需氧型　(2)食鹽、乳酸、乙醇　(3)碘－碘化鉀溶液　淀粉遇碘－碘化鉀溶液顯藍色，產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈　透明圈與菌落直徑比值　平板劃線
解析　(1)黃豆中含有豐富的蛋白質，黃豆中的蛋白質含有N，可為米曲霉的生長提供氮源；從培養基成分來看，該培養基屬于天然培養基；米曲霉發酵過程需要提供營養物質、曬制發酵，說明米曲霉的生長需要消耗有機物質和氧氣，可知其代謝類型是異養需氧型。(2)由題目可知，在發酵池中酵母菌產生的乙醇能抑制雜菌的生長，乳酸菌產生的乳酸使發酵液呈酸性，也能抑制雜菌的生長，同時往發酵池中添加的食鹽也能抑制雜菌的生長，故該階段中可以抑制雜菌生長的物質是乙醇、乳酸和食鹽等。(3)篩選出產淀粉酶的微生物可加入碘－碘化鉀溶液作顯色劑，因為淀粉遇碘－碘化鉀溶液變藍，產生淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，不顯藍色，會形成透明圈；根據透明圈與菌落直徑比值的大小，可粗略估計出菌株是否產淀粉酶及其產酶能力；若要保存優質菌種，可挑取單菌落，使用平板劃線法接種到斜面培養基上。
23．(1)酵母菌　ACD　(2)液體　碳源、氮源(水、無機鹽、生長因子)　(3)殺滅雜菌　平板　稀釋涂布平板　(4)酵母菌細胞呼吸產生二氧化碳減少　酵母菌自身生長和繁殖
(5)不同的菌種、不同菌株、不同環境條件、不同原料、不同微生物的相互作用
24．(1)滅菌　分離、提純　(2)丙　菌落數穩定　當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的往往只是一個菌落
(3)唯一碳源　選擇培養基　(4)失水過多　酶　(5)氧氣(或溶解氧)
解析　(2)為了保證計數結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板計數，應至少對同一稀釋度下3個平板進行計數，并求平均值，增強實驗的說服力與準確性。在三位同學的統計中，甲同學只涂布了兩個平板，偶然性太大，乙同學計數的三個平板上，其中一個菌落數過少，且與其余兩個誤差較大，丙同學選擇菌落數在30～300的平板計數，故只有丙同學的統計是正確的。該方法要經過較長時間的培養，待菌落數穩定(保證所有菌株都發育為菌落)后進行統計。(3)根據題意分析，該實驗的目的是提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，結合微生物的代謝需求，其液體培養基應該以蔗糖作為唯一碳源，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養可篩選出目標菌株，從功能上看，能進行篩選的培養基是選擇培養基。(5)分析題意，擴大培養時，在適宜的營養物濃度、溫度、pH等條件下，發酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，說明發酵過程中氧氣不足，使菌種進行厭氧呼吸產生乙醇，即氧氣(或溶解氧)是限制高密度培養的重要因素。
25．(1)①培養液和無毒細菌M稀釋液　②取其中的培養瓶，分別測定細胞數和分泌蛋白含量　③等量的培養液　⑤統計分析　(2)如圖所示
(3)滅菌　基因突變　自然(共77張PPT)
章末檢測試卷(一)
第一章 發酵工程
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A.依物理性質劃分，該培養基屬于固體培養基
B.由培養基的原料可知，所培養微生物是異養型，培養的微生物可以是酵母菌
C.本培養基中抗生素的添加滿足了微生物生長對特殊營養物質的要求
D.若用該培養基分離能分解尿素的細菌，應除去抗生素和NaNO3，并加入尿素
1.如表是微生物培養基的配方，下列相關敘述錯誤的是
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選擇題
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成分 含量 成分 含量
NaNO3 3 g FeSO4 0.01 g
K2HPO4 1 g 葡萄糖 30 g
瓊脂 15 g H2O 定容至1 000 mL
MgSO4·7H2O 0.5 g 抗生素 0.1萬單位
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從培養基成分看，配方中含有瓊脂，屬于固體培養基，A正確；
從培養基成分看，配方中的葡萄糖屬于有機碳源，因此所培養微生物的同化作用類型是異養型，抗生素能夠抑制細菌的生長，因此培養的微生物可以是酵母菌，B正確，C錯誤。
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2.(2024·嘉興高二期末)在生產、生活和科研實踐中，避免雜菌的污染十分關鍵。下列關于無菌操作技術的敘述，正確的是
A.接種環在接種前需在酒精燈火焰上灼燒
B.塞入試管口、錐形瓶口的棉花需使用脫脂棉花
C.含尿素的培養基需500 g/cm2壓力滅菌30分鐘
D.接種環、涂布器等接種工具的滅菌方式只有灼燒滅菌
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塞入試管口、錐形瓶口的棉塞制作需使用普通棉花，因為脫脂棉吸水后容易引起污染，B錯誤；
高溫會使尿素分解，含有尿素的培養基不能加熱滅菌，通常使用已滅菌的G6玻璃砂漏斗對其進行過濾除菌，C錯誤；
接種環、涂布器等接種工具的滅菌方式還有高壓滅菌、干熱滅菌，D錯誤。
選擇題
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3.(2020·浙江7月選考，19)下列關于微生物培養及利用的敘述，錯誤的是
A.利用尿素固體培養基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B.配制培養基時應根據微生物的種類調整培養基的pH
C.酵母菌不能直接利用糯米淀粉發酵得到糯米酒
D.適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化
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以尿素為唯一氮源的固體培養基是選擇培養基，讓能利用尿素的微生物生長，其他微生物不能生長，但不能迅速殺死其他微生物，A錯誤；
不同微生物生長的適宜pH不同，B正確；
釀酒時酵母菌直接利用的物質是葡萄糖，因此酵母菌不能直接利用糯米淀粉發酵得到糯米酒，C正確；
醋酸發酵時，適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化，較高濃度的酒精會抑制醋酸菌的活化，D正確。
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選擇題
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4.(2023·金華高二檢測)下列有關微生物篩選的敘述，不正確的是
A.用全營養LB培養基篩選大腸桿菌
B.用高NaCl的培養基篩選抗鹽突變菌株
C.用含酚紅的尿素培養基篩選鑒別出分解尿素的菌株
D.利用高溫條件篩選耐高溫的細菌
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大多數微生物在全營養的LB培養基上都可以生長，所以不能用全營養LB培養基篩選大腸桿菌，A錯誤；
在高NaCl的培養基中生活的微生物能抗鹽，因此可實現篩選抗鹽突變菌株的目的，B正確；
分解尿素的菌株可將培養基中的尿素分解為氨，使培養基的pH升高，使酚紅變紅，C正確。
選擇題
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5.酵母菌的培養與分離實驗中，下列操作錯誤的是
A.斜面培養基制備完成后，剩余的培養基可用于制備固體培養基
B.制作棉塞需使用普通棉花以減少雜菌污染
C.使用接種環給液體培養基和斜面培養基接種
D.馬鈴薯蔗糖培養基不可用于培養酵母菌
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斜面培養基中含有凝固劑，可用于制備固體培養基，A 正確；
脫脂棉吸水后容易引起污染，所以制作棉塞時應該使用普通棉花，B正確；
給液體培養基接種、用劃線法給平板和斜面培養基接種都要用到接種環，C正確；
馬鈴薯蔗糖培養基含有酵母菌所需要的營養物質，適用于培養酵母菌，D錯誤。
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6.巴氏殺菌乳是以生牛(羊)乳為原料，經巴氏殺菌等工序制得的液體產品，某興趣小組進行了新鮮牛奶合適的消毒溫度的探究。下列相關實驗操作不合理的是
A.配制牛肉膏蛋白胨培養基并在121 ℃(1 kg/cm2壓力)條件下處理15～20 min
B.將等量的新鮮牛奶分別置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒溫水浴鍋中處理15 min
C.對處理后的牛奶進行梯度稀釋后，利用涂布法接種平板并在30～37 ℃下培養
　1～2 d
D.統計培養基上全部菌落數，以菌落數最少組的處理溫度作為最適消毒溫度
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配制的牛肉膏蛋白胨培養基需使用高壓蒸汽滅菌法滅菌，即在121 ℃
(1 kg/cm2壓力)條件下處理15～20 min，將培養基徹底滅菌，以避免培養基上的微生物影響實驗結果，A正確；
新鮮牛奶應使用巴氏消毒法消毒，為了探究新鮮牛奶合適的消毒溫度，可將等量的新鮮牛奶分別置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒溫水浴鍋中處理15 min，并檢測不同溫度處理下的牛奶中微生物的數量并進行比較，B正確；
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若要統計消毒后的牛奶中微生物的數量，可用稀釋涂布平板法，所以可對處理后的牛奶進行梯度稀釋后，利用涂布法接種平板并在30～37 ℃下培養1～2 d，C正確；
由于溫度過高會影響蛋白質的結構，進而破壞牛奶中的營養成分，所以菌落數最少的組對應的溫度不一定是最適的消毒溫度，D錯誤。
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7.(2024·溫州高二期中)剛果紅能與纖維素形成紅色復合物，但對纖維素水解后形成的纖維二糖和葡萄糖無作用。某同學利用剛果紅配制選擇培養基，分離土壤中能水解纖維素的微生物并統計菌落數。下列敘述正確的是
A.劃線接種后統計平板上的菌落數，統計值比活菌實際數高
B.選擇培養基中應以剛果紅作為唯一碳源，并加入瓊脂糖作凝固劑
C.培養基進行高壓滅菌時，滅菌時間應從電源插上開始計時
D.可以把濾紙埋在土壤中，經過一段時間后，再從已腐爛的濾紙上篩選目的菌
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劃線接種不能用于菌落的計數，A錯誤；
剛果紅相當于指示劑，要用以纖維素為唯一碳源的選擇培養基，B錯誤；
培養基進行高壓滅菌時，滅菌時間應從達到設定的溫度或壓力值后開始計時，C錯誤；
濾紙的主要成分是纖維素，可以通過題述操作獲得能夠分解纖維素的微生物，D正確。
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8.(2023·金華高二質檢)如圖為實驗室培養微生物的有關操作，下列相關敘述錯誤的是
A.步驟①中，需將接種工具灼燒至
　變紅，以殺滅雜菌
B.步驟②中，將接種工具冷卻時不
　宜距酒精燈火焰太遠
C.圖中接種方法的目的是使菌種逐漸稀釋，經培養后獲得單菌落
D.接種后應將培養皿倒置培養，培養后可以根據結果進行微生物計數
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圖中所示的接種方法是平板劃線法，目的是使接種的菌種逐漸稀釋，經培養后獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，C正確；
圖示的平板劃線法不能用于微生物的計數，D錯誤。
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(2024·嘉興高二期中)閱讀下列材料，完成第9、10小題。
某學者利用“影印培養法”研究大腸桿菌抗鏈霉素性狀產生的原因，先將原始菌種接種在1號培養基上，培養出菌落后，將滅菌絨布在1號上印模，絨布沾上菌落并進行轉印，使絨布上的菌落按照原位接種到2號和
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3號培養基上。待3號上長出菌落后，在2號上找到對應的菌落，然后接種到不含鏈霉素的4號培養液中，培養后再接種到5號培養基上，并重復以上步驟。實驗過程如圖所示。
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選擇題
9.下列關于實驗操作的敘述，正確的是
A.大腸桿菌抗鏈霉素的產生是發生在與鏈霉
　素接觸之后
B.1號和5號采用平板劃線法將菌種接種在相
　應選擇培養基上
C.要檢測培養基是否滅菌徹底，可設置一個不接種菌液的平板在相同條
　件下培養作為對照
D.涂布操作前接種環要進行灼燒滅菌
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大腸桿菌抗鏈霉素的性狀是由基因突變引起的，該突變發生在與鏈霉素接觸之前，A錯誤；
由題圖可知，1號和5號采用稀釋涂布平板法將菌種接種在相應選擇培養基上，B錯誤；
若要檢測培養基是否滅菌徹底，最有效的方法
是將未接種的培養基作為對照組放在相同條件下培養，若出現菌落，則說明培養基沒有滅菌徹底，C正確；
進行稀釋涂布操作時，將需要用到的涂布器進行灼燒滅菌，D錯誤。
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10.下列相關敘述錯誤的是
A.大腸桿菌抗鏈霉素的性狀是由基因突變
　引起的
B.7號培養基中觀察到的菌落數一定等于初
　始時接種到該培養基上的菌體數
C.4號與8號培養液中，抗鏈霉素菌株的比例逐漸增大
D.在一定時間內，4號培養液中大腸桿菌的數量逐漸增多
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選擇題
當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故7號培養基中觀察到的菌落數可能少于初始時接種到該培養基上的菌體數，B錯誤；
3號與2號、7號與6號培養基中的菌落數的比值
是抗性菌落占全部菌落的比例，由此可推測4號與8號培養液中，抗鏈霉素菌株的比例逐漸增大，C正確；
在接種大腸桿菌后，因4號培養液中的營養充足、條件適宜，故在一定時間內大腸桿菌的數量會隨著自身的分裂增殖而逐漸增多，D正確。
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11.如圖為“能分解尿素的微生物的分離與計數”的實驗過程，下列敘述錯誤的是
A.為了保證結果準確，一般選擇菌
　落數在30～300的平板進行計數
B.取不同稀釋倍數的土壤稀釋液各
　0.1 mL，分別涂布于LB固體培養基、尿素固體培養基上
C.將實驗組和對照組37 ℃恒溫培養24～48 h時，需將平板倒置
D.在尿素固體培養基上生長的細菌都是能分解尿素的細菌
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在尿素固體培養基上生長的細菌大多數是能分解尿素、以尿素為氮源的細菌，還有一些是能利用空氣中的氮的微生物等，D錯誤。
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12.如圖是將酵母菌培養液稀釋100倍后通過顯微鏡觀察到的結果圖像。下列相關敘述正確的是
A.制片時，先用吸管滴加樣液再將蓋玻片
　放在計數板上
B.利用血細胞計數板計數的方法屬于顯微
　鏡計數法
C.需用吸水紙在蓋玻片一側吸引以加速酵母菌沉降到計數區底部
D.依據題圖可估算出培養液中酵母菌密度約為6×107個·mL－1
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制片時，應先將專用的蓋玻片蓋在計數板
上，再用吸管滴加樣液，A錯誤；
顯微鏡計數法是測定細菌數量的常用方法，
利用血細胞計數板計數的方法屬于顯微鏡計數法，B正確；
將蓋玻片放在計數板上，用滴管在蓋玻片邊緣滴加菌液后，讓菌液自行滲入，多余的菌液再用濾紙吸去，C錯誤；
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此血細胞計數板的計數區是25×16型，
即大方格內分為25中方格，每一中方格
又分為16小方格，計數區的規格為1 mm
×1 mm×0.1 mm，圖中每個中方格的平均酵母菌數為24，酵母菌培養液稀釋100倍，則1 mL培養液中酵母菌數約為24×25×100÷0.1×
1 000＝6×108(個)，D錯誤。
選擇題
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13.幽門螺桿菌是急慢性胃炎和胃潰瘍的主要致病菌，它能將尿素分解成氨氣等物質。若從攜帶者胃黏膜樣本中分離幽門螺桿菌，下列相關實驗步驟和方法正確的是
A.配制培養基時應以尿素為唯一碳源
B.可利用酚紅指示劑鑒定幽門螺桿菌的菌落
C.培養微生物的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌
D.樣本可用蒸餾水稀釋后涂布平板，統計樣本中活菌數量
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選擇題
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25
選擇培養基時應以尿素為唯一氮源，A錯誤；
在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素，為幽門螺桿菌的菌落，B正確；
尿素溶液不能用高壓蒸汽滅菌法滅菌，C錯誤；
稀釋涂布平板法的樣本需要用無菌水進行稀釋，D錯誤。
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選擇題
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14.(2023·金華高二月考)如圖簡單示意葡萄酒的釀制過程，下列敘述錯誤的是
A.甲裝置一天攪拌2～3次主要是為
　了釋放產生的氣體
B.白糖為甲裝置中酵母菌提供能
　源物質
C.甲裝置與乙裝置中放出的氣體主要是CO2
D.夏季，打開丙裝置中的塞子，可能會有醋酸產生
√
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選擇題
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甲裝置一天攪拌2～3次主要是為了增加溶氧量，讓酵母菌進行需氧呼吸從而大量繁殖，添加白糖主要是為酵母菌提供能源物質，A錯誤，B正確；
甲裝置中酵母菌主要進行需氧呼吸，乙裝置中酵母菌進行厭氧呼吸，兩個裝置中放出的氣體主要是CO2，C正確；
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選擇題
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夏季，打開丙裝置中的塞子，空氣中的醋酸菌可能進入容器中，在有氧、高溫條件下，醋酸菌將乙醇氧化為醋酸，D正確。
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選擇題
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15.在發酵技術中要避免雜菌污染，下列相關敘述錯誤的是
A.泡菜制作加食鹽、白酒等調味品，可有助于防止雜菌污染
B.通過控制發酵溫度，可在一定程度上抑制雜菌污染
C.與自然發酵相比，接種人工培養的菌種不易被雜菌污染
D.制成的果醋和泡菜需經高壓蒸汽滅菌來避免雜菌污染
√
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選擇題
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泡菜制作時加入食鹽可以抑制雜菌生長，同時還要加入少量白酒，使泡菜更加脆爽、清香的同時也能起到抑制雜菌生長的作用，A正確；
不同微生物發酵的適宜溫度不同，因此通過控制發酵溫度，可在一定程度上抑制雜菌的生長繁殖，B正確；
與自然發酵相比，人工接種過程中采取了嚴格的滅菌措施，可以防止其他雜菌污染，且發酵獲得的產品品質更好，C正確；
制成的果醋和泡菜不需要經高壓蒸汽滅菌，否則會破壞其風味，D錯誤。
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選擇題
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16.下列對發酵產品的分離、提純和加工的說法，錯誤的是
A.為了獲得大量酵母菌，可采用離心等方法
B.釀制白酒時，常用蒸餾的方法提取發酵產品
C.吸附發酵需要用到吸附劑
D.發酵過程中的環境條件只影響微生物的生長繁殖，不影響微生物代謝
　產物的形成
√
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選擇題
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選擇題
生物代謝產物是經化學反應生成的，生物體內的化學反應幾乎都需要酶的催化，與溫度、pH、氧氣等環境條件都有關系，D錯誤。
24
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(2024·寧波高二期中)閱讀下列材料，完成第17、18小題。
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選擇題
仙居楊梅除可以直接食用外，還可用于釀酒。智慧的勞動人民利用發酵工程技術(發酵罐如圖)，大規模生產楊梅酒，使仙居楊梅的價值大增。發酵型楊梅酒的工藝流程依次包括挑選楊梅、清洗、打漿、糖酸調整、加入酵母菌、倒罐、發酵、除酸、過濾、澄清、殺菌、陳釀、成品等。
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選擇題
17.下列關于楊梅酒發酵的敘述，正確的是
A.圖中②為楊梅酒出口，通過檢測流出發酵液
　糖的濃度，決定何時終止發酵
B.圖中③為葉輪，可以加快酵母菌的繁殖
C.采用真空發酵技術不能提高果酒發酵速率
D.夏季高溫會促進發酵菌種的繁殖，大量獲得
　發酵產物
√
24
25
圖中①為冷卻水的進口，②為冷卻水的出口，不能通過②檢測流出發酵液糖的濃度，A錯誤；
圖中③為葉輪，葉輪的攪拌不僅能使氣泡與發酵液混合，而且使微生物細胞與發酵液中的營養物質接觸，可以加快酵母菌的繁殖，B正確；
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選擇題
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在無氧條件下，酵母菌能進行厭氧發酵，因此，采用真空發酵技術能提高果酒發酵速率，C錯誤；
酵母菌生長繁殖的適宜溫度范圍是18～30 ℃，夏季高溫不能促進發酵菌種的繁殖，D錯誤。
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選擇題
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18.某同學采用塑料瓶等自制簡易楊梅醋發酵裝置，下列敘述錯誤的是
A.可以采用楊梅酒為原料
B.保持通氣，在發酵液表面會形成菌膜
C.發酵過程中，醋酸菌的生長繁殖和代謝產物的形成都與pH有關
D.吸取發酵液，在顯微鏡下觀察可看到菌落
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選擇題
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醋酸菌在有氧條件下可將乙醇氧化為醋酸，因此可以采用楊梅酒為原料制作楊梅醋，A正確；
菌落是在適宜固體培養基表面或內部形成的一團肉眼可見的、有一定形態構造的子細胞集團，吸取發酵液，在顯微鏡下不能看到菌落，可直接看到微生物，D錯誤。
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選擇題
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19.(2024·浙江七彩陽光聯盟高二期中)發酵工程是重要的生物工程技術，可以為人類提供多樣的生物產品。下列關于發酵工程的敘述，錯誤的是
A.可利用誘變育種或轉基因技術改良菌種
B.菌種活化后須經擴大培養再接種進行發酵
C.發酵不同階段所需控制的條件不同
D.發酵產品均可通過過濾、沉淀獲得
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選擇題
可以從自然界中篩選優良菌種，也可以通過人工誘變或基因工程選育新菌株用于發酵，A正確；
確定菌種后，還要將菌種進行多次擴大培養，以培養出足夠多的菌種，再進行接種，這樣可以縮短菌種在發酵罐中發酵的時間，B正確；
根據菌種不同、發酵時間不同，發酵過程中需要控制的條件不同，C正確；
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選擇題
如果發酵的產品是菌體本身(如酵母菌)，可采用過濾、沉淀等方法從培養液中分離出來，但如果發酵產品是微生物的代謝產物，則可采用真空發酵、吸附發酵、萃取發酵等方法進行提取，D錯誤。
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選擇題
20.(2021·山東，20)含硫蛋白質在某些微生物的作用下產生硫化氫導致生活污水發臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結合形成黑色沉淀。為探究發臭水體中甲、乙菌是否產生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養基上進行培養，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯誤的是
A.乙菌的運動能力比甲菌強
B.為不影響菌的運動需選用液體培養基
C.該實驗不能比較出兩種菌產生硫化氫的量
D.穿刺接種等接種技術的核心是防止雜菌的污染
√
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選擇題
從圖中可以看出，甲菌在試管中分布范圍小于乙
菌，說明乙菌的運動能力比甲菌強，A正確；
為了不影響菌的運動需選用半固體培養基，B錯誤；
該實驗可以根據黑色沉淀的多少初步比較細菌產
生硫化氫的能力，但不能測定產生硫化氫的量，C正確；
微生物接種技術的核心是防止雜菌的污染，D正確。
24
25
非選擇題
21.(2024·杭州高二期末)如表是某公司研發的一種培養大腸桿菌菌群的培養基配方，請根據表格和所學知識回答下列相關問題：
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成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑 瓊脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL (1)若根據用途劃分，該培養基屬于______(填“選擇”或“鑒別”)培養基。若要用上述培養基來篩選出土壤中的尿素分解菌，培養基的營養成分中應將蛋白胨改成______，并用______作為指示劑。
鑒別
尿素
酚紅
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非選擇題
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分析表格可知，該培養基具備碳源、氮源、無機鹽等營養成分，并且該培養基加入了指示劑，因此屬于鑒別培養基。篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，該配方中的蛋白胨需要改成尿素；由于尿素分解菌可以產生脲酶將尿素分解為氨，使培養基pH升高，故培養基中加酚紅指示劑。
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑 瓊脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL 24
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非選擇題
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成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑 瓊脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL (2)在微生物培養的過程中，為防止雜菌污染，需要對培養基和培養皿進行______；操作者的雙手需要進行清洗和______。
滅菌
消毒
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非選擇題
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微生物培養過程中，應注意無菌操作，需要對培養基和培養皿進行滅菌，操作者的雙手需要進行清洗和消毒。
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑 瓊脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL 24
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非選擇題
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(3)圖1和圖2是培養某細菌的結果圖，其對應的接種方法分別是________________和___________，這兩種方法接種后培養基上都可以得到由單個細胞繁殖所形成的________。圖____所用的接種方法可用來對活菌進行計數。
稀釋涂布平板法
平板劃線法
單菌落
1
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25
非選擇題
22.(2024·嘉興高二期末)醬油制作在我國具有悠久的歷史，其中“海鹽沈蕩醬油釀造技藝”被列入嘉興市非物質文化遺產名錄。制作醬油的菌種主要有米曲霉、酵母菌、乳酸菌，基本流程如圖。回答下列問題：
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非選擇題
(1)米曲霉發酵過程中，加入的黃豆和面粉可以為米曲霉提供營養物質，黃豆中為米曲霉生長提供氮源的主要物質是_________。從培養基的成分看，屬于______培養基。米曲霉的代謝類型是_____________。
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蛋白質
天然
異養需氧型
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非選擇題
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黃豆中含有豐富的蛋白質，黃豆中的蛋白質含有N，可為米曲霉的生長提供氮源；從培養基成分來看，該培養基屬于天然培養基；米曲霉發酵過程需要提供營養物質、曬制發酵，說明米曲霉的生長需要消耗有機物質和氧氣，可知其代謝類型是異養需氧型。
24
25
非選擇題
(2)抑制雜菌污染是保證醬油質量的重要因素。在“曬制發酵”過程中，___________________(至少答出2種)等物質可以抑制雜菌生長。
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食鹽、乳酸、乙醇
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非選擇題
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由題目可知，在發酵池中酵母菌產生的乙醇能抑制雜菌的生長，乳酸菌產生的乳酸使發酵液呈酸性，也能抑制雜菌的生長，同時往發酵池中添加的食鹽也能抑制雜菌的生長，故該階段中可以抑制雜菌生長的物質是乙醇、乳酸和食鹽等。
24
25
非選擇題
(3)菌種是影響醬油風味的關鍵因素，米曲霉能分泌蛋白酶、淀粉酶等多種酶類，產生風味獨特的成分。若平板培養基以淀粉為唯一碳源，接種菌液并培養，平板上長出菌落后加入顯色劑，則可篩選出產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是___________________，
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碘－碘化鉀溶液
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非選擇題
該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是__________________________
_______________________________________________。根據__________
______________的大小，可粗略估計出菌株是否產淀粉酶及其產酶能力。若要保存優質菌種，可挑取單菌落，使用__________法接種到斜面培養基上。
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淀粉遇碘－碘化鉀溶液顯藍
色，產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈
透明圈與
菌落直徑比值
平板劃線
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非選擇題
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篩選出產淀粉酶的微生物可加入碘－碘化鉀溶液作顯色劑，因為淀粉遇碘－碘化鉀溶液變藍，產生淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，不顯藍色，會形成透明圈；根據透明圈與菌落直徑比值的大小，可粗略估計出菌株是否產淀粉酶及其產酶能力；若要保存優質菌種，可挑取單菌落，使用平板劃線法接種到斜面培養基上。
24
25
非選擇題
23.啤酒是一種含多種氨基酸、低分子糖等物質的低酒精濃度飲料。回答下列問題：
(1)啤酒釀造過程中起主要作用的微生物是________，下列生物中與該微生物在結構上存在明顯區別的是_______(多選)。
A.噬菌體 B.青霉菌
C.乳酸菌 D.農桿菌
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酵母菌
ACD
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非選擇題
(2)從物理特征看，工業釀酒的培養基屬于______培養基。啤酒釀造以剛萌發的大麥種子(麥芽)為原料，從培養基成分來看，麥芽為微生物生長提供了___________________________________。
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液體
碳源、氮源(水、無機鹽、生長因子)
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非選擇題
(3)啤酒花是桑科葎草屬植物，其雌花序和果穗可用于啤酒釀造，賦予啤酒獨特的香味和苦味等。將適量啤酒花加入過濾后的麥芽汁中，煮沸1小時，目的不僅是使啤酒花中的物質溶出，且能夠__________。啤酒花還具有抑菌作用，為研究啤酒花的抑菌作用，在LB固體培養基中添加不同濃度的啤酒花提取液，經滅菌后制成______，采用______________法接種大腸桿菌后置于恒溫箱中培養24小時，觀察并比較菌落數量及生長情況。
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殺滅雜菌
平板
稀釋涂布平板
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非選擇題
(4)發酵過程中發酵罐內的泡沫先逐漸增多后減少，泡沫減少的主要原因是_________________________________。經測定發酵消耗的糖中，98.5%形成了酒精和其他發酵產物，其余則用于____________________。
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酵母菌細胞呼吸產生二氧化碳減少
酵母菌自身生長和繁殖
(5)啤酒的不同風味由多種因素造成，請列舉兩種因素：______________
________________________________________________________。
不同菌株、不同環境條件、不同原料、不同微生物的相互作用
不同的菌種、
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非選擇題
24.(2024·浙江精誠聯盟高二月考)科學家運用合成生物學方法構建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖)為原料，在實驗室發酵生產PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價值，工藝流程如圖所示。回答下列問題：
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(1)發酵工程一般包括菌種的選育、擴大培養、培養基的配制、______、接種、發酵、產品的____________等方面。
滅菌
分離、提純
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非選擇題
(2)三位同學用稀釋涂布平板法測定某一時間段內嗜鹽單胞菌H的數量，他們的操作及統計結果如下：甲同學涂布了兩個平板，統計的菌落數是236和260，取平均值248；乙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是21、212和256，取平均值163；丙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是209、240和250，取平均
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值233。在三位同學的統計中，____同學的統計是正確的。該方法要經過較長時間的培養，待___________后進行統計。該方法統計出的結果往往偏低，原因是____________________
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丙
菌落數穩定
當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的往往只是一個菌落
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為了保證計數結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板計數，應至少對同一稀釋度下3個平板進行計數，并求平均值，增強實驗的說服力與準確性。在三位同學的統計中，甲同學只涂布了兩個平板，偶然性太大，乙
同學計數的三個平板上，其中一個菌落數過少，且與其余兩個誤差較大，丙同學選擇菌落數在30～300的平板計數，故只有丙同學的統計是正確的。該方法要經過較長時間的培養，待菌落數穩定(保證所有菌株都發育為菌落)后進行統計。
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(3)為獲得對蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可將蔗糖作為液體培養基的__________，并不斷提高其濃度，多代培養選擇。從功能上看，所用培養基為___________。
唯一碳源
選擇培養基
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根據題意分析，該實驗的目的是提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，結合微生物的代謝需求，其液體培養基應該以蔗糖作為唯一碳源，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養可篩選出目標菌株，從功能上看，能進行篩選的培養基是選擇培養基。
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非選擇題
(4)基于菌株H嗜鹽、對酸堿耐受能力強等特性，研究人員設計了一種不需要滅菌的發酵系統，其培養基鹽濃度設為60 g/L、pH為10，菌株H可
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正常持續發酵60 d以上。該系統不需要滅菌，分析原因：一是培養基的鹽濃度設為60 g/L，其他雜菌因_________而死亡；二是pH為10的條件下，其他雜菌的____變性失活，生長繁殖受抑制。
失水過多
酶
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(5)研究人員在工廠進行擴大培養，在適宜的營養物濃度、溫度、pH條件下發酵，結果發現發酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，說明發酵過程中，________________可能是高密度培養的限制因素。
氧氣(或溶解氧)
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分析題意，擴大培養時，在適宜的營養物濃度、溫度、pH等條件下，發酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，說明發酵過程中氧氣不足，使菌種進行厭氧呼吸產生乙醇，即氧氣(或溶解氧)是限制高密度培養的重要因素。
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非選擇題
25.隨著抗生素臨床使用及不合理使用的增加，細菌耐藥性增加，抗生素的療效下降。蛋白質的分泌對于細菌的毒性和生長必不可少，尋找新型抗生素抑制細菌蛋白質的分泌對于治療細菌性疾病有重要的意義。現有一種新型抗生素(抗生素R)，為探究其作用效果，根據以下材料用具，寫出實驗思路，并分析實驗結果。
實驗材料：若干個培養瓶、培養液、無毒細菌M稀釋液、新型抗生素R溶液。(要求與說明：細菌數目和蛋白質的含量可用儀器測定，試劑、儀器、用具及操作不作要求；實驗條件適宜。)
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非選擇題
(1)實驗思路：
①取若干培養瓶編號為甲、乙，每個培養瓶中加入等量的____________
________________；
②______________________________________________；
③甲組培養瓶中加入適量抗生素R溶液，乙組培養瓶加入_____________；
④在適宜條件下培養，每隔一段時間測定細胞數和分泌蛋白含量；
⑤對所得實驗數據進行__________。
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培養液和無
毒細菌M稀釋液
取其中的培養瓶，分別測定細胞數和分泌蛋白含量
等量的培養液
統計分析
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非選擇題
(2)若抗生素R有療效，預測實驗結果(請設計一個坐標系，并繪制預測單位數量的細菌分泌蛋白含量的變化曲線)。
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答案　如圖所示
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非選擇題
(3)實驗所用的培養瓶在使用前進行______處理，以防雜菌污染。細菌耐藥性的性狀是由__________而產生的，抗生素的使用導致耐藥性增強是______(填“人工”或“自然”)選擇的結果。
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