資源簡介

模塊檢測卷(一)
(時間：75分鐘　滿分：100分)　
一、單項(xiàng)選擇題(共14小題，每小題2分，共28分，每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求。)
1.(2024·江蘇淮安階段練習(xí))獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，研究人員對于無菌技術(shù)則圍繞著如何避免雜菌污染展開討論。下列操作中錯誤的是(　　)
倒平板后，對空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可檢測培養(yǎng)基是否被污染
若培養(yǎng)皿蓋和培養(yǎng)皿底之間濺有培養(yǎng)基，則不宜用此培養(yǎng)皿培養(yǎng)大腸桿菌
高壓蒸汽滅菌時的滅菌條件通常是121 ℃，15～30 min
在接種箱或超凈工作臺的使用過程中，可用紫外線照射30 min來進(jìn)行消毒
2.(2024·江蘇泰州一模)某些微生物能合成幾丁質(zhì)酶，使幾丁質(zhì)降解為N－乙酰氨基葡萄糖后進(jìn)一步轉(zhuǎn)化利用。科研人員試圖從土壤中篩選出能高效降解幾丁質(zhì)的菌株，通過微生物培養(yǎng)獲得幾丁質(zhì)酶，用于生物防治。下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
土壤樣品應(yīng)加到以幾丁質(zhì)為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)
目的菌的純化和計數(shù)可以使用平板劃線法或稀釋涂布平板法
可依據(jù)單菌落周圍“水解圈直徑/菌落直徑”的值來篩選目的菌株
獲得的幾丁質(zhì)酶可用于防治某些有害的甲殼類動物、昆蟲等生物
3.(2024·江蘇鎮(zhèn)江開學(xué)考試)鎮(zhèn)江香醋是一種通過固態(tài)發(fā)酵工藝制作的小曲醋，釀造的工業(yè)流程如下圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
冷卻的目的是為酒精發(fā)酵提供適宜的溫度環(huán)境
制醅過程中需添加瓊脂等凝固劑形成固態(tài)發(fā)酵醅基
碳源不足且氧氣充足時，醋酸菌可利用酒精進(jìn)行發(fā)酵
醋酸發(fā)酵中經(jīng)常翻動發(fā)酵物，利于控制發(fā)酵溫度和通氣狀況
4.(2024·江蘇無錫階段練習(xí))發(fā)酵制氫技術(shù)是我國為早日實(shí)現(xiàn)“碳中和”開發(fā)的新能源技術(shù)之一。傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)中，水稻、小麥的秸稈常被焚燒，既產(chǎn)生濃煙污染環(huán)境，又增加了CO2排放，研究團(tuán)隊將秸稈制成發(fā)酵液培養(yǎng)某種細(xì)菌，進(jìn)行發(fā)酵制氫。下列說法錯誤的是(　　)
鑒定該細(xì)菌是否為纖維素分解菌，可在培養(yǎng)基中加入酚紅試劑
水稻、小麥的秸稈中富含纖維素，可為產(chǎn)氫細(xì)菌提供碳源
底物濃度、溫度、pH等是影響發(fā)酵產(chǎn)氫量的重要因素
與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)相比，發(fā)酵制氫技術(shù)既能減少CO2的排放量又能獲得新能源
5.研究人員利用甲、乙兩種二倍體植物的各自優(yōu)勢，通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育兼有兩種植物優(yōu)勢且耐鹽的目的植株，其實(shí)驗(yàn)流程如下圖，a～e表示不同操作。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
通過a操作獲得完整且有活性的原生質(zhì)體，主要利用了纖維素酶和果膠酶的高效性
b操作可使用聚乙二醇促進(jìn)兩種原生質(zhì)體的膜融合，以獲得未分化狀態(tài)的雜種細(xì)胞
d操作所用培養(yǎng)基應(yīng)添加一定濃度的鈉鹽，且生長素與細(xì)胞分裂素用量比值先小于1后大于1
甲、乙植株是兩個不同物種，因此通過該技術(shù)培育出的目的植株會表現(xiàn)出高度不育
6.(2024·江蘇南通階段練習(xí))常規(guī)動物細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞在平面條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)出的單層細(xì)胞不同于人體內(nèi)的組織結(jié)構(gòu)，在藥物研究中具有一定的局限性。三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是在體外為細(xì)胞提供類似體內(nèi)的生長環(huán)境，使細(xì)胞形成立體的三維結(jié)構(gòu)，更有利于藥理學(xué)的研究。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，混合氣體帶CO2的主要作用是刺激細(xì)胞呼吸
定期更換培養(yǎng)液的主要目的是防止培養(yǎng)過程中細(xì)胞被雜菌污染
與常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)相比，三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不存在接觸抑制現(xiàn)象
三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以用于檢測藥物對組織內(nèi)部細(xì)胞的作用
7.(2023·江蘇常州階段練習(xí))將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”，能夠用于殺死人類某些癌細(xì)胞，其過程如圖所示，下列有關(guān)敘述正確的是(　　)
B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的
經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖并能產(chǎn)生所需抗體
①促進(jìn)細(xì)胞融合可利用滅活的病毒，不可以利用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑
抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性
8.(2024·江蘇階段練習(xí))如圖是科學(xué)家培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因試管牛的過程示意圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
1部位的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，將來發(fā)育成胎兒的各種組織
過程①可以用外源促性腺激素處理，使其排出更多的卵子
進(jìn)行過程③時，受體應(yīng)處于適合的生理狀態(tài)，可事先用激素對供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理
為確保得到所需性別的轉(zhuǎn)基因牛，往往對移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定
9.(2024·河南平頂山階段練習(xí))下面表示“DNA粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本流程，相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
①取材→②破碎細(xì)胞→③獲得濾液→④去除雜質(zhì)→⑤進(jìn)一步提純→⑥D(zhuǎn)NA鑒定
本實(shí)驗(yàn)使用了體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇溶液
步驟①中可以使用豬的肝細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料
步驟③中可以使用紗布對研磨液進(jìn)行過濾，并獲取上清液
步驟⑥向試管中加入二苯胺試劑后靜置數(shù)分鐘后即可呈現(xiàn)藍(lán)色
10.當(dāng)目的基因和質(zhì)粒都用HindⅢ處理、連接后，目的基因可能正向插入載體，也可能反向插入載體，為判斷目的基因的插入方向，可使用限制酶處理，并進(jìn)行電泳檢測(如圖)。下列選項(xiàng)中能判斷目的基因插入方向的限制酶是(　　)
注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的識別序列、切割位點(diǎn)均不同，數(shù)字表示相鄰兩個限制酶切點(diǎn)之間的堿基對數(shù)(bp)，質(zhì)粒全長20 000 bp。
HindⅢ EcoRⅠ
BamHⅠ EcoRⅠ和HindⅢ
11.(2024·江蘇一模)“標(biāo)記”是生物技術(shù)與工程常用的技術(shù)手段，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，通過紅綠熒光蛋白標(biāo)記檢測細(xì)胞融合情況
分析工程酵母發(fā)酵產(chǎn)物的合成及分泌時，通過同位素標(biāo)記監(jiān)測產(chǎn)物轉(zhuǎn)移路徑
驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，通過RNA分子標(biāo)記檢測目的基因是否表達(dá)
對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增時，通過熒光標(biāo)記技術(shù)實(shí)時定量測定產(chǎn)物的量
12.(2024·江蘇揚(yáng)州階段練習(xí))釀酒酵母產(chǎn)酒精能力強(qiáng)，但沒有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精發(fā)酵能力弱。科研人員通過兩種途徑如下圖改良酵母菌種，實(shí)現(xiàn)以淀粉為底物高效生產(chǎn)酒精的目的。下列敘述正確的是(　　)
途徑Ⅰ需用纖維素酶處理酵母菌，再利用PEG誘導(dǎo)融合
途徑Ⅱ需要以淀粉酶基因作為目的基因構(gòu)建表達(dá)載體
以淀粉轉(zhuǎn)化為還原糖的效率作為最終鑒定目的菌的指標(biāo)
酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸產(chǎn)物不完全相同，根本原因是酶的種類不同
13.枯草桿菌蛋白酶能催化蛋白質(zhì)水解為氨基酸，在有機(jī)溶劑中也能催化多肽的合成。這些堿性蛋白酶具有重要的應(yīng)用價值，被廣泛應(yīng)用于洗滌劑、制革及絲綢工業(yè)。將枯草桿菌蛋白酶分子的Asp(99)和Glu(156)改成Lys，可使其在pH＝6時的活力提高10倍。下列說法正確的是(　　)
完成氨基酸的替換需要通過改造基因?qū)崿F(xiàn)
該成果體現(xiàn)了蛋白質(zhì)工程在培育新物種方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢
經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶活性提高這一性狀不可遺傳
蛋白質(zhì)工程最終要達(dá)到的目的是獲取編碼蛋白質(zhì)的基因序列信息
14.生物技術(shù)的進(jìn)步在給人類帶來福祉的同時，會引起人們對它安全性的關(guān)注，也會與倫理道德發(fā)生碰撞，帶來新的倫理困惑與挑戰(zhàn)。下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　)
科學(xué)家將玉米的α－淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物中，阻斷淀粉儲藏使花粉失去活性而防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播，達(dá)到防止基因污染的目的
中國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)
生物武器包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，具有致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣的特點(diǎn)
利用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)，解決不孕夫婦的生育問題
二、多項(xiàng)選擇題(共4小題，每小題3分，共12分。每題有不止一個選項(xiàng)符合題意，每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。)
15.(2024·江蘇階段練習(xí))下圖為從土壤中分離、擴(kuò)大培養(yǎng)能分解石油的細(xì)菌的示意圖，有關(guān)分析錯誤的是(　　)
為獲得分解石油的細(xì)菌，配制培養(yǎng)基時，應(yīng)以石油為唯一的碳源
②過程從錐形瓶中吸取1 mL菌液注入試管中，若稀釋10倍，則試管內(nèi)盛有9 mL無菌水
待培養(yǎng)基冷卻至25 ℃左右時進(jìn)行③過程，在酒精燈火焰附近進(jìn)行
④過程純化能分解石油的細(xì)菌，該方法能用于計數(shù)
16.如圖所示為治療性克隆的基本過程，首先取病人的體細(xì)胞核，移植到去核的卵母細(xì)胞中，在早期胚胎形成后，從中分離獲得胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)，對ES細(xì)胞進(jìn)行基因修飾和定向分化處理，將定向分化后的細(xì)胞移植給病人，從而達(dá)到治療疾病的目的。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂
獲得圖中去核的卵母細(xì)胞時，可通過顯微操作去核
圖中形成的器官用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)
治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)
17.紅細(xì)胞生成素(EPO)是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述正確的是(　　)
構(gòu)建表達(dá)載體時需將EPO基因插入乳腺蛋白基因的啟動子的下游
一般情況下，該轉(zhuǎn)基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)
用顯微注射技術(shù)將含EPO基因的表達(dá)載體導(dǎo)入羊的乳腺細(xì)胞中可合成并提取EPO
用PCR擴(kuò)增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列
18.(2024·江蘇鹽城期末)單基因遺傳病可以通過核酸雜交技術(shù)進(jìn)行早期診斷。有一對夫婦均為鐮狀細(xì)胞貧血致病基因的攜帶者，為了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都進(jìn)行產(chǎn)前診斷。下圖為這對夫婦和孩子核酸分子雜交診斷的結(jié)果示意圖。下列相關(guān)敘述正確的有(　　)
與圖中正常基因模板鏈雜交的探針堿基對應(yīng)序列為“5′—AACTCGT－3′”
根據(jù)凝膠電泳帶譜分析，基因純合的是Ⅱ－2
該地區(qū)鐮狀細(xì)胞貧血患病率為1/10 000，若Ⅱ－3與另一正常女子婚配，則生出患病孩子的概率為1/202
若將正常的血紅蛋白基因成功導(dǎo)入患者的骨髓造血干細(xì)胞中，可用于治療該病
三、非選擇題(共4小題，共60分。)
19.(15分)(2024·江蘇南京階段練習(xí))食醋釀造是多種微生物共同作用的過程，主要微生物為霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋發(fā)酵過程分為淀粉糖化、酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵三個階段，期間有不同種類的微生物生長繁殖并產(chǎn)生各種酶類，經(jīng)過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)變化最終形成食醋。
(1)(5分)發(fā)酵原料中的淀粉為微生物提供________(營養(yǎng)物質(zhì))。參與發(fā)酵的多種微生物種間關(guān)系屬于________。
(2)(10分)研究人員對食醋固態(tài)發(fā)酵過程中微生物的生長變化規(guī)律進(jìn)行研究。下圖為醋醅不同層次的酵母菌和醋酸菌數(shù)量變化情況。
①用________________法將菌種接種到添加了碳源、________、無機(jī)鹽、水以及________的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間，獲得單菌落后，挑選菌落數(shù)符合要求的平板進(jìn)行計數(shù)。
②由圖1可知，整個發(fā)酵過程中酵母菌數(shù)量呈現(xiàn)________________________的趨勢，且在不同層次上隨著深度增加而減少。初期，由于________________，上層菌增殖速度高于中層及下層菌。之后，隨著發(fā)酵條件的變化，酵母菌基本停止繁殖而主要進(jìn)行________發(fā)酵。在第7天以后隨發(fā)酵時間延長，酵母菌的數(shù)量呈降低趨勢，原因是_________________________________________________________
______________________________________________________________________。
③圖2顯示，醋酸菌在________天繁殖最快。醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，反應(yīng)簡式為：_________________________________________________________________
______________________________________________________________________。
20.(15分)(2024·江蘇階段練習(xí))電影《我不是藥神》中的格列寧是一種治療癌癥的靶向藥物，此類靶向藥物可稱為“生物導(dǎo)彈”。通常，我們采用動物細(xì)胞融合技術(shù)來制備單克隆抗體，利用單克隆抗體來診斷和治療癌癥可能會成為攻克癌癥的重要手段。
(1)(4分)若單克隆抗體與藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”治療腸癌，則特定抗原通常是____________________。靶向藥物比普通的化療藥物療效高、毒副作用小是因?yàn)開___________________________________________________________________
______________________________________________________________________。
(2)(5分)誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合時需要采用________________、____________________ 或電場誘導(dǎo)融合法等方法誘導(dǎo)，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是______________________________________________________________________
______________________________________________________________________。
(3)(6分)近年來，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)丁酸鈉對雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體有一定的影響，某科研小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示：
丁酸鈉對雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的影響
丁酸鈉的濃度/(mmol·L－1) 時間/h
48 96 144
0 1∶320 1∶640 1∶1 200
0.25 1∶320 1∶1 280 1∶2 500
0.5 1∶160 1∶2 500 1∶2 500
0.75 1∶320 1∶320 1∶640
注：表中1∶x表示抗體效價，x值越高表明越有利于抗體的產(chǎn)生。
①該實(shí)驗(yàn)過程中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)瓶放在了含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CO2的主要作用是________________，該實(shí)驗(yàn)的自變量為_________________________。
②根據(jù)表中數(shù)據(jù)，分析丁酸鈉濃度與單克隆抗體產(chǎn)生量的關(guān)系：______________________________________________________________________
______________________________________________________________________。
21.(15分)與普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖含量高，汁多質(zhì)脆，富含多種維生素，更富有生產(chǎn)應(yīng)用價值。科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示，P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖2所示。回答下列問題：
(1)(6分)在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示。圖1中強(qiáng)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被____________酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用圖1所示的________________酶組合，將含P基因的DNA片段和Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。
(2)(7分)將農(nóng)桿菌液浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)加入________以篩選出成功導(dǎo)入T－DNA的玉米愈傷組織。篩選出的愈傷組織經(jīng)過________過程可形成叢芽，最終獲得多個玉米株系。現(xiàn)對a1、a2、a3、a4四個甜玉米株系的蛋白質(zhì)表達(dá)量進(jìn)行測定，結(jié)果如圖2。其中a4株系P蛋白表達(dá)量較低的原因可能是__________________________________________________________
______________________________________________________________________。
(3)(2分)研究人員發(fā)現(xiàn)了一種RNA剪接抑制劑，該抑制劑會使玉米相關(guān)基因的表達(dá)受阻。針對該抑制劑的具體作用，科研人員提出以下假說：
假說1：該抑制劑導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子1的對應(yīng)序列不能被剪。
假說2：該抑制劑導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子1和外顯子2的對應(yīng)序列同時被剪切。
為了驗(yàn)證上述假說，需分別從實(shí)驗(yàn)組和對照組胚細(xì)胞中提取RNA，經(jīng)過________過程形成cDNA，然后對cDNA進(jìn)行PCR后，再分析電泳后的條帶。若要證明假說2成立，需要選擇圖3中所示的引物________(填數(shù)字)進(jìn)行PCR。
22.(15分)(2024·江蘇揚(yáng)州階段練習(xí))稻米的直鏈淀粉是由蠟質(zhì)基因(waxy)控制合成的淀粉合成酶(GBSS)催化形成，直鏈淀粉含量高的米飯質(zhì)地和適口性不高。將waxy反義基因片段導(dǎo)入水稻細(xì)胞抑制內(nèi)源基因表達(dá)，可降低直鏈淀粉含量。為防止同時導(dǎo)入的標(biāo)記基因影響，科研人員構(gòu)建了2種載體，通過共轉(zhuǎn)化以期獲得含有目的基因、不含標(biāo)記基因和報告基因(gus)的轉(zhuǎn)基因水稻，相關(guān)流程如下圖。請回答下列問題。
(1)(6分)waxy反義基因片段導(dǎo)入水稻細(xì)胞后可抑制內(nèi)源基因表達(dá)，原因是________________________________。為構(gòu)建反義基因與gus的融合基因，在利用PCR技術(shù)獲取反義基因與gus過程中，需要在設(shè)計的兩對引物________端分別添加限制酶____________、____________的識別序列。
(2)(1分)過程③中將農(nóng)桿菌1、2按照1∶9比例充分混勻感染水稻愈傷組織，3天后轉(zhuǎn)入含有__________的選擇培養(yǎng)基篩選抗性愈傷組織。
(3)(4分)提取T0代植株的基因組DNA，根據(jù)反義基因和gus基因部分序列設(shè)計引物進(jìn)行PCR1檢測，同時根據(jù)反義基因和終止子的部分序列設(shè)計引物進(jìn)行PCR2檢測，結(jié)果如下圖，其中M為標(biāo)準(zhǔn)參照，1為陽性對照，2為陰性對照，3～8號為抗性植株DNA的PCR產(chǎn)物。其中2是根據(jù)____________的DNA為模板進(jìn)行PCR的結(jié)果，據(jù)圖可以確定________號植株為共轉(zhuǎn)化失敗的水稻。
(4)(4分)過程⑤將共轉(zhuǎn)化成功的T0代植株進(jìn)行自交，收獲種子，取半粒種子進(jìn)行GUS檢測(gus的表達(dá)產(chǎn)物能使白色X－Gluc水解生成藍(lán)色產(chǎn)物)。選擇檢測結(jié)果為________色的種子種植得到T1代植株。最終還需檢測____________________，才可判斷是否改良成功。
模塊檢測卷(一)
1.D　[接種箱或超凈工作臺在使用前，可用紫外線照射30 min來進(jìn)行消毒，D錯誤。]
2.B　[目的菌的純化和計數(shù)可以使用稀釋涂布平板法，平板劃線法只能用于目的菌的純化，不能計數(shù)，B錯誤。]
3.D　[根據(jù)圖示，將糯米蒸熟后冷卻是為了降低溫度，防止殺死酒曲中的酵母菌，A錯誤；根據(jù)圖示，制醅過程中需添加麩皮和糠以形成固態(tài)發(fā)酵醅基，B錯誤；當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成乙酸；當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)橐宜幔珻錯誤。]
4.A　[剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌降解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，因此鑒定該細(xì)菌是否為纖維素分解菌，可在培養(yǎng)基中加入剛果紅試劑，A錯誤。]
5.C　[植物細(xì)胞的細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，利用纖維素酶和果膠酶專一性獲得完整且有活性的原生質(zhì)體，A錯誤；b操作可使用聚乙二醇促進(jìn)兩種原生質(zhì)體的膜融合，獲得的是已分化的雜種細(xì)胞，B錯誤；甲、乙植株是兩個不同物種，目的植株含有甲、乙的全部染色體，可正常進(jìn)行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子產(chǎn)生后代，D錯誤。]
6.D　[細(xì)胞培養(yǎng)過程中，混合氣體帶CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，A錯誤；定期更換培養(yǎng)液是因?yàn)榇x產(chǎn)物積累過多會危害動物細(xì)胞持續(xù)生長和存活，B錯誤；在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到一定程度時，會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，與常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)相比，三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也存在接觸抑制現(xiàn)象，C錯誤。]
7.D　[B淋巴細(xì)胞是從小鼠的脾臟中提取的，骨髓瘤細(xì)胞是體內(nèi)細(xì)胞的惡性克隆性增生形成的，A錯誤；經(jīng)①誘導(dǎo)融合過程形成的細(xì)胞不都是能無限增殖并產(chǎn)生相應(yīng)抗體的細(xì)胞，還需要經(jīng)過兩次篩選才能獲得無限增殖并產(chǎn)生相應(yīng)抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯誤；①促進(jìn)動物細(xì)胞融合可利用滅活的病毒，也可以利用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑， C錯誤。]
8.A　[1部位的細(xì)胞表示透明帶，不具有發(fā)育的全能性，3表示內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，A錯誤。]
9.D　[步驟⑥中DNA鑒定時向試管中加入二苯胺試劑后，沸水浴加熱數(shù)分鐘，溶液出現(xiàn)藍(lán)色，D錯誤。]
10.B　[據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶HindⅢ處理，并進(jìn)行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：5 000＋4 000＝9 000(bp)和1 000＋2 000＋5 000＋3 000＝11 000(bp)，因此用該限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，A錯誤；據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶EcoRⅠ處理，并進(jìn)行電泳后，正向插入的質(zhì)粒會出現(xiàn)的DNA片段為：1 000＋2 000＋5 000＝8 000(bp)和5 000＋4 000＋3 000＝1 2000(bp)，而反向插入的質(zhì)粒切割后會出現(xiàn)的DNA片段為：1 000＋2 000＋4 000＝7 000(bp)和5 000＋3 000＋5 000＝13 000(bp)，因此正向插入和反向插入用限制酶EcoRⅠ處理電泳后得到的DNA片段大小不同，可以判斷目的基因的插入方向，B正確；據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶BamHⅠ處理，并進(jìn)行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：5 000＋1 000＝6 000(bp)和4 000＋2 000＋5 000＋3 000＝14 000(bp)，因此用該限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，C錯誤；據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ共同處理，并進(jìn)行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：2 000＋1 000＝3 000(bp)、5 000 bp、4 000 bp、5 000＋3 000＝8 000(bp)，因此用EcoRⅠ和HindⅢ限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，D錯誤。]
11.C　[驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，應(yīng)該通過接種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，即為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉接種相應(yīng)的害蟲，檢測抗蟲棉是否表現(xiàn)出抗蟲特性，C錯誤。]
12.B　[途徑Ⅰ需用幾丁質(zhì)酶處理酵母菌去除其細(xì)胞壁，再利用PEG誘導(dǎo)融合，A錯誤；通過兩種途徑改良酵母菌種，實(shí)現(xiàn)以淀粉為底物高效生產(chǎn)酒精的目的，所以淀粉轉(zhuǎn)化為酒精的效率作為最終鑒定目的菌的指標(biāo)，C錯誤；酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸產(chǎn)物不完全相同，直接原因是酶的種類不同，D錯誤。]
13.A　[該成果培育了新品種，而不是新物種，B錯誤；經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶的基因發(fā)生了改變，因此經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶活性提高這一性狀可以遺傳，C錯誤；蛋白質(zhì)工程是在深入了解蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，雖然合成了改造的基因，但它最終要達(dá)到的目的是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)，滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要，D錯誤。]
14.D　[生物武器有多種類型，包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等；生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣，因而會給人類的生存安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅，C正確；人類利用試管嬰兒技術(shù)解決不孕夫婦的生育問題，D錯誤。]
15.CD　[②過程從錐形瓶中吸取1 mL菌液注入試管中，若稀釋10倍，則試管內(nèi)盛有10－1＝9(mL)無菌水，B正確；25 ℃左右時培養(yǎng)基會凝固，應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進(jìn)行③過程，在酒精燈火焰附近倒平板，C錯誤；根據(jù)圖中菌落的分布情況可知，④過程通過平板劃線法純化能分解石油的細(xì)菌，該方法不能用于計數(shù)，D錯誤。]
16.ABC　[卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂時停止在減數(shù)第二次分裂，因此接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂，A正確；顯微鏡下可以通過顯微操作去核，B正確；圖中形成的器官來源于病人的細(xì)胞，用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，C正確；治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)，沒有采用胚胎移植技術(shù)，D錯誤。]
17.ABD　[啟動子是位于目的基因上游的一段DNA序列，也是RNA聚合酶識別、結(jié)合的部位。RNA聚合酶與啟動子的結(jié)合能驅(qū)動基因開始轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而合成出相應(yīng)的mRNA，故構(gòu)建表達(dá)載體時需將EPO基因(目的基因)插入乳腺蛋白基因的啟動子的下游，A正確；某科研團(tuán)隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO，所以一般情況下，該轉(zhuǎn)基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B正確；用顯微注射技術(shù)將含EPO基因的表達(dá)載體導(dǎo)入羊的受精卵(將來發(fā)育成雌性個體)中，待其發(fā)育到一定階段，方可合成EPO，C錯誤；用PCR擴(kuò)增人EPO基因，前提是需要一段已知的EPO基因核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計引物，D正確。]
18.ACD　[據(jù)圖可知，正常基因模板鏈的核酸序列為5′－ACGAGTT－3′，按照堿基互補(bǔ)配對的原則，則與圖中正常基因模板鏈雜交的探針堿基對應(yīng)序列為“5′—AACTCGT－3′”，A正確；圖中夫婦的基因型均為Bb，根據(jù)凝膠電泳帶譜分析，基因純合的是Ⅱ－2和Ⅱ－1，他們的基因型依次為bb和BB，B錯誤；該地區(qū)鐮狀細(xì)胞貧血患病率為1/10 000，說明該地區(qū)人群中b的基因頻率為1/100，則B的基因頻率為99/100，則正常人群中攜帶者的概率為2×1/100×99/100÷(1－1/10 000)＝2/101，結(jié)合圖示可知，Ⅱ－3 的基因型為Bb，若其與正常女子(Bb或BB)婚配，則生出患病孩子的概率為2/101×1/4＝1/202，C正確；鐮狀細(xì)胞貧血是由基因突變導(dǎo)致的，屬于遺傳病，將正常血紅蛋白基因?qū)牖颊叩墓撬柙煅杉?xì)胞中則可產(chǎn)生正常的紅細(xì)胞，進(jìn)而可達(dá)到治療目的，D正確。]
19.(1)碳源　競爭　(2)①稀釋涂布平板　氮源　瓊脂　②先快速升高后緩慢降低　溶解氧的存在　酒精　酒精的增多以及酸的產(chǎn)生不適宜酵母菌的生長繁殖(營養(yǎng)物質(zhì)減少及有害代謝產(chǎn)物的積累)
③1～3　C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量
20.(1)腸癌細(xì)胞(質(zhì)膜)表面的蛋白質(zhì)　單克隆抗體可特異性的結(jié)合癌細(xì)胞，不損傷正常細(xì)胞　(2)滅活病毒誘導(dǎo)法　聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合法　既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體　(3)①維持培養(yǎng)液的pH　丁酸鈉的濃度和培養(yǎng)時間　②在一定濃度范圍內(nèi)，丁酸鈉濃度越高，單克隆抗體產(chǎn)生越多，超過一定濃度，丁酸鈉會抑制單克隆抗體的產(chǎn)生
21.(1)RNA聚合　BamHⅠ和SacⅠ　(2)潮霉素　再分化　a4株系玉米中可能沒有導(dǎo)入目的基因(或目的基因未表達(dá))　(3)逆轉(zhuǎn)錄　3和4
22.(1)反義基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA可與內(nèi)源基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA結(jié)合，抑制翻譯　5′　SalⅠ和BamHⅢ　BamHⅢ和HindⅢ　(2)潮霉素　(3)非轉(zhuǎn)基因水稻　5、6　(4)白　稻米中直鏈淀粉的含量(共65張PPT)
模塊檢測卷(一)
(時間：75分鐘　滿分：100分)
D
一、單項(xiàng)選擇題(共14小題，每小題2分，共28分，每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求。)
1.(2024·江蘇淮安階段練習(xí))獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，研究人員對于無菌技術(shù)則圍繞著如何避免雜菌污染展開討論。下列操作中錯誤的是(　　)
A.倒平板后，對空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可檢測培養(yǎng)基是否被污染
B.若培養(yǎng)皿蓋和培養(yǎng)皿底之間濺有培養(yǎng)基，則不宜用此培養(yǎng)皿培養(yǎng)大腸桿菌
C.高壓蒸汽滅菌時的滅菌條件通常是121 ℃，15～30 min
D.在接種箱或超凈工作臺的使用過程中，可用紫外線照射30 min來進(jìn)行消毒
解析：實(shí)驗(yàn)室中檢測培養(yǎng)基是否被污染，一般在倒平板后，對空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，A正確；
空氣中的微生物可能在皿蓋和皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此若培養(yǎng)皿蓋和皿底之間濺有培養(yǎng)基，則不宜用此培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，B正確；
高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121 ℃的條件下，維持15～30 min，C正確；
接種箱或超凈工作臺在使用前，可用紫外線照射30 min來進(jìn)行消毒，D錯誤。
2.(2024·江蘇泰州一模)某些微生物能合成幾丁質(zhì)酶，使幾丁質(zhì)降解為N－乙酰氨基葡萄糖后進(jìn)一步轉(zhuǎn)化利用。科研人員試圖從土壤中篩選出能高效降解幾丁質(zhì)的菌株，通過微生物培養(yǎng)獲得幾丁質(zhì)酶，用于生物防治。下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
A.土壤樣品應(yīng)加到以幾丁質(zhì)為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)
B.目的菌的純化和計數(shù)可以使用平板劃線法或稀釋涂布平板法
C.可依據(jù)單菌落周圍“水解圈直徑/菌落直徑”的值來篩選目的菌株
D.獲得的幾丁質(zhì)酶可用于防治某些有害的甲殼類動物、昆蟲等生物
B
解析：據(jù)題意可知，要從土壤中篩選出能高效降解幾丁質(zhì)的菌株，那么應(yīng)該用以幾丁質(zhì)為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，A正確；
目的菌的純化和計數(shù)可以使用稀釋涂布平板法，平板劃線法只能用于目的菌的純化，不能計數(shù)，B錯誤；
“水解圈直徑/菌落直徑”可以反應(yīng)降解幾丁質(zhì)能力的大小，“水解圈直徑/菌落直徑”越大，說明該菌降解幾丁質(zhì)能力越強(qiáng)，反之越弱，因此可依據(jù)單菌落周圍“水解圈直徑/菌落直徑”的值來篩選目的菌株，C正確；
幾丁質(zhì)廣泛存在于甲殼類動物的外殼、昆蟲的外骨骼和真菌的細(xì)胞壁中，因此獲得的幾丁質(zhì)酶可用于防治某些有害的甲殼類動物、昆蟲等生物，D正確。
3.(2024·江蘇鎮(zhèn)江開學(xué)考試)鎮(zhèn)江香醋是一種通過固態(tài)發(fā)酵工藝制作的小曲醋，釀造的工業(yè)流程如下圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
A.冷卻的目的是為酒精發(fā)酵提供適宜的溫度環(huán)境
B.制醅過程中需添加瓊脂等凝固劑形成固態(tài)發(fā)酵醅基
C.碳源不足且氧氣充足時，醋酸菌可利用酒精進(jìn)行發(fā)酵
D.醋酸發(fā)酵中經(jīng)常翻動發(fā)酵物，利于控制發(fā)酵溫度和通氣狀況
D
解析：根據(jù)圖示，將糯米蒸熟后冷卻是為了降低溫度，防止殺死酒曲中的酵母菌，A錯誤；
根據(jù)圖示，制醅過程中需添加麩皮和糠以形成固態(tài)發(fā)酵醅基，B錯誤；
當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成乙酸；當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)橐宜幔珻錯誤；
醋酸菌為好氧細(xì)菌，發(fā)酵過程中經(jīng)常翻動發(fā)酵物，利于控制發(fā)酵溫度和通氣狀況，D正確。
4.(2024·江蘇無錫階段練習(xí))發(fā)酵制氫技術(shù)是我國為早日實(shí)現(xiàn)“碳中和”開發(fā)的新能源技術(shù)之一。傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)中，水稻、小麥的秸稈常被焚燒，既產(chǎn)生濃煙污染環(huán)境，又增加了CO2排放，研究團(tuán)隊將秸稈制成發(fā)酵液培養(yǎng)某種細(xì)菌，進(jìn)行發(fā)酵制氫。下列說法錯誤的是(　　)
A.鑒定該細(xì)菌是否為纖維素分解菌，可在培養(yǎng)基中加入酚紅試劑
B.水稻、小麥的秸稈中富含纖維素，可為產(chǎn)氫細(xì)菌提供碳源
C.底物濃度、溫度、pH等是影響發(fā)酵產(chǎn)氫量的重要因素
D.與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)相比，發(fā)酵制氫技術(shù)既能減少CO2的排放量又能獲得新能源
A
解析：剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌降解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，因此鑒定該細(xì)菌是否為纖維素分解菌，可在培養(yǎng)基中加入剛果紅試劑，A錯誤；
纖維素的組成元素為C、H、O，可以為產(chǎn)氫細(xì)菌提供碳源，B正確；
溫度、pH會影響酶活性，底物作為發(fā)酵的原料，因此底物濃度、溫度、pH等是影響發(fā)酵產(chǎn)氫量的重要因素，C正確；
與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)相比，發(fā)酵制氫技術(shù)通過將秸稈中的含碳有機(jī)物轉(zhuǎn)換成有機(jī)酸等工業(yè)原料，減少了CO2的排放量，又獲得了氫這種新能源，D正確。
5.研究人員利用甲、乙兩種二倍體植物的各自優(yōu)勢，通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育兼有兩種植物優(yōu)勢且耐鹽的目的植株，其實(shí)驗(yàn)流程如下圖，a～e表示不同操作。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
A.通過a操作獲得完整且有活性的
原生質(zhì)體，主要利用了纖維素酶
和果膠酶的高效性
B.b操作可使用聚乙二醇促進(jìn)兩種原生質(zhì)體的膜融合，以獲得未分化狀態(tài)的雜種細(xì)胞
C.d操作所用培養(yǎng)基應(yīng)添加一定濃度的鈉鹽，且生長素與細(xì)胞分裂素用量比值先小于1后大于1
D.甲、乙植株是兩個不同物種，因此通過該技術(shù)培育出的目的植株會表現(xiàn)出高度不育
C
解析：植物細(xì)胞的細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，利用纖維素酶和果膠酶專一性獲得完整且有活性的原生質(zhì)體，A錯誤；
b操作可使用聚乙二醇促進(jìn)兩種原生質(zhì)體的膜融合，獲得的是已分化的雜種細(xì)胞，B錯誤；
通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育兼有兩種植物優(yōu)勢且耐鹽的目的植株，d為再分化，所用培養(yǎng)基應(yīng)添加一定濃度的鈉鹽，且生長素與細(xì)胞分裂素用量比值先小于1(促進(jìn)芽的分化)后大于1(促進(jìn)根的分化)，C正確；
甲、乙植株是兩個不同物種，目的植株含有甲、乙的全部染色體，可正常進(jìn)行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子產(chǎn)生后代，D錯誤。
A.通過a操作獲得完整且有活性的原生質(zhì)體，主要利用了纖維素酶和果膠酶的高效性
B.b操作可使用聚乙二醇促進(jìn)兩種原生質(zhì)體的膜融合，以獲得未分化狀態(tài)的雜種細(xì)胞
C.d操作所用培養(yǎng)基應(yīng)添加一定濃度的鈉鹽，且生長素與細(xì)胞分裂素用量比值先小于1后大于1
D.甲、乙植株是兩個不同物種，因此通過該技術(shù)培育出的目的植株會表現(xiàn)出高度不育
6.(2024·江蘇南通階段練習(xí))常規(guī)動物細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞在平面條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)出的單層細(xì)胞不同于人體內(nèi)的組織結(jié)構(gòu)，在藥物研究中具有一定的局限性。三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是在體外為細(xì)胞提供類似體內(nèi)的生長環(huán)境，使細(xì)胞形成立體的三維結(jié)構(gòu)，更有利于藥理學(xué)的研究。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
A.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，混合氣體帶CO2的主要作用是刺激細(xì)胞呼吸
B.定期更換培養(yǎng)液的主要目的是防止培養(yǎng)過程中細(xì)胞被雜菌污染
C.與常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)相比，三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不存在接觸抑制現(xiàn)象
D.三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以用于檢測藥物對組織內(nèi)部細(xì)胞的作用
D
解析：細(xì)胞培養(yǎng)過程中，混合氣體帶CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，A錯誤；
定期更換培養(yǎng)液是因?yàn)榇x產(chǎn)物積累過多會危害動物細(xì)胞持續(xù)生長和存活，B錯誤；
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到一定程度時，會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，與常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)相比，三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也存在接觸抑制現(xiàn)象，C錯誤；
三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是在體外為細(xì)胞提供類似體內(nèi)的生長環(huán)境，使細(xì)胞形成立體的三維結(jié)構(gòu)，可以用于檢測藥物對組織內(nèi)部細(xì)胞的作用，D正確。
7.(2023·江蘇常州階段練習(xí))將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”，能夠用于殺死人類某些癌細(xì)胞，其過程如圖所示，下列有關(guān)敘述正確的是(　　)
A.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤
細(xì)胞均是從小鼠的脾臟
中提取的
B.經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖并能產(chǎn)生所需抗體
C.①促進(jìn)細(xì)胞融合可利用滅活的病毒，不可以利用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑
D.抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性
D
解析：B淋巴細(xì)胞是從小鼠的脾臟中提取的，骨髓瘤細(xì)胞是體內(nèi)細(xì)胞的惡性克隆性增生形成的，A錯誤；
經(jīng)①誘導(dǎo)融合過程形成的細(xì)胞不都是能無限增殖并產(chǎn)生相應(yīng)抗體的細(xì)胞，還需要經(jīng)過兩次篩選才能獲得無限增殖并產(chǎn)生相應(yīng)抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯誤；
①促進(jìn)動物細(xì)胞融合可利用滅活的病毒，也可以利用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，C錯誤；
過程③中由于單克隆抗體具有高度特異性，使其靶向作用非常準(zhǔn)確，D正確。
A.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的
B.經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖并能產(chǎn)生所需抗體
C.①促進(jìn)細(xì)胞融合可利用滅活的病毒，不可以利用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑
D.抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性
8.(2024·江蘇階段練習(xí))如圖是科學(xué)家培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因試管牛的過程示意圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
A.1部位的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，
將來發(fā)育成胎兒的各種組織
B.過程①可以用外源促性腺激素處
理，使其排出更多的卵子
C.進(jìn)行過程③時，受體應(yīng)處于適合
的生理狀態(tài)，可事先用激素對供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理
D.為確保得到所需性別的轉(zhuǎn)基因牛，往往對移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定
A
解析：1部位的細(xì)胞表示透明帶，不具有發(fā)育的全能性，3表示內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，A錯誤；
過程①可以用外源促性腺激素處理，使雌性個體超數(shù)排卵，B正確；
進(jìn)行過程③(胚胎移植)時，受體應(yīng)處于適合的生理狀態(tài)，可事先用雌激素對供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，提高胚胎移植的成功率，C正確；
為確保得到所需性別的轉(zhuǎn)基因牛，往往對移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定，即取2部位(滋養(yǎng)層)的細(xì)胞做DNA檢測來鑒定性別，D正確。
A.1部位的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，將來發(fā)育成胎兒的各種組織
B.過程①可以用外源促性腺激素處理，使其排出更多的卵子
C.進(jìn)行過程③時，受體應(yīng)處于適合的生理狀態(tài)，可事先用激素對供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理
D.為確保得到所需性別的轉(zhuǎn)基因牛，往往對移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定
9.(2024·河南平頂山階段練習(xí))下面表示“DNA粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本流程，相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
①取材→②破碎細(xì)胞→③獲得濾液→④去除雜質(zhì)→⑤進(jìn)一步提純→⑥D(zhuǎn)NA鑒定
A.本實(shí)驗(yàn)使用了體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇溶液
B.步驟①中可以使用豬的肝細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料
C.步驟③中可以使用紗布對研磨液進(jìn)行過濾，并獲取上清液
D.步驟⑥向試管中加入二苯胺試劑后靜置數(shù)分鐘后即可呈現(xiàn)藍(lán)色
D
解析：本實(shí)驗(yàn)使用了體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇溶液，目的是析出含雜質(zhì)較少的DNA，A正確；
肝細(xì)胞含有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器，步驟①中可以使用豬的肝細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，B正確；
步驟③中可以使用紗布對研磨液進(jìn)行過濾，并獲取上清液，上清液中含有DNA，C正確；
步驟⑥中DNA鑒定時向試管中加入二苯胺試劑后，沸水浴加熱數(shù)分鐘，溶液出現(xiàn)藍(lán)色，D錯誤。
10.當(dāng)目的基因和質(zhì)粒都用HindⅢ處理、連接后，目的基因可能正向插入載體，也可能反向插入載體，為判斷目的基因的插入方向，可使用限制酶處理，并進(jìn)行電泳檢測(如圖)。下列選項(xiàng)中能判斷目的基因插入方向的限制酶是(　　)
B
注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的識別序列、切割位點(diǎn)均不同，數(shù)字表示相鄰兩個限制酶切點(diǎn)之間的堿基對數(shù)(bp)，質(zhì)粒全長20 000 bp。
A.HindⅢ B.EcoRⅠ C.BamHⅠ D.EcoRⅠ和HindⅢ
解析：據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶HindⅢ處理，并進(jìn)行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：5 000＋4 000＝9 000(bp)和1 000＋
2 000＋5 000＋3 000＝11 000(bp)，因此用該限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，A錯誤；
據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶EcoRⅠ處理，并進(jìn)行電泳后，正向插入的質(zhì)粒會出現(xiàn)的DNA片段為：
1 000＋2 000＋5 000＝8 000(bp)和5 000＋4 000＋3 000＝1 2000(bp)，而反向插入的質(zhì)粒切割后會出現(xiàn)的DNA片段為：1 000＋2 000＋4 000＝7 000(bp)和5 000＋3 000＋5 000＝13 000(bp)，因此正向插入和反向插入用限制酶EcoRⅠ處理電泳后得到的DNA片段大小不同，可以判斷目的基因的插入方向，B正確；
注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的識別序列、切割位點(diǎn)均不同，數(shù)字表示相鄰兩個限制酶切點(diǎn)之間的堿基對數(shù)(bp)，質(zhì)粒全長20 000 bp。
A.HindⅢ
B.EcoRⅠ
C.BamHⅠ
D.EcoRⅠ和HindⅢ
據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶BamHⅠ處理，并進(jìn)行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：5 000＋1 000＝6 000(bp)和4 000＋2 000＋5 000＋3 000＝14 000(bp)，因此用該限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，C錯誤；
據(jù)圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ共同處理，并進(jìn)行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：2 000＋1 000＝3 000(bp)、5 000 bp、4 000 bp、5 000＋3 000＝8 000(bp)，因此用EcoRⅠ和HindⅢ限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，D錯誤。
注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的識別序列、切割位點(diǎn)均不同，數(shù)字表示相鄰兩個限制酶切點(diǎn)之間的堿基對數(shù)(bp)，質(zhì)粒全長20 000 bp。
A.HindⅢ
B.EcoRⅠ
C.BamHⅠ
D.EcoRⅠ和HindⅢ
11.(2024·江蘇一模)“標(biāo)記”是生物技術(shù)與工程常用的技術(shù)手段，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)
A.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，通過紅綠熒光蛋白標(biāo)記檢測細(xì)胞融合情況
B.分析工程酵母發(fā)酵產(chǎn)物的合成及分泌時，通過同位素標(biāo)記監(jiān)測產(chǎn)物轉(zhuǎn)移路徑
C.驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，通過RNA分子標(biāo)記檢測目的基因是否表達(dá)
D.對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增時，通過熒光標(biāo)記技術(shù)實(shí)時定量測定產(chǎn)物的量
C
解析：誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，利用紅綠熒光標(biāo)記蛋白，通過紅綠熒光蛋白標(biāo)記混合情況檢測細(xì)胞融合情況，A正確；
利用同位素標(biāo)記法可以監(jiān)測工程酵母發(fā)酵產(chǎn)物的合成及分泌時產(chǎn)物轉(zhuǎn)移路徑，B正確；
驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，應(yīng)該通過接種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，即為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉接種相應(yīng)的害蟲，檢測抗蟲棉是否表現(xiàn)出抗蟲特性，C錯誤；
對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增時，可通過熒光標(biāo)記技術(shù)，利用熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)制成探針，實(shí)時定量測定產(chǎn)物的量，D正確。
12.(2024·江蘇揚(yáng)州階段練習(xí))釀酒酵母產(chǎn)酒精能力強(qiáng)，但沒有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精發(fā)酵能力弱。科研人員通過兩種途徑如下圖改良酵母菌種，實(shí)現(xiàn)以淀粉為底物高效生產(chǎn)酒精的目的。下列敘述正確的是(　　)
A.途徑Ⅰ需用纖維素酶處理酵母菌，
再利用PEG誘導(dǎo)融合
B.途徑Ⅱ需要以淀粉酶基因作為目
的基因構(gòu)建表達(dá)載體
C.以淀粉轉(zhuǎn)化為還原糖的效率作為最終鑒定目的菌的指標(biāo)
D.酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸產(chǎn)物不完全相同，根本原因是酶的種類不同
B
解析：途徑Ⅰ需用幾丁質(zhì)酶處理酵母菌去除其細(xì)胞壁，再利用PEG誘導(dǎo)融合，A錯誤；
途徑Ⅱ是將糖化酵母的淀粉酶基因提取出來作為目的基因，通過構(gòu)建基因表達(dá)載體導(dǎo)入釀酒酵母細(xì)胞中，從而獲得目的酵母菌，B正確；
通過兩種途徑改良酵母菌種，實(shí)現(xiàn)以淀粉為底物高效生產(chǎn)酒精的目的，所以淀粉轉(zhuǎn)化為酒精的效率作為最終鑒定目的菌的指標(biāo)，C錯誤；
酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸產(chǎn)物不完全相同，直接原因是酶的種類不同，D錯誤。
13.枯草桿菌蛋白酶能催化蛋白質(zhì)水解為氨基酸，在有機(jī)溶劑中也能催化多肽的合成。這些堿性蛋白酶具有重要的應(yīng)用價值，被廣泛應(yīng)用于洗滌劑、制革及絲綢工業(yè)。將枯草桿菌蛋白酶分子的Asp(99)和Glu(156)改成Lys，可使其在pH＝6時的活力提高10倍。下列說法正確的是(　　)
A.完成氨基酸的替換需要通過改造基因?qū)崿F(xiàn)
B.該成果體現(xiàn)了蛋白質(zhì)工程在培育新物種方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢
C.經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶活性提高這一性狀不可遺傳
D.蛋白質(zhì)工程最終要達(dá)到的目的是獲取編碼蛋白質(zhì)的基因序列信息
A
解析：氨基酸的排列順序是由基因決定的，因此完成氨基酸的替換需要通過改造基因?qū)崿F(xiàn)，A正確；
該成果培育了新品種，而不是新物種，B錯誤；
經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶的基因發(fā)生了改變，因此經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶活性提高這一性狀可以遺傳，C錯誤；
蛋白質(zhì)工程是在深入了解蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，雖然合成了改造的基因，但它最終要達(dá)到的目的是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)，滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要，D錯誤。
14.生物技術(shù)的進(jìn)步在給人類帶來福祉的同時，會引起人們對它安全性的關(guān)注，也會與倫理道德發(fā)生碰撞，帶來新的倫理困惑與挑戰(zhàn)。下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　)
A.科學(xué)家將玉米的α－淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物中，阻斷淀粉儲藏使花粉失去活性而防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播，達(dá)到防止基因污染的目的
B.中國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)
C.生物武器包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，具有致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣的特點(diǎn)
D.利用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)，解決不孕夫婦的生育問題
D
解析：在轉(zhuǎn)基因研究工作中，科學(xué)家會采取很多方法防止基因污染。例如，我國科學(xué)家將來自玉米的α－淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物中，由于α－淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏使花粉失去活性，因而可以防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播，達(dá)到防止基因污染的目的，A正確；
中國政府禁止生殖性克隆研究，堅持四不原則(不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn))，不反對治療性克隆研究，B正確；
生物武器有多種類型，包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等；生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣，因而會給人類的生存安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅，C正確；
人類利用試管嬰兒技術(shù)解決不孕夫婦的生育問題，D錯誤。
二、多項(xiàng)選擇題(共4小題，每小題3分，共12分。每題有不止一個選項(xiàng)符合題意，每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。)
15.(2024·江蘇階段練習(xí))下圖為從土壤中分離、擴(kuò)大培養(yǎng)能分解石油的細(xì)菌的示意圖，有關(guān)分析錯誤的是(　　)
A.為獲得分解石油的細(xì)菌，配制培
養(yǎng)基時，應(yīng)以石油為唯一的碳源
B.②過程從錐形瓶中吸取1 mL菌
液注入試管中，若稀釋10倍，則試管內(nèi)盛有9 mL無菌水
C.待培養(yǎng)基冷卻至25 ℃左右時進(jìn)行③過程，在酒精燈火焰附近進(jìn)行
D.④過程純化能分解石油的細(xì)菌，該方法能用于計數(shù)
CD
解析：為獲得分解石油的細(xì)菌，故配制培養(yǎng)基時應(yīng)以石油為唯一的碳源，這樣分解石油的細(xì)菌能在該培養(yǎng)基上生長得很好，其他微生物的生長則受到抑制，A正確；
②過程從錐形瓶中吸取1 mL菌液注入試管中，若稀釋10倍，則試管內(nèi)盛有10－1＝9(mL)無菌水，B正確；
25 ℃左右時培養(yǎng)基會凝固，應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進(jìn)行③過程，在酒精燈火焰附近倒平板，C錯誤；
根據(jù)圖中菌落的分布情況可知，④過程通過平板劃線法純化能分解石油的細(xì)菌，該方法不能用于計數(shù)，D錯誤。
A.為獲得分解石油的細(xì)菌，配制培養(yǎng)基時，應(yīng)以石油為唯一的碳源
B.②過程從錐形瓶中吸取1 mL菌液注入試管中，若稀釋10倍，則試管內(nèi)盛有9 mL無菌水
C.待培養(yǎng)基冷卻至25 ℃左右時進(jìn)行③過程，在酒精燈火焰附近進(jìn)行
D.④過程純化能分解石油的細(xì)菌，該方法能用于計數(shù)
16.如圖所示為治療性克隆的基本過程，首先取病人的體細(xì)胞核，移植到去核的卵母細(xì)胞中，在早期胚胎形成后，從中分離獲得胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)，對ES細(xì)胞進(jìn)行基因修飾和定向分化處理，將定向分化后的細(xì)胞移植給病人，從而達(dá)到治療疾病的目的。下列相關(guān)敘述正確的是(　　 )
A.接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂
B.獲得圖中去核的卵母細(xì)胞時，可通過顯微操
作去核
C.圖中形成的器官用于移植，理論上可以避免
免疫排斥反應(yīng)
D.治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)和
胚胎移植技術(shù)
ABC
解析：卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂時停止在減數(shù)第二次分裂，因此接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂，A正確；
顯微鏡下可以通過顯微操作去核，B正確；
圖中形成的器官來源于病人的細(xì)胞，用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，C正確；
治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)，沒有采用胚胎移植技術(shù)，D錯誤。
A.接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂
B.獲得圖中去核的卵母細(xì)胞時，可通過顯微操作去核
C.圖中形成的器官用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)
D.治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)
17.紅細(xì)胞生成素(EPO)是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述正確的是(　　 )
A.構(gòu)建表達(dá)載體時需將EPO基因插入乳腺蛋白基因的啟動子的下游
B.一般情況下，該轉(zhuǎn)基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)
C.用顯微注射技術(shù)將含EPO基因的表達(dá)載體導(dǎo)入羊的乳腺細(xì)胞中可合成并提取EPO
D.用PCR擴(kuò)增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列
ABD
解析：啟動子是位于目的基因上游的一段DNA序列，也是RNA聚合酶識別、結(jié)合的部位。RNA聚合酶與啟動子的結(jié)合能驅(qū)動基因開始轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而合成出相應(yīng)的mRNA，故構(gòu)建表達(dá)載體時需將EPO基因(目的基因)插入乳腺蛋白基因的啟動子的下游，A正確；
某科研團(tuán)隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO，所以一般情況下，該轉(zhuǎn)基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B正確；
用顯微注射技術(shù)將含EPO基因的表達(dá)載體導(dǎo)入羊的受精卵(將來發(fā)育成雌性個體)中，待其發(fā)育到一定階段，方可合成EPO，C錯誤；
用PCR擴(kuò)增人EPO基因，前提是需要一段已知的EPO基因核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計引物，D正確。
18.(2024·江蘇鹽城期末)單基因遺傳病可以通過核酸雜交技術(shù)進(jìn)行早期診斷。有一對夫婦均為鐮狀細(xì)胞貧血致病基因的攜帶者，為了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都進(jìn)行產(chǎn)前診斷。下圖為這對夫婦和孩子核酸分子雜交診斷的結(jié)果示意圖。下列相關(guān)敘述正確的有(　 　)
A.與圖中正常基因模板鏈雜交的探針
堿基對應(yīng)序列為“5′—AACTCGT－3′”
B.根據(jù)凝膠電泳帶譜分析，基因純合
的是Ⅱ－2
C.該地區(qū)鐮狀細(xì)胞貧血患病率為
1/10 000，若Ⅱ－3與另一正常女
子婚配，則生出患病孩子的概率
為1/202
D.若將正常的血紅蛋白基因成功導(dǎo)入患者的骨髓造血干細(xì)胞中，可用于治療該病
ACD
解析：據(jù)圖可知，正常基因模板鏈的核酸序列為5′－ACGAGTT－3′，按照堿基互補(bǔ)配對的原則，則與圖中正常基因模板鏈雜交的探針堿基對應(yīng)序列為“5′—AACTCGT－3′”，A正確；
圖中夫婦的基因型均為Bb，根據(jù)凝膠電泳帶譜分析，基因純合的是Ⅱ－2和Ⅱ－1，他們的基因型依次為bb和BB，B錯誤；
A.與圖中正常基因模板鏈雜交的探針堿基對應(yīng)序列為“5′—AACTCGT－3′”
B.根據(jù)凝膠電泳帶譜分析，基因純合的是Ⅱ－2
C.該地區(qū)鐮狀細(xì)胞貧血患病率為1/10 000，若Ⅱ－3與另一正常女子婚配，則生出患病孩子的概率為1/202
D.若將正常的血紅蛋白基因成功導(dǎo)入患者的骨髓造血干細(xì)胞中，可用于治療該病
該地區(qū)鐮狀細(xì)胞貧血患病率為1/10 000，說明該地區(qū)人群中b的基因頻率為1/100，則B的基因頻率為99/100，則正常人群中攜帶者的概率為2×1/100×99/100÷(1－1/10 000)＝2/101，結(jié)合圖示可知，Ⅱ－3 的基因型為Bb，若其與正常女子(Bb或BB)婚配，則生出患病孩子的概率為2/101×1/4＝1/202，C正確；
鐮狀細(xì)胞貧血是由基因突變導(dǎo)致的，屬于遺傳病，將正常血紅蛋白基因?qū)牖颊叩墓撬柙煅杉?xì)胞中則可產(chǎn)生正常的紅細(xì)胞，進(jìn)而可達(dá)到治療目的，D正確。
A.與圖中正常基因模板鏈雜交的探針堿基對應(yīng)序列為“5′—AACTCGT－3′”
B.根據(jù)凝膠電泳帶譜分析，基因純合的是Ⅱ－2
C.該地區(qū)鐮狀細(xì)胞貧血患病率為1/10 000，若Ⅱ－3與另一正常女子婚配，則生出患病孩子的概率為1/202
D.若將正常的血紅蛋白基因成功導(dǎo)入患者的骨髓造血干細(xì)胞中，可用于治療該病
三、非選擇題(共4小題，共60分。)
19.(15分)(2024·江蘇南京階段練習(xí))食醋釀造是多種微生物共同作用的過程，主要微生物為霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋發(fā)酵過程分為淀粉糖化、酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵三個階段，期間有不同種類的微生物生長繁殖并產(chǎn)生各種酶類，經(jīng)過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)變化最終形成食醋。
(1)發(fā)酵原料中的淀粉為微生物提供________(營養(yǎng)物質(zhì))。參與發(fā)酵的多種微生物種間關(guān)系屬于________。
碳源
競爭
(2)研究人員對食醋固態(tài)發(fā)酵過程中微生物的生長變化規(guī)律進(jìn)行研究。下圖為醋醅不同層次的酵母菌和醋酸菌數(shù)量變化情況。
①用________________法將菌種接種到添加了碳源、________、無機(jī)鹽、水以及________的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間，獲得單菌落后，挑選菌落數(shù)符合要求的平板進(jìn)行計數(shù)。
稀釋涂布平板
氮源
瓊脂
②由圖1可知，整個發(fā)酵過程中酵母菌數(shù)量呈現(xiàn)________________________的趨勢，且在不同層次上隨著深度增加而減少。初期，由于________________，上層菌增殖速度高于中層及下層菌。之后，隨著發(fā)酵條件的變化，酵母菌基本停止繁殖而主要進(jìn)行________發(fā)酵。在第7天以后隨發(fā)酵時間延長，酵母菌的數(shù)量呈降低趨勢，原因是___________________________________________________
________________________________。
先快速升高后緩慢降低
溶解氧的存在
酒精
酒精的增多以及酸的產(chǎn)生不適宜酵母菌的生長繁殖(營養(yǎng)
物質(zhì)減少及有害代謝產(chǎn)物的積累)
③圖2顯示，醋酸菌在________天繁殖最快。醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，反應(yīng)簡式為：__________________________________________。
1～3
解析：(1)淀粉屬于多糖，為微生物提供碳源。參與發(fā)酵的多種微生物為了生長繁殖，他們之間爭奪營養(yǎng)物質(zhì)和生存空間，其種間關(guān)系屬于競爭關(guān)系。
(2)①為了了解醋醅不同層次的酵母菌和醋酸菌數(shù)量變化情況，利用稀釋涂布平板法得到單菌落后計數(shù)。該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中應(yīng)該含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、水以及瓊脂等。②由圖1可知，酵母菌在發(fā)酵過程中先快速升高后緩慢降低。發(fā)酵初期，上層溶解氧的濃度高，因而上層菌增殖速度高于中
20.(15分)(2024·江蘇階段練習(xí))電影《我不是藥神》中的格列寧是一種治療癌癥的靶向藥物，此類靶向藥物可稱為“生物導(dǎo)彈”。通常，我們采用動物細(xì)胞融合技術(shù)來制備單克隆抗體，利用單克隆抗體來診斷和治療癌癥可能會成為攻克癌癥的重要手段。
(1)若單克隆抗體與藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”治療腸癌，則特定抗原通常是____________________________。靶向藥物比普通的化療藥物療效高、毒副作用小是因?yàn)開___________________________________________________。
腸癌細(xì)胞(質(zhì)膜)表面的蛋白質(zhì)
單克隆抗體可特異性的結(jié)合癌細(xì)胞，不損傷正常細(xì)胞
(2)誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合時需要采用________________、______________________
或電場誘導(dǎo)融合法等方法誘導(dǎo)，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_________________________________。
滅活病毒誘導(dǎo)法
聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合法
既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體
(3)近年來，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)丁酸鈉對雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體有一定的影響，某科研小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示：
丁酸鈉對雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的影響
丁酸鈉的濃度/(mmol·L－1) 時間/h
48 96 144
0 1∶320 1∶640 1∶1 200
0.25 1∶320 1∶1 280 1∶2 500
0.5 1∶160 1∶2 500 1∶2 500
0.75 1∶320 1∶320 1∶640
注：表中1∶x表示抗體效價，x值越高表明越有利于抗體的產(chǎn)生。
①該實(shí)驗(yàn)過程中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)瓶放在了含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CO2的主要作用是_______________，該實(shí)驗(yàn)的自變量為____________________。
②根據(jù)表中數(shù)據(jù)，分析丁酸鈉濃度與單克隆抗體產(chǎn)生量的關(guān)系：_____________________________________________________________________
_______________________________。
維持培養(yǎng)液的pH
丁酸鈉的濃度和培養(yǎng)時間
在一定濃度范圍內(nèi)，丁酸鈉濃度越高，單克隆抗體產(chǎn)生越多，超過一定濃度，
丁酸鈉會抑制單克隆抗體的產(chǎn)生
解析：(1)單克隆抗體在癌癥治療中可作為“生物導(dǎo)彈”，單克隆抗體可以識別癌細(xì)胞表面特定的抗原(癌細(xì)胞表面的蛋白質(zhì))，引導(dǎo)藥物定向殺傷癌細(xì)胞，將癌細(xì)胞消滅掉而不影響正常細(xì)胞，所以療效高、毒副作用小。
(2)誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合常用的方法有：電場誘導(dǎo)融合法、聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法等。若該過程是制備單克隆抗體，在誘導(dǎo)細(xì)胞融合中，所形成的融合細(xì)胞有3種(只考慮兩兩融合細(xì)胞)：AA型、BB型、AB型，用來培養(yǎng)的融合細(xì)胞應(yīng)該是AB型的雜交瘤細(xì)胞，從中選擇出它的方法是用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，同種自身融合的細(xì)胞都不能存活，存活生長的是異種細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是：既能無限繁殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。
(3)①該實(shí)驗(yàn)過程中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)瓶放在了含5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。由表格信息可知，該實(shí)驗(yàn)的自變量為丁酸鈉的濃度和培養(yǎng)時間。②依據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，丁酸鈉濃度與單克隆抗體產(chǎn)生量的關(guān)系為：在一定濃度范圍內(nèi)，丁酸鈉濃度越高，單克隆抗體產(chǎn)生越多，超過一定濃度，丁酸鈉會抑制單克隆抗體的產(chǎn)生。
21.(15分)與普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖含量高，汁多質(zhì)脆，富含多種維生素，更富有生產(chǎn)應(yīng)用價值。科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示，P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖2所示。回答下列問題：
(1)在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示。圖1中強(qiáng)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被____________酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用圖1所示的________________酶組合，將含P基因的DNA片段和Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。
RNA聚合
BamHⅠ和SacⅠ
(2)將農(nóng)桿菌液浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)加入________以篩選出成功導(dǎo)入T－DNA的玉米愈傷組織。篩選出的愈傷組織經(jīng)過________過程可形成叢芽，最終獲得多個玉米株系。現(xiàn)對a1、a2、a3、a4四個甜玉米株系的蛋白質(zhì)表達(dá)量進(jìn)行測定，結(jié)果如圖2。其中a4株系P蛋白表達(dá)量較低的原因可能是__________________________________________
____________。
潮霉素
再分化
a4株系玉米中可能沒有導(dǎo)入目的基因(或目的基
因未表達(dá))
(3)研究人員發(fā)現(xiàn)了一種RNA剪接抑制劑，該抑制劑會使玉米相關(guān)基因的表達(dá)受阻。針對該抑制劑的具體作用，科研人員提出以下假說：
假說1：該抑制劑導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子1的對應(yīng)序列不能被剪。
假說2：該抑制劑導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子1和外顯子2的對應(yīng)序列同時被剪切。
為了驗(yàn)證上述假說，需分別從實(shí)驗(yàn)組和對照組胚細(xì)胞中提取RNA，經(jīng)過________過程形成cDNA，然后對cDNA進(jìn)行PCR后，再分析電泳后的條帶。若要證明假說2成立，需要選擇圖3中所示的引物________(填數(shù)字)進(jìn)行PCR。
逆轉(zhuǎn)錄
3和4
解析：(1)RNA聚合酶與DNA的啟動子結(jié)合，驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。首先P基因和Ti質(zhì)粒需要相同的限制酶切割位點(diǎn)，其次，BamHⅠ后面有強(qiáng)啟動子不能丟棄，EcoRⅠ和NotⅠ限制酶會破壞目的基因，因此選擇BamHⅠ和SacⅠ限制酶的組合。
(2)農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，重組質(zhì)粒中有潮霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因，但導(dǎo)入T－DNA的植物細(xì)胞能表現(xiàn)出對潮霉素的抗性，因此，培養(yǎng)基中需加入潮霉素進(jìn)行篩選，并以此為特性進(jìn)行篩選，將篩選出的愈傷組織經(jīng)過再分化形成叢芽，從而獲得多個轉(zhuǎn)基因玉米株系；a4株與野生型的P蛋白表達(dá)量基本相同，可能原因是a4株系玉米中未導(dǎo)入目的基因或目的基因未表達(dá)。
(3)為驗(yàn)證上述假說，可分別從實(shí)驗(yàn)組和對照組胚細(xì)胞中提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，然后對cDNA進(jìn)行PCR后，再分析電泳后的條帶；若要證明假說2成立，即RNA前體上內(nèi)含子1和外顯子2的對應(yīng)序列同時被剪切下去，即選擇圖示引物3和4進(jìn)行PCR。
22.(15分)(2024·江蘇揚(yáng)州階段練習(xí))稻米的直鏈淀粉是由蠟質(zhì)基因(waxy)控制合成的淀粉合成酶(GBSS)催化形成，直鏈淀粉含量高的米飯質(zhì)地和適口性不高。將waxy反義基因片段導(dǎo)入水稻細(xì)胞抑制內(nèi)源基因表達(dá)，可降低直鏈淀粉含量。為防止同時導(dǎo)入的標(biāo)記基因影響，科研人員構(gòu)建了2種載體，通過共轉(zhuǎn)化以期獲得含有目的基因、不含標(biāo)記基因和報告基因(gus)的轉(zhuǎn)基因水稻，相關(guān)流程如下圖。請回答下列問題。
(1)waxy反義基因片段導(dǎo)入水稻細(xì)胞后可抑制內(nèi)源基因表達(dá)，原因是__________________
________________________________________________。為構(gòu)建反義基因與gus的融合基因，在利用PCR技術(shù)獲取反義基因與gus過程中，需要在設(shè)計的兩對引物________端分別添加限制酶__________________、__________________的識別序列。
(2)過程③中將農(nóng)桿菌1、2按照1∶9比例充分混勻感染水稻愈傷組織，3天后轉(zhuǎn)入含有__________的選擇培養(yǎng)基篩選抗性愈傷組織。
反義基因轉(zhuǎn)錄形成的
mRNA可與內(nèi)源基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA結(jié)合，
抑制翻譯
5′
SalⅠ和BamHⅢ
BamHⅢ和HindⅢ
潮霉素
(3)提取T0代植株的基因組DNA，根據(jù)反義基因和gus基因部分序列設(shè)計引物進(jìn)行PCR1檢測，同時根據(jù)反義基因和終止子的部分序列設(shè)計引物進(jìn)行PCR2檢測，結(jié)果如下圖，其中M為標(biāo)準(zhǔn)參照，1為陽性對照，2為陰性對照，3～8號為抗性植株DNA的PCR產(chǎn)物。其中2是根據(jù)______________的DNA為模板進(jìn)行PCR的結(jié)果，據(jù)圖可以確定________號植株為共轉(zhuǎn)化失敗的水稻。
非轉(zhuǎn)基因水稻
5、6
(4)過程⑤將共轉(zhuǎn)化成功的T0代植株進(jìn)行自交，收獲種子，取半粒種子進(jìn)行GUS檢測(gus的表達(dá)產(chǎn)物能使白色X－Gluc水解生成藍(lán)色產(chǎn)物)。選擇檢測結(jié)果為________色的種子種植得到T1代植株。最終還需檢測____________________，才可判斷是否改良成功。
白
稻米中直鏈淀粉的含量
解析：(1)由于反義基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA可與內(nèi)源基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA堿基互補(bǔ)配對，從而使核糖體不能與mRNA結(jié)合，因此抑制翻譯過程，所以waxy反義基因片段導(dǎo)入水稻細(xì)胞后可抑制內(nèi)源基因表達(dá)；為構(gòu)建反義基因與gus的融合基因，從圖中看出，在反義基因兩端存在SalⅠ和BamHⅢ限制酶切割位點(diǎn)，而在gus基因兩端存在BamHⅢ和HindⅢ限制酶切割位點(diǎn)，DNA聚合酶延伸時，將脫氧核苷酸加到引物的3′端，為了不破壞目的基因，該限制酶識別序列應(yīng)添加在引物的5′端，所以利用PCR技術(shù)獲取反義基因與gus過程中，需要在設(shè)計的兩對引物5′端分別添加SalⅠ和BamHⅢ、BamHⅢ和HindⅢ的酶切位點(diǎn)。
(2)從圖中看出T－DNA的序列中含有潮霉素抗性基因，而四環(huán)素抗性基因沒有在T－DNA序列中，所以需要將愈傷組織轉(zhuǎn)移至含有潮霉素的選擇培養(yǎng)基中篩選抗性愈傷組織。
(3)1為陽性對照，即含有目的基因的片段，2為陰性對照，即是根據(jù)非轉(zhuǎn)基因水稻的DNA為模板擴(kuò)增的結(jié)構(gòu)。在左圖是根據(jù)反義基因和gus基因部分序列設(shè)計引物進(jìn)行PCR1檢測，右圖是根據(jù)反義基因和終止子的部分序列設(shè)計引物進(jìn)行 PCR2檢測，5號和6號在左圖中存在電泳條帶，而在右圖中沒有終止子，所以是共轉(zhuǎn)化失敗的水稻。
(4)實(shí)驗(yàn)的目的是通過共轉(zhuǎn)化以期獲得含有目的基因、不含標(biāo)記基因和報告基因(gus)的轉(zhuǎn)基因水稻，而gus的表達(dá)產(chǎn)物能使白色X－Gluc水解生成藍(lán)色產(chǎn)物，所以進(jìn)行GUS檢測時，如果是白色，則不含GUS，選擇檢測結(jié)果為白色的種子種植，由于直鏈淀粉含量高的米飯質(zhì)地和適口性不高，所以最終還要檢測稻米中直鏈淀粉的含量。

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