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浙江省嘉興市第五高級名校2023-2024學年高二下學期4月月考生物學試卷
1．（2024高二下·南湖月考） 細菌培養(yǎng)基常在121℃條件下高壓滅菌鍋中滅菌。如果只是在100℃條件下將細菌培養(yǎng)基滅菌，下列生物仍會存活的是（　　）
A．大腸桿菌 B．一種青霉菌
C．枯草芽孢桿菌的芽孢 D．沙門氏菌
【答案】C
【知識點】滅菌技術
【解析】【解答】大腸桿菌、青霉菌、沙門氏菌不能形成芽孢，在100℃溫度下可以滅活，而枯草芽孢桿菌能形成芽孢，抵抗高溫的能力強，在100℃溫度下仍可能存活。分析得知C正確，ABD錯誤。
故答案為：C
【分析】常用的滅菌方法有干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法等。芽孢桿菌能形成芽孢（內(nèi)生孢子）， 對外界有害因子的抵抗力強，需要高溫高壓處理一定時間才能將其殺死。
2．（2024高二下·南湖月考） 下列關于培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是（　　）
A．液體培養(yǎng)基常用于大規(guī)模快速繁殖某種微生物
B．固體培養(yǎng)基表面的微生物生長速度比在液體培養(yǎng)基中快
C．平板固體培養(yǎng)基常用于觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落
D．斜面固體培養(yǎng)基常用于菌種保存
【答案】B
【知識點】培養(yǎng)基概述及其分類
【解析】【解答】AB、液體培養(yǎng)基中不含凝固劑，可以增大微生物與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，故可用于大規(guī)模繁殖某種微生物，固體培養(yǎng)基表面的微生物生長速度比在液體培養(yǎng)基中慢，A正確，B錯誤；
C、常用平板固體培養(yǎng)基接種后觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落，C正確；
D、斜面固體培養(yǎng)基常用于菌種保存，D正確。
故答案為：B
【分析】微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見菌落，平板固體培養(yǎng)基常用于觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落。
培養(yǎng)基的成分有水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子等。根據(jù)培養(yǎng)基的化學成分可以把培養(yǎng)基分成合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基等。天然培養(yǎng)基與合成培養(yǎng)基相比成本較低，除了在實驗室常用外，更多地被用于大規(guī)模的生物發(fā)酵工業(yè)。
3．（2024高二下·南湖月考）獲取純凈的微生物培養(yǎng)物是發(fā)酵工程的基礎。下列敘述錯誤的是（　　）
A．獲取純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染
B．稀釋涂布平板法和顯微鏡計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法
C．平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常用方法
D．接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為純培養(yǎng)物
【答案】D
【知識點】微生物的分離和培養(yǎng)；測定某種微生物的數(shù)量；滅菌技術
【解析】【解答】A、獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是無菌技術，即防止外來雜菌的入侵，A正確；
B、測定微生物數(shù)量的常用方法有活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)法，故稀釋涂布平板法和顯微鏡計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法，B正確；
C、實驗室中進行微生物分離和純化最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，C正確；
D、純培養(yǎng)物是由單一個體繁殖所獲得的微生物群體，特定種類微生物的群體不一定是由單一個體繁殖而來，D錯誤。
故答案為：D。
【分析】1、接種微生物常用的兩種方法：
（1）平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。
（2）稀釋涂布平板法則是菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。
2、將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含有特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。
4．（2024高二下·南湖月考） 下列關于發(fā)酵工程的敘述，正確的是（　　）
A．篩選出高產(chǎn)檸檬酸的黑曲霉菌種后可直接接種到發(fā)酵罐中進行發(fā)酵生產(chǎn)
B．確定菌種之后，才能選擇原料配制培養(yǎng)基
C．分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)
D．如果發(fā)酵產(chǎn)品是代謝物，可采用過濾、沉淀等方法加以分離
【答案】B
【知識點】微生物發(fā)酵及其應用
【解析】【解答】A、篩選出高產(chǎn)檸檬酸的黑曲霉菌種后需進行擴大培養(yǎng)，再接種到發(fā)酵罐中進行發(fā)酵生產(chǎn)，A錯誤；
B、不同菌種代謝的特點不同，所需的原料也不同，因此確定菌種之后，才能選擇原料配制培養(yǎng)基，B正確；
C、發(fā)酵過程是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，發(fā)酵過程中需要隨時取樣檢測培養(yǎng)液中的細菌數(shù)目、產(chǎn)物濃度等，還要及時添加必需的培養(yǎng)基組分，以滿足菌種的營養(yǎng)需要。同時還要嚴格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件，C錯誤；
D、發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品有兩類，一類是代謝產(chǎn)物，另一類是菌體本身。產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。如果產(chǎn)品是菌體，可采用過濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來；如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進行提取，D錯誤。
故答案為：B
【分析】
發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術，規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品。它涉及菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等方面。具體包括菌種的選育、擴大培養(yǎng)、培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等環(huán)節(jié)。
5．（2024高二下·南湖月考） 紹興是黃酒之鄉(xiāng)，“麥曲酶長，酵米復芳；白梅酒釀，伴淋寒香；壓濾瓊漿，煎煮陳藏”是對紹興黃酒精致復雜釀造工藝的描述。在黃酒的主發(fā)酵過程中，“開耙”（攪拌）是極為關鍵的一步。下列相關敘述錯誤的是（　　）
A．接種麥曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒釀”菌種發(fā)酵
B．煎煮的目的是除去發(fā)酵產(chǎn)品中的雜菌，利于酵母菌繁殖
C．陳藏有利于黃酒中醇與酸發(fā)生酯化反應，使酒更加芳香
D．發(fā)酵過程中“開耙”可適當提供O2，促進酵母菌繁殖
【答案】B
【知識點】微生物發(fā)酵及其應用；果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、淀粉屬于生物大分子物質(zhì)d，淀粉糖化為小分子糖有利于發(fā)酵過程中酵母菌對糖類的利用，A正確；
B、煎煮是進行消毒，除去發(fā)酵產(chǎn)品中的酵母菌等微生物，利于酒的儲藏，B錯誤；
C、陳儲”是將榨出的酒放入罐內(nèi)存放，有利于黃酒中醇與酸發(fā)生酯化反應，使酒更加芳香，C正確；
D、發(fā)酵過程中“開耙”是為了增加O2的含量，讓酵母菌進行有氧呼吸，增加酵母菌的數(shù)量，有利于活化酵母，D正確。
故答案為：B
【分析】
6．（2024高二下·南湖月考） 圖示為分離以尿素為氮源的微生物實驗的其中一個培養(yǎng)皿上的實驗結果。培養(yǎng)基中加了酚紅，圖中的陰影部分實際為紅色。下列對結果的分析正確的是（　　）
A．菌落A能產(chǎn)生分解尿素的脲酶
B．菌落C利用尿素的能力大于菌落B
C．尿素為微生物提供了碳源和氮源
D．尿素分解產(chǎn)生NH3都排出細胞
【答案】B
【知識點】尿素分解菌的分離與計數(shù)
【解析】【解答】A、培養(yǎng)基中加了酚紅，圖中的陰影部分實際為紅色，菌落A周圍沒有紅色圈，因此菌落A不能產(chǎn)生分解尿素的脲酶，A錯誤；
B、脲酶催化尿素的分解，產(chǎn)生氨，與酚紅反應呈紅色，菌落C周圍的紅色圈大于菌落B周圍，因此因此菌落C利用尿素的能力大于菌落B，B正確；
C、尿素為微生物提供氮源，培養(yǎng)基中的葡萄糖提供碳源，C錯誤；
D、尿素分解產(chǎn)生NH3也可被植物細胞利用，D錯誤。
故答案為：B
【分析】尿素分離：
7．（2024高二下·南湖月考） 下列關于植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（　　）
A．體細胞胚、芽可用于制作人工種子
B．菊花莖段在生根培養(yǎng)基上獲得叢狀苗，然后再進行分株培養(yǎng)
C．植物愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導劑，可獲得染色體加倍的細胞
D．愈傷組織發(fā)育成胚狀體的過程是器官發(fā)生途徑
【答案】A
【知識點】植物組織培養(yǎng)的過程
【解析】【解答】A、人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，體細胞胚、芽可用于制作人工種子，A正確；
B、菊花莖段在生芽培養(yǎng)基中生長的叢狀苗分株后，在無菌條件下一個個轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，B錯誤；
C、植物細胞融合時必須先去除細胞壁，然后加入誘導劑才能促使細胞融合，所以在愈傷組織（其細胞含有細胞壁）培養(yǎng)中直接加入細胞融合的誘導劑，不能導致細胞融合，無法獲得染色體加倍的細胞，C錯誤；
D、胚性細胞發(fā)育成胚狀體的過程是胚胎發(fā)生途徑，經(jīng)過器官發(fā)生和形態(tài)建成，D錯誤。
故答案為：A
【分析】
植物組織培養(yǎng)：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。
8．（2024高二下·南湖月考） 如圖表示培養(yǎng)煙草葉肉細胞原生質(zhì)體進行遺傳改良的過程，據(jù)圖分析錯誤的是（　　）
A．可用紅墨水染色的方法檢測原生質(zhì)體有無活性
B．①過程需在一定濃度的甘露醇溶液中用纖維素酶和果膠酶處理
C．④過程要求生長素與細胞分裂素比例合適
D．上述過程中可發(fā)生染色體變異、基因突變和基因重組
【答案】D
【知識點】植物組織培養(yǎng)的過程
【解析】【解答】A、細胞膜具有選擇透過性，即活細胞不能被染色，死細胞可被染色，因此可用染色排除法檢測原生質(zhì)體有無活性，A正確；
B、①為去壁過程，過程需在一定濃度的甘露醇溶液中用纖維素酶和果膠酶處理，其中甘露醇的作用是維持一定的滲透壓，B正確；
C、④為再分化過程，該過程需要生長素和細胞分裂素比例合適，C正確；
D、上述過程中細胞通過有絲分裂方式增殖，可以發(fā)生染色體變異和基因突變，但不會發(fā)生基因重組（只發(fā)生在減數(shù)分裂過程中），D錯誤。
故答案為：D
【分析】植物組織培養(yǎng)：
圖示表示對煙草葉肉細胞進行遺傳改良的過程，其中①表示去壁過程，常用酶解法；②表示用紫外線照射進行人工誘變；③表示脫分化過程；④表示再分化過程。
9．（2024高二下·南湖月考）植物組織培養(yǎng)在植物生產(chǎn)領域有著廣泛的應用。下列敘述錯誤的是（　　）
A．初代培養(yǎng)物培養(yǎng)至一定時間可進行繼代培養(yǎng)
B．從植物生長點取外植體進行組培可獲得脫毒植株
C．生產(chǎn)人工種子的體細胞胚一定是由愈傷組織分化而來
D．利用發(fā)酵罐大規(guī)模培養(yǎng)植物細胞可用于細胞代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)
【答案】C
【知識點】植物組織培養(yǎng)的過程
【解析】【解答】A、試管苗在初代培養(yǎng)一段時間后營養(yǎng)物質(zhì)消耗殆盡，代謝廢物積累，因而需要繼代培養(yǎng)，A正確；
B、植物生長點不易感染病毒，從植物生長點取外植體進行組培可獲得脫毒植株，B正確；
C、生產(chǎn)人工種子的體細胞胚不一定都是由愈傷組織分化而來，如外植體上直接分化出胚狀體，C錯誤；
D、利用發(fā)酵罐大規(guī)模培養(yǎng)植物細胞可在愈傷組織中獲取細胞產(chǎn)物，D正確。
故答案為：C。
【分析】植物組織培養(yǎng)的流程為：外植體經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，長出芽和根，進而發(fā)育成完整的植株。
10．（2024高二下·南湖月考）Bcl-2基因是細胞凋亡抑制基因，可以利用PCR技術檢測其轉(zhuǎn)錄水平，進而了解該基因與不同胚胎時期細胞凋亡的關系。如圖為克隆豬的培育及Bcl-2基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程，下列說法錯誤的是（　　）
A．圖中A細胞表示去核的卵母細胞，B細胞表示體細胞
B．在早期胚胎發(fā)育的不同時期提取的總mRNA是不同的
C．圖中過程X表示逆轉(zhuǎn)錄，獲得的cDNA可用于克隆豬基因組的測序
D．在PCR過程中，（Bcl-2 cDNA）/cDNA的比值反映Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平
【答案】C
【知識點】動物細胞核移植技術
【解析】【解答】A、圖中A細胞為核移植的受體細胞，應該為去核的卵母細胞，B為提供細胞核的體細胞，A正確；
B、由于基因的選擇性表達，因此在早期胚胎發(fā)育的不同時期提取的總mRNA是不同的，B正確；
C、mRNA→cDNA的過程表示逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程獲得的cDNA中沒有啟動子、內(nèi)含子等，不能用于克隆豬基因組的測序，C錯誤；
D、在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù)，進而計算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平，D正確。
故答案為：C。
【分析】1、 體細胞核移植技術 ：將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。原理是動物細胞核的全能性。
2、體細胞核移植過程：
3、體細胞核移植的應用：a、加速家畜的遺傳改良進程，促進優(yōu)良種群繁育；b、轉(zhuǎn)基因克隆動物做生物反應器，生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；c、克隆動物的組織、器官做移植的供體；d、研究克隆動物和克隆細胞可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程。
4、體細胞核移植技術存在的問題：（1）胚胎成活率低；（2）動物健康存在問題；（3）克隆動物食品的安全性問題。
11．（2024高二下·南湖月考） 鼠源單克隆抗體制備的基本過程如下圖所示。下列關于鼠源單克隆抗體制備的敘述，錯誤的是（　　）
A．小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白，以提高相應B細胞數(shù)量
B．在HAT培養(yǎng)基上能生長的細胞不一定能產(chǎn)生所需的抗體
C．克隆化培養(yǎng)過程中篩選抗體檢驗陽性的細胞以進行大規(guī)模培養(yǎng)
D．可將雜交瘤細胞注入小鼠血液中實現(xiàn)單克隆抗體的大規(guī)模生產(chǎn)
【答案】D
【知識點】單克隆抗體的制備過程
【解析】【解答】A、小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白，反復的抗原刺激能多次刺激記憶B細胞，促使其增殖、分化為漿細胞，漿細胞產(chǎn)生抗體，A正確；
B、在HAT培養(yǎng)基上能生長的細胞既能無限增殖、又能產(chǎn)生抗體，由于從小鼠中提取的B細胞有多種，此時在HAT培養(yǎng)基上能生長的細胞，不一定能產(chǎn)生所需的抗體，B正確；
C、克隆化培養(yǎng)過程中，進行專一抗體檢測，從而篩選抗體檢驗陽性的細胞以進行大規(guī)模培養(yǎng)，C正確；
D、可將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔中，在小鼠腹腔中增殖進而從腹水中提取單克隆抗體，實現(xiàn)單克隆抗體的大規(guī)模生產(chǎn)，D錯誤。
故答案為：D
【分析】 單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。
12．（2024高二下·南湖月考） 下圖是利用體細胞核移植技術克隆高產(chǎn)奶牛的流程圖，①～⑤表示相應操作。
下列關于早期胚胎形成過程的敘述，正確的是（　　）
A．過程①常對雌牛甲進行超數(shù)排卵處理
B．過程②獲取的體細胞可以是成熟的紅細胞
C．過程③獲得的重組細胞中含有4個染色體組
D．過程④需要構建抑制細胞分化的培養(yǎng)體系
【答案】A
【知識點】動物細胞核移植技術
【解析】【解答】A、過程①常對雌牛甲用外源促性腺激素進行超數(shù)排卵處理，A正確；
B、過程②獲取的體細胞要提供細胞核，哺乳動物成熟紅細胞沒有細胞核，B錯誤；
C、過程③是將體細胞注入去核卵母細胞內(nèi)，所以只有2個染色體組，C錯誤；
D、過程④進行早期胚胎培養(yǎng)不需要抑制細胞分化，D錯誤
故答案為：A
【分析】
13．（2024高二下·南湖月考）下圖為雜交瘤細胞的制備及初步篩選示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。免疫B細胞（HGPRT+）能在HAT篩選培養(yǎng)液中正常生長。下列敘述正確的是（　　）
A．從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體即為單克隆抗體
B．仙臺病毒處理可使細胞膜發(fā)生一定程度的損傷，進而促進細胞融合
C．在HAT培養(yǎng)液中能長期存活的細胞具有特異性強、靈敏度高的特點
D．多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能合成DNA
【答案】B
【知識點】單克隆抗體的制備過程
【解析】【解答】A、在HAT培養(yǎng)液中篩選出來的是雜交瘤細胞，可能有多種類型，因此后續(xù)還需要對這些雜交瘤細胞進行單一抗體檢測，進而篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，可見從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體不是單克隆抗體，A錯誤；
B、仙臺病毒處理可使細胞膜發(fā)生一定程度的損傷，進而促進細胞融合，據(jù)此可用滅活的仙臺病毒作為促融劑，B正確；
C、在HAT培養(yǎng)液中能長期存活的細胞為雜交瘤細胞，這些細胞可能產(chǎn)生多種類型的抗體，因而不具有特異性強、靈敏度高的特點，C錯誤；
D、多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能無限增殖，D錯誤。
故答案為：B。
【分析】1、動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性、細胞的增殖，誘導手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產(chǎn)性雜交細胞，主要用于制備單克隆抗體。
2、單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合；③動物細胞培養(yǎng)技術：對雜交瘤細胞進行體內(nèi)、體外培養(yǎng)。
3、制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖；②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。
14．（2024高二下·南湖月考） 下列有關基因工程基本操作程序的敘述，正確的是（　　）
A．目的基因檢測時所用的核酸探針是指與目的基因相同的特定雙鏈DNA
B．基因組文庫的基因含有某物種的部分基因
C．若基因比較小且核苷酸序列已知，則可直接通過化學方法合成
D．抗生素合成基因作為標記基因，可鑒別目的基因是否導入受體細胞
【答案】C
【知識點】基因工程的基本操作程序
【解析】【解答】A、DNA探針是指用放射性同位素或熒光分子標記的DNA單鏈，利用堿基互補配對原則，檢測目的基因是否導入受體細胞中，A錯誤；
B、基因組文庫的基因含有某物種的全部基因，cDNA文庫的基因含有某物種的部分基因，B錯誤；
C、若基因比較小且核苷酸序列已知，則可直接通過人工合成的方法獲取，C正確；
D、運載體上的抗生素抗性基因作為標記基因，可用于檢測目的基因是否導入受體細胞，D錯誤。
故答案為：C
【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
15．（2024高二下·南湖月考）下圖為真核生物核基因結構模式圖，下列敘述正確的是（　　）
A．啟動子編碼起始密碼子
B．cDNA文庫和基因組文庫的基因中均含有內(nèi)含子
C．在轉(zhuǎn)錄完成后，RNA聚合酶從c~d區(qū)段脫落下來
D．細胞內(nèi)DNA復制時，只復制編碼區(qū)，不復制非編碼區(qū)
【答案】C
【知識點】DNA分子的結構
【解析】【解答】A、結合題圖可知啟動子位于非編碼區(qū)，不會轉(zhuǎn)錄，所以啟動子無法編碼起始密碼子，A錯誤；
B、基因組文庫中含有內(nèi)含子，cDNA文庫中不含內(nèi)含子，B錯誤； C、RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮作用，終止子終止轉(zhuǎn)錄過程，所以在轉(zhuǎn)錄完成后，RNA聚合酶從c~d區(qū)段脫落下來，C正確； D、DNA復制時編碼區(qū)和非編碼區(qū)都會完整復制，但是基因轉(zhuǎn)錄只轉(zhuǎn)錄編碼區(qū)序列，D錯誤。
故答案為：C。
【分析】 原核生物的DNA的編碼區(qū)是連續(xù)的，真核生物DNA的編碼區(qū)是間斷的，即真核生物的DNA的編碼區(qū)有內(nèi)含子和外顯子，復制時同時復制內(nèi)含子和外顯子。原核生物的DNA的編碼區(qū)沒有內(nèi)含子和外顯子一說，全部是有遺傳意義的片段，是完全翻譯。
16．（2024高二下·南湖月考）研究人員利用農(nóng)桿菌將外源基因A導入到水稻細胞中，然后通過植物組織培養(yǎng)技術獲得了含有外源基因A的第一代水稻植株。圖為重組Ti質(zhì)粒示意圖。下列敘述錯誤的是（　　）
A．外源基因A必須整合在T-DNA片段內(nèi)
B．培養(yǎng)水稻細胞時需添加潮霉素進行篩選
C．水稻的組織培養(yǎng)過程中需調(diào)整植物激素的比例
D．第一代水稻植株中存在不含外源基因A的細胞
【答案】B
【知識點】基因工程的基本工具（詳細）
【解析】【解答】A、Ti質(zhì)粒的T-DNA片段可以整合在受體細胞的染色體DNA中，故外源基因A必須整合在T-DNA片段內(nèi)，A正確；
B、質(zhì)粒中的潮霉素抗性基因用于篩選導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，故培養(yǎng)水稻細胞時不需要添加潮霉素進行篩選，B錯誤；
C、水稻組織培養(yǎng)過程中需調(diào)節(jié)植物激素的種類和比例，以保證愈傷組織再分化并得到完整的植株，C正確；
D、第一代水稻植株進行減數(shù)分裂時，同源染色體分離，產(chǎn)生的配子細胞可能不含有外源基因A，D正確。
故答案為：B。
【分析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的）
1、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的具體過程：
（1）利用土壤的Ti質(zhì)粒構建基因表達載體，即將目的基因整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上。
（2）將整合了目的基因的Ti質(zhì)粒導入土壤農(nóng)桿菌細胞內(nèi)。
（3）利用土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞，該過程實際上是將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導入植物細胞內(nèi)。
（4）含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒進入植物細胞后，可以把自己的一段基因整合到細胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因。
2、原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。
3、農(nóng)桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。
4、轉(zhuǎn)化：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上 農(nóng)桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。
17．（2024高二下·南湖月考） 染色質(zhì)是由一定長度的核小體為基本單位構成的。將大鼠肝細胞中分離出的染色質(zhì)用非特異性核酸酶水解后去除染色質(zhì)蛋白，對得到的DNA片段進行凝膠電泳，結果如圖所示。若先將染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)去掉后用同樣的非特異性核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段。據(jù)此分析，下列有關敘述錯誤的是（　　）
A．凝膠中的DNA分子通過染色，可以被檢測出來
B．染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)可能對DNA具有保護作用
C．構成核小體的基本單位是脫氧核糖核苷酸
D．在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構象等有關
【答案】C
【知識點】PCR技術的基本操作和應用
【解析】【解答】A、凝膠中的DNA分子經(jīng)染色后，對波長為300nm的紫外光吸收性強，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，A正確；
B、染色質(zhì)用核酸酶處理后得到的是部分水解的染色質(zhì)，但若先將染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)去掉后用核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段，說明染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)可能對DNA具有保護作用，B正確；
C、染色質(zhì)是由一定長度的核小體為基本單位構成的，核小體的組成成分是蛋白質(zhì)和DNA，其基本單位是脫氧核糖核苷酸和氨基酸，C錯誤；
D、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構象等有關，D正確。
故答案為：C
【分析】染色質(zhì)是指間期細胞核內(nèi)由DNA、組蛋白、非組蛋白及少量RNA組成的線性復合結構，是間期細胞遺傳物質(zhì)存在的形式。在有絲分裂或減數(shù)分裂過程中，染色質(zhì)會聚縮成棒狀結構，形成染色體。染色質(zhì)和染色體實際上是同一種物質(zhì)在不同細胞周期階段的兩種表現(xiàn)形式，化學組成相同但構型不同。在真核細胞的細胞周期中，大部分時間是以染色質(zhì)的形態(tài)存在。
18．（2024高二下·南湖月考） “篩選”是生物工程中常用的技術手段，下列敘述正確的是（　　）
A．基因工程中通過標記基因篩選出的細胞一定都含有重組質(zhì)粒
B．在誘變育種中需要通過篩選才能得到數(shù)量較多的有利變異
C．植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的雜種細胞需進行篩選
D．單克隆抗體制備過程中對雜交瘤細胞進行一次抗體檢驗即可大量獲得陽性細胞克隆
【答案】C
【知識點】誘變育種；植物體細胞雜交的過程及應用；單克隆抗體的制備過程；基因工程的基本操作程序
【解析】【解答】A、基因工程中通過標記基因篩選出的細胞不一定都含有重組質(zhì)粒，也可能含有普通質(zhì)粒，A錯誤；
B、誘變育種的原理是基因突變，基因突變具有多害少利性，因此在誘變育種中需要通過篩選才能得到數(shù)量較少的有利變異，B錯誤；
C、植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的雜種細胞需進行篩選，C正確；
D、單克隆抗體制備過程中對雜交瘤細胞進行一次抗體檢驗后只能獲得少量陽性細胞克隆，D錯誤。
故答案為：C
【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。
19．（2024高二下·南湖月考） 實時熒光定量PCR可用于對樣品中特定DNA序列進行定量分析。將熒光標記的Taqman探針與待測樣本DNA混合，當探針完整時，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，在特定光的激發(fā)下R發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光信號強度增加，通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值(達到熒光閾值所經(jīng)歷的循環(huán)次數(shù))。下列相關敘述正確的是（　　）
A．熒光基因R連接在探針的3’端
B．該反應體系中并未加入ATP，所以新鏈的合成不需要消耗能量
C．TaqDNA聚合酶在該反應中的作用是合成磷酸二酯鍵
D．Ct值越小，說明樣品中特定DNA序列的含量越多
【答案】D
【知識點】PCR技術的基本操作和應用
【解析】【解答】A、引物使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，即熒光基因R連接在探針的5’端，A錯誤；
B、 在反應過程中，dNTP為新鏈的合成提供能量，即新鏈的合成需要消耗能量，B錯誤；
C、TaqDNA聚合酶能夠催化脫氧核苷酸在DNA的3'端延伸，C錯誤；
D、 若熒光信號達到設定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴增次數(shù)少，故Ct值越小，說明樣品中特定DNA序列的含量越多，D正確。
故答案為：D。
【分析】 PCR技術：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。
2、原理：DNA復制。
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、PCR反應過程是：變性→復性→延伸
過程 說明
變性 當溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈
復性 溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合
延伸 72℃左右時，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新鏈由5'端向3'端延伸
6、結果：上述三步反應完成后，一個DNA分子就變成了兩個DNA分子，隨著重復次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應過程都是在PCR擴增儀中完成的。
20．（2024高二下·南湖月考） 下列關于生物武器的敘述，不正確的是（　　）
A．生物武器造價昂貴，但卻是具有大規(guī)模殺傷性的武器
B．生物武器中起傷害作用的微生物、毒素稱為生物戰(zhàn)劑
C．生物武器可以直接或者間接通過食物、生活必需品等散布
D．生物武器一旦使用，將對軍隊和平民造成大規(guī)模的殺傷后果
【答案】A
【知識點】生物武器
【解析】【解答】A、生物武器包括病毒、病菌、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，與常規(guī)武器相比，生物武器成本低廉、容易獲得，A錯誤；
B、生物武器包括致病菌，病毒.生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，其中起傷害作用的微生物、毒素稱為生物戰(zhàn)劑，B正確；
C、生物武器可是生物或生物產(chǎn)物，可直接或間接通過生物必需品等進行散布，C正確；
D、生物武器傳播快，毒性大，可以對軍隊或平民造成大規(guī)模殺傷后果，D正確。
故答案為：A
【分析】生物武器包括致病菌，病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，生物武器中使用的病原菌有可能會通過食物、生活必需品等散布，造成殺傷性后果，因此要禁止生物武器。
生物武器的特點：單位面積效應大；有特定的傷害對象；具有傳染性；危害時間久；不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；使用者本身易受傷害；生物武器造價低，技術難度不大，隱秘性強，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。
21．（2024高二下·南湖月考） 飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的磷酸鈣，很難被動物吸收利用。若在飼料中添加磷酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從土壤中分離產(chǎn)磷酸酶細菌菌株的過程示意圖。回答下列問題：
（1）為了解土壤中產(chǎn)磷酸酶的細菌數(shù)量，取10 g土壤加入90 mL無菌水，制備成細菌懸液，經(jīng)　 　后，獲得細胞密度不同的細菌懸液。若將最后一個試管中的菌液每次吸取0.1 mL涂布到三個培養(yǎng)基。一段時間后，菌落數(shù)分別是168、175、167個，則10 g土壤中含有此菌的菌體數(shù)是　 　。
（2）制備產(chǎn)磷酸酶的細菌菌株初篩平板時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至　 　，滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無菌磷酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入磷磷鈣的目的是　 　，達到檢測菌種分泌磷酸酶的能力。實驗結果顯示A～E五種菌株中，　 　是產(chǎn)磷酸酶最理想的菌株。
【答案】（1）（系列）梯度稀釋；1.7×108
（2）中性或微堿性；使培養(yǎng)基不透明，從而培養(yǎng)形成的產(chǎn)植酸酶菌落的周圍形成透明圈；E
【知識點】微生物的分離和培養(yǎng)；培養(yǎng)基對微生物的選擇作用
【解析】【解答】（1）10g土壤樣品轉(zhuǎn)入90mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)（系列）梯度稀釋后，分別取0.1mL茵懸液涂布在固體培養(yǎng)基上。茵落計數(shù)時為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù)。菌液稀釋了104倍，取液0.1mL，根據(jù)計算公式10g土壤樣品中此菌數(shù)量=（168+175+167）÷3÷0.1×104×10=1.7X108個。
（2）制備產(chǎn)磷酸酶的細菌菌株初篩平板時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性。固體培養(yǎng)基中加入植酸鈣會導致培養(yǎng)基不透明，微生物發(fā)酵產(chǎn)生的酶能水解植酸鈣形成透明圈，滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無菌植酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入植酸鈣的目的是使培養(yǎng)基不透明，從而使產(chǎn)植酸酶的細菌菌落周圍出現(xiàn)透明圈，方便鑒別產(chǎn)植酸酶的細菌。A~E五種菌株中，E的透明圈最大，故E是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株。
【分析】稀釋涂布平板法：

22．（2024高二下·南湖月考）通過動物細胞融合技術可以制備雜交瘤細胞，對健康的實驗小鼠進行腹腔內(nèi)免疫，一周后取小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選。
（1）動物細胞融合一般用　 　進行生物誘導。
（2）正常細胞合成DNA有兩條途徑：a通路和b通路。骨髓瘤細胞是DNA合成b通路的缺陷型細胞株，讓B淋巴細胞與其融合，再在加入DNA合成a通路阻斷劑(氨基蝶呤)的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，這種培養(yǎng)會產(chǎn)生以下哪些效果____。
A．促進細胞融合 B．淘汰B淋巴細胞
C．淘汰骨髓瘤細胞 D．阻斷雜交細胞DNA合成
（3）經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需要進行　 　和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。
（4）雜交瘤細胞體外培養(yǎng)過程　 　 (填“是”或“否”)需要添加血清。試分析原因　 　，通過雜交瘤細胞獲得的單克隆抗體的最大優(yōu)點是　 　。
【答案】（1）滅活病毒
（2）B；C
（3）克隆化培養(yǎng)
（4）是；人們對動物細胞所需要的營養(yǎng)物質(zhì)沒有完全搞清楚；特異性強、靈敏度高、可大量制備
【知識點】動物細胞工程的常用技術與應用；單克隆抗體的制備過程
【解析】【解答】（1）動物細胞融合一般用滅活的病毒進行生物誘導。
（2）A、細胞融合方法有物理法、聚乙二醇的化學法、生物法（滅活的病毒），而該培養(yǎng)對細胞融合沒有影響，A錯誤；
B、B淋巴細胞的復制次數(shù)有限，不能在培養(yǎng)基上長期存活，該培養(yǎng)基能淘汰B淋巴細胞，B正確；
C、骨髓瘤細胞是b通路缺陷型，剩下的a通路被阻斷也被抑制，不能合成DNA，該培養(yǎng)基能淘汰骨髓瘤細胞，C正確；
D、加入DNA合成a通路阻斷劑后，雜交細胞還具有b通路，因此不能阻斷雜交細胞DNA合成，D錯誤。
故答案為：BC
（3）根據(jù)教材內(nèi)容，選擇出雜交瘤細胞后，還需要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。
（4）由于人們對動物細胞所需要的營養(yǎng)物質(zhì)沒有完全搞清楚，因此在雜交瘤細胞（動物細胞）的體外培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加血清、血漿等一些天然物質(zhì)。雜交瘤技術制備單克隆抗體的最大優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備。
【分析】細胞融合方法有物理法、聚乙二醇的化學法、生物法)滅活的病毒。
單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。
23．（2024高二下·南湖月考） 如圖表示畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，請分析回答下列有關問題：
（1）過程①技術為　 　。
（2）過程②常用　 　激素處理，目的是使B牛　 　。
（3）自然條件下，A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過相應的生理變化后，才能與B牛的卵細胞結合，完成受精作用，這個過程叫　 　。完成受精的實質(zhì)是　 　。
（4）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育優(yōu)良種牛的本質(zhì)區(qū)別是　 　。
【答案】（1）動物體細胞核移植技術
（2）促性腺；超數(shù)排卵
（3）精子獲能；精核和卵核的融合
（4）方法Ⅰ的培育為有性生殖過程，方法Ⅱ的培育為無性生殖過程
【知識點】動物細胞核移植技術；胚胎工程的概念及其技術
【解析】【解答】（1）①過程將去核卵母細胞和良種奶牛的細胞核融合得到重組胚胎，故該技術為動物體細胞核移植技術。
（2）過程②為獲得更多的卵子，常需要用促性腺激素處理，可使B牛超數(shù)排卵。
（3）A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過相應的生理變化后，才具備受精的能力，才能與B牛的卵子結合完成受精作用，這個過程叫精子獲能。完成受精的實質(zhì)是精核與卵核融合，即受精完成的標志是精核與卵核融合。
（4）方法提是采用體外受精技術獲得試管牛E，方法II是采用核移植技術獲得克隆牛F，因此兩者培育優(yōu)良種牛的本質(zhì)區(qū)別是方法l的培育為有性生殖過程，方法II的培育為無性生殖過程。
【分析】胚胎工程培育牛：
動物細胞核移植：
24．（2024高二下·南湖月考） 研究發(fā)現(xiàn)人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科學家培育出轉(zhuǎn)人溶菌酶基因山羊，以大規(guī)模生產(chǎn)人溶菌酶(從乳汁中提取)，過程如圖所示。其中編號①～⑨表示過程；質(zhì)粒S中的基因Leu通過控制相關酶的合成而影響亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊細胞維持生命活動必不可少的一種必需氨基酸)，基因GFP控制合成綠色熒光蛋白。四種限制酶的識別序列及切割位點見下表。請回答下列問題：
限制酶 BamHⅠ BglⅡ HindⅢ XbaⅠ
識別序列和切割位點 G↓GATCC A↓GATCT A↓AGCTT T↓CTAGA
（1）過程①通過PCR技術擴增A，需要的酶是　 　；過程②需要的限制酶是　 　。
（2）為成功篩選出含重組質(zhì)粒T的成纖維細胞，質(zhì)粒S中用作標記基因的是　 　。為達到篩選目的，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分中應不含有　 　。將成纖維細胞培養(yǎng)一段時間后觀察，篩選出　 　(填“顯示”或“不顯示”)綠色熒光的細胞用于過程⑤。
（3）過程④常用　 　法，過程⑨為　 　。
【答案】（1）Taq酶；BamHⅠ、Hind III
（2）基因Leu、基因GFP；亮氨酸；不顯示
（3）顯微注射；胚胎移植
【知識點】PCR技術的基本操作和應用；基因工程的操作程序（詳細）
25．（2024高二下·南湖月考） 科學家將HPV16（人乳頭瘤病毒）Ll基因?qū)霟煵荩棉D(zhuǎn)基因煙草作為生物反應器，生產(chǎn)出純度較高的HPV16的L1蛋白。請回答：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因煙草的核心是　 　，該過程用兩種酶進行酶切的優(yōu)點是　 　。
（2）可利用農(nóng)桿菌侵染切割的煙草葉片，切割的目的是　 　。
（3）與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時，可根據(jù)實際情況適當添加　 　，促進叢狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織，并進一步分化形成　 　，最終形成根。
（4）經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用　 　擴增相關基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。也可以用　 　法檢測再生植株是否表達出相應的L1蛋白。
（5）利用轉(zhuǎn)基因煙草植株生產(chǎn)的L1蛋白在醫(yī)學或生物工程領域的用途：　 　。（寫出1項即可）
【答案】（1）構建重組DNA；防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化/防止目的基因與質(zhì)粒反向連接
（2）便于農(nóng)桿菌入侵植物組織
（3）生長素；根的分生組織
（4）PCR技術；抗原-抗體雜交
（5）利用L1蛋白作為抗原制備單克隆抗體、制備疫苗等
【知識點】PCR技術的基本操作和應用；基因工程的基本操作程序
【解析】【解答】（1）獲得轉(zhuǎn)基因煙草的核心步驟是基因表達載體的構建即構建重組DNA，為防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化/防止目的基因與質(zhì)粒反向連接，該過程一般用兩種酶進行酶切。
（2）可利用農(nóng)桿菌侵染切割的煙草葉片，切割的目的是便于農(nóng)桿菌入侵植物組織。
（3）由于在再分化過程中，生長素與細胞分裂素的比例增大，有利于根的形成，所以與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時，可根據(jù)實際情況適當添加生長素，促進從狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織，并進一步分化形成根的分生組織，最終形成根。
（4）提取再生植株的DNA，采用PCR技術可擴增相關基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。也可以用抗原-抗體雜交法檢測再生植株是否表達出相應的L1蛋白。
（5）利用轉(zhuǎn)基因煙草植株生產(chǎn)的L1蛋白在醫(yī)學或生物工程領域的用途：利用L1蛋白作為抗原制備單克隆抗體、制備疫苗等。
【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
1 / 1浙江省嘉興市第五高級名校2023-2024學年高二下學期4月月考生物學試卷
1．（2024高二下·南湖月考） 細菌培養(yǎng)基常在121℃條件下高壓滅菌鍋中滅菌。如果只是在100℃條件下將細菌培養(yǎng)基滅菌，下列生物仍會存活的是（　　）
A．大腸桿菌 B．一種青霉菌
C．枯草芽孢桿菌的芽孢 D．沙門氏菌
2．（2024高二下·南湖月考） 下列關于培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是（　　）
A．液體培養(yǎng)基常用于大規(guī)模快速繁殖某種微生物
B．固體培養(yǎng)基表面的微生物生長速度比在液體培養(yǎng)基中快
C．平板固體培養(yǎng)基常用于觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落
D．斜面固體培養(yǎng)基常用于菌種保存
3．（2024高二下·南湖月考）獲取純凈的微生物培養(yǎng)物是發(fā)酵工程的基礎。下列敘述錯誤的是（　　）
A．獲取純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染
B．稀釋涂布平板法和顯微鏡計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法
C．平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常用方法
D．接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為純培養(yǎng)物
4．（2024高二下·南湖月考） 下列關于發(fā)酵工程的敘述，正確的是（　　）
A．篩選出高產(chǎn)檸檬酸的黑曲霉菌種后可直接接種到發(fā)酵罐中進行發(fā)酵生產(chǎn)
B．確定菌種之后，才能選擇原料配制培養(yǎng)基
C．分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)
D．如果發(fā)酵產(chǎn)品是代謝物，可采用過濾、沉淀等方法加以分離
5．（2024高二下·南湖月考） 紹興是黃酒之鄉(xiāng)，“麥曲酶長，酵米復芳；白梅酒釀，伴淋寒香；壓濾瓊漿，煎煮陳藏”是對紹興黃酒精致復雜釀造工藝的描述。在黃酒的主發(fā)酵過程中，“開耙”（攪拌）是極為關鍵的一步。下列相關敘述錯誤的是（　　）
A．接種麥曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒釀”菌種發(fā)酵
B．煎煮的目的是除去發(fā)酵產(chǎn)品中的雜菌，利于酵母菌繁殖
C．陳藏有利于黃酒中醇與酸發(fā)生酯化反應，使酒更加芳香
D．發(fā)酵過程中“開耙”可適當提供O2，促進酵母菌繁殖
6．（2024高二下·南湖月考） 圖示為分離以尿素為氮源的微生物實驗的其中一個培養(yǎng)皿上的實驗結果。培養(yǎng)基中加了酚紅，圖中的陰影部分實際為紅色。下列對結果的分析正確的是（　　）
A．菌落A能產(chǎn)生分解尿素的脲酶
B．菌落C利用尿素的能力大于菌落B
C．尿素為微生物提供了碳源和氮源
D．尿素分解產(chǎn)生NH3都排出細胞
7．（2024高二下·南湖月考） 下列關于植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（　　）
A．體細胞胚、芽可用于制作人工種子
B．菊花莖段在生根培養(yǎng)基上獲得叢狀苗，然后再進行分株培養(yǎng)
C．植物愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導劑，可獲得染色體加倍的細胞
D．愈傷組織發(fā)育成胚狀體的過程是器官發(fā)生途徑
8．（2024高二下·南湖月考） 如圖表示培養(yǎng)煙草葉肉細胞原生質(zhì)體進行遺傳改良的過程，據(jù)圖分析錯誤的是（　　）
A．可用紅墨水染色的方法檢測原生質(zhì)體有無活性
B．①過程需在一定濃度的甘露醇溶液中用纖維素酶和果膠酶處理
C．④過程要求生長素與細胞分裂素比例合適
D．上述過程中可發(fā)生染色體變異、基因突變和基因重組
9．（2024高二下·南湖月考）植物組織培養(yǎng)在植物生產(chǎn)領域有著廣泛的應用。下列敘述錯誤的是（　　）
A．初代培養(yǎng)物培養(yǎng)至一定時間可進行繼代培養(yǎng)
B．從植物生長點取外植體進行組培可獲得脫毒植株
C．生產(chǎn)人工種子的體細胞胚一定是由愈傷組織分化而來
D．利用發(fā)酵罐大規(guī)模培養(yǎng)植物細胞可用于細胞代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)
10．（2024高二下·南湖月考）Bcl-2基因是細胞凋亡抑制基因，可以利用PCR技術檢測其轉(zhuǎn)錄水平，進而了解該基因與不同胚胎時期細胞凋亡的關系。如圖為克隆豬的培育及Bcl-2基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程，下列說法錯誤的是（　　）
A．圖中A細胞表示去核的卵母細胞，B細胞表示體細胞
B．在早期胚胎發(fā)育的不同時期提取的總mRNA是不同的
C．圖中過程X表示逆轉(zhuǎn)錄，獲得的cDNA可用于克隆豬基因組的測序
D．在PCR過程中，（Bcl-2 cDNA）/cDNA的比值反映Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平
11．（2024高二下·南湖月考） 鼠源單克隆抗體制備的基本過程如下圖所示。下列關于鼠源單克隆抗體制備的敘述，錯誤的是（　　）
A．小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白，以提高相應B細胞數(shù)量
B．在HAT培養(yǎng)基上能生長的細胞不一定能產(chǎn)生所需的抗體
C．克隆化培養(yǎng)過程中篩選抗體檢驗陽性的細胞以進行大規(guī)模培養(yǎng)
D．可將雜交瘤細胞注入小鼠血液中實現(xiàn)單克隆抗體的大規(guī)模生產(chǎn)
12．（2024高二下·南湖月考） 下圖是利用體細胞核移植技術克隆高產(chǎn)奶牛的流程圖，①～⑤表示相應操作。
下列關于早期胚胎形成過程的敘述，正確的是（　　）
A．過程①常對雌牛甲進行超數(shù)排卵處理
B．過程②獲取的體細胞可以是成熟的紅細胞
C．過程③獲得的重組細胞中含有4個染色體組
D．過程④需要構建抑制細胞分化的培養(yǎng)體系
13．（2024高二下·南湖月考）下圖為雜交瘤細胞的制備及初步篩選示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。免疫B細胞（HGPRT+）能在HAT篩選培養(yǎng)液中正常生長。下列敘述正確的是（　　）
A．從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體即為單克隆抗體
B．仙臺病毒處理可使細胞膜發(fā)生一定程度的損傷，進而促進細胞融合
C．在HAT培養(yǎng)液中能長期存活的細胞具有特異性強、靈敏度高的特點
D．多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能合成DNA
14．（2024高二下·南湖月考） 下列有關基因工程基本操作程序的敘述，正確的是（　　）
A．目的基因檢測時所用的核酸探針是指與目的基因相同的特定雙鏈DNA
B．基因組文庫的基因含有某物種的部分基因
C．若基因比較小且核苷酸序列已知，則可直接通過化學方法合成
D．抗生素合成基因作為標記基因，可鑒別目的基因是否導入受體細胞
15．（2024高二下·南湖月考）下圖為真核生物核基因結構模式圖，下列敘述正確的是（　　）
A．啟動子編碼起始密碼子
B．cDNA文庫和基因組文庫的基因中均含有內(nèi)含子
C．在轉(zhuǎn)錄完成后，RNA聚合酶從c~d區(qū)段脫落下來
D．細胞內(nèi)DNA復制時，只復制編碼區(qū)，不復制非編碼區(qū)
16．（2024高二下·南湖月考）研究人員利用農(nóng)桿菌將外源基因A導入到水稻細胞中，然后通過植物組織培養(yǎng)技術獲得了含有外源基因A的第一代水稻植株。圖為重組Ti質(zhì)粒示意圖。下列敘述錯誤的是（　　）
A．外源基因A必須整合在T-DNA片段內(nèi)
B．培養(yǎng)水稻細胞時需添加潮霉素進行篩選
C．水稻的組織培養(yǎng)過程中需調(diào)整植物激素的比例
D．第一代水稻植株中存在不含外源基因A的細胞
17．（2024高二下·南湖月考） 染色質(zhì)是由一定長度的核小體為基本單位構成的。將大鼠肝細胞中分離出的染色質(zhì)用非特異性核酸酶水解后去除染色質(zhì)蛋白，對得到的DNA片段進行凝膠電泳，結果如圖所示。若先將染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)去掉后用同樣的非特異性核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段。據(jù)此分析，下列有關敘述錯誤的是（　　）
A．凝膠中的DNA分子通過染色，可以被檢測出來
B．染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)可能對DNA具有保護作用
C．構成核小體的基本單位是脫氧核糖核苷酸
D．在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構象等有關
18．（2024高二下·南湖月考） “篩選”是生物工程中常用的技術手段，下列敘述正確的是（　　）
A．基因工程中通過標記基因篩選出的細胞一定都含有重組質(zhì)粒
B．在誘變育種中需要通過篩選才能得到數(shù)量較多的有利變異
C．植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的雜種細胞需進行篩選
D．單克隆抗體制備過程中對雜交瘤細胞進行一次抗體檢驗即可大量獲得陽性細胞克隆
19．（2024高二下·南湖月考） 實時熒光定量PCR可用于對樣品中特定DNA序列進行定量分析。將熒光標記的Taqman探針與待測樣本DNA混合，當探針完整時，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，在特定光的激發(fā)下R發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光信號強度增加，通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值(達到熒光閾值所經(jīng)歷的循環(huán)次數(shù))。下列相關敘述正確的是（　　）
A．熒光基因R連接在探針的3’端
B．該反應體系中并未加入ATP，所以新鏈的合成不需要消耗能量
C．TaqDNA聚合酶在該反應中的作用是合成磷酸二酯鍵
D．Ct值越小，說明樣品中特定DNA序列的含量越多
20．（2024高二下·南湖月考） 下列關于生物武器的敘述，不正確的是（　　）
A．生物武器造價昂貴，但卻是具有大規(guī)模殺傷性的武器
B．生物武器中起傷害作用的微生物、毒素稱為生物戰(zhàn)劑
C．生物武器可以直接或者間接通過食物、生活必需品等散布
D．生物武器一旦使用，將對軍隊和平民造成大規(guī)模的殺傷后果
21．（2024高二下·南湖月考） 飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的磷酸鈣，很難被動物吸收利用。若在飼料中添加磷酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從土壤中分離產(chǎn)磷酸酶細菌菌株的過程示意圖。回答下列問題：
（1）為了解土壤中產(chǎn)磷酸酶的細菌數(shù)量，取10 g土壤加入90 mL無菌水，制備成細菌懸液，經(jīng)　 　后，獲得細胞密度不同的細菌懸液。若將最后一個試管中的菌液每次吸取0.1 mL涂布到三個培養(yǎng)基。一段時間后，菌落數(shù)分別是168、175、167個，則10 g土壤中含有此菌的菌體數(shù)是　 　。
（2）制備產(chǎn)磷酸酶的細菌菌株初篩平板時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至　 　，滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無菌磷酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入磷磷鈣的目的是　 　，達到檢測菌種分泌磷酸酶的能力。實驗結果顯示A～E五種菌株中，　 　是產(chǎn)磷酸酶最理想的菌株。
22．（2024高二下·南湖月考）通過動物細胞融合技術可以制備雜交瘤細胞，對健康的實驗小鼠進行腹腔內(nèi)免疫，一周后取小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選。
（1）動物細胞融合一般用　 　進行生物誘導。
（2）正常細胞合成DNA有兩條途徑：a通路和b通路。骨髓瘤細胞是DNA合成b通路的缺陷型細胞株，讓B淋巴細胞與其融合，再在加入DNA合成a通路阻斷劑(氨基蝶呤)的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，這種培養(yǎng)會產(chǎn)生以下哪些效果____。
A．促進細胞融合 B．淘汰B淋巴細胞
C．淘汰骨髓瘤細胞 D．阻斷雜交細胞DNA合成
（3）經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需要進行　 　和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。
（4）雜交瘤細胞體外培養(yǎng)過程　 　 (填“是”或“否”)需要添加血清。試分析原因　 　，通過雜交瘤細胞獲得的單克隆抗體的最大優(yōu)點是　 　。
23．（2024高二下·南湖月考） 如圖表示畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，請分析回答下列有關問題：
（1）過程①技術為　 　。
（2）過程②常用　 　激素處理，目的是使B牛　 　。
（3）自然條件下，A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過相應的生理變化后，才能與B牛的卵細胞結合，完成受精作用，這個過程叫　 　。完成受精的實質(zhì)是　 　。
（4）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育優(yōu)良種牛的本質(zhì)區(qū)別是　 　。
24．（2024高二下·南湖月考） 研究發(fā)現(xiàn)人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科學家培育出轉(zhuǎn)人溶菌酶基因山羊，以大規(guī)模生產(chǎn)人溶菌酶(從乳汁中提取)，過程如圖所示。其中編號①～⑨表示過程；質(zhì)粒S中的基因Leu通過控制相關酶的合成而影響亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊細胞維持生命活動必不可少的一種必需氨基酸)，基因GFP控制合成綠色熒光蛋白。四種限制酶的識別序列及切割位點見下表。請回答下列問題：
限制酶 BamHⅠ BglⅡ HindⅢ XbaⅠ
識別序列和切割位點 G↓GATCC A↓GATCT A↓AGCTT T↓CTAGA
（1）過程①通過PCR技術擴增A，需要的酶是　 　；過程②需要的限制酶是　 　。
（2）為成功篩選出含重組質(zhì)粒T的成纖維細胞，質(zhì)粒S中用作標記基因的是　 　。為達到篩選目的，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分中應不含有　 　。將成纖維細胞培養(yǎng)一段時間后觀察，篩選出　 　(填“顯示”或“不顯示”)綠色熒光的細胞用于過程⑤。
（3）過程④常用　 　法，過程⑨為　 　。
25．（2024高二下·南湖月考） 科學家將HPV16（人乳頭瘤病毒）Ll基因?qū)霟煵荩棉D(zhuǎn)基因煙草作為生物反應器，生產(chǎn)出純度較高的HPV16的L1蛋白。請回答：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因煙草的核心是　 　，該過程用兩種酶進行酶切的優(yōu)點是　 　。
（2）可利用農(nóng)桿菌侵染切割的煙草葉片，切割的目的是　 　。
（3）與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時，可根據(jù)實際情況適當添加　 　，促進叢狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織，并進一步分化形成　 　，最終形成根。
（4）經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用　 　擴增相關基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。也可以用　 　法檢測再生植株是否表達出相應的L1蛋白。
（5）利用轉(zhuǎn)基因煙草植株生產(chǎn)的L1蛋白在醫(yī)學或生物工程領域的用途：　 　。（寫出1項即可）
答案解析部分
1．【答案】C
【知識點】滅菌技術
【解析】【解答】大腸桿菌、青霉菌、沙門氏菌不能形成芽孢，在100℃溫度下可以滅活，而枯草芽孢桿菌能形成芽孢，抵抗高溫的能力強，在100℃溫度下仍可能存活。分析得知C正確，ABD錯誤。
故答案為：C
【分析】常用的滅菌方法有干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法等。芽孢桿菌能形成芽孢（內(nèi)生孢子）， 對外界有害因子的抵抗力強，需要高溫高壓處理一定時間才能將其殺死。
2．【答案】B
【知識點】培養(yǎng)基概述及其分類
【解析】【解答】AB、液體培養(yǎng)基中不含凝固劑，可以增大微生物與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，故可用于大規(guī)模繁殖某種微生物，固體培養(yǎng)基表面的微生物生長速度比在液體培養(yǎng)基中慢，A正確，B錯誤；
C、常用平板固體培養(yǎng)基接種后觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落，C正確；
D、斜面固體培養(yǎng)基常用于菌種保存，D正確。
故答案為：B
【分析】微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見菌落，平板固體培養(yǎng)基常用于觀察由單個細胞生長繁殖成的菌落。
培養(yǎng)基的成分有水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子等。根據(jù)培養(yǎng)基的化學成分可以把培養(yǎng)基分成合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基等。天然培養(yǎng)基與合成培養(yǎng)基相比成本較低，除了在實驗室常用外，更多地被用于大規(guī)模的生物發(fā)酵工業(yè)。
3．【答案】D
【知識點】微生物的分離和培養(yǎng)；測定某種微生物的數(shù)量；滅菌技術
【解析】【解答】A、獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是無菌技術，即防止外來雜菌的入侵，A正確；
B、測定微生物數(shù)量的常用方法有活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)法，故稀釋涂布平板法和顯微鏡計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法，B正確；
C、實驗室中進行微生物分離和純化最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，C正確；
D、純培養(yǎng)物是由單一個體繁殖所獲得的微生物群體，特定種類微生物的群體不一定是由單一個體繁殖而來，D錯誤。
故答案為：D。
【分析】1、接種微生物常用的兩種方法：
（1）平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。
（2）稀釋涂布平板法則是菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。
2、將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含有特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。
4．【答案】B
【知識點】微生物發(fā)酵及其應用
【解析】【解答】A、篩選出高產(chǎn)檸檬酸的黑曲霉菌種后需進行擴大培養(yǎng)，再接種到發(fā)酵罐中進行發(fā)酵生產(chǎn)，A錯誤；
B、不同菌種代謝的特點不同，所需的原料也不同，因此確定菌種之后，才能選擇原料配制培養(yǎng)基，B正確；
C、發(fā)酵過程是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，發(fā)酵過程中需要隨時取樣檢測培養(yǎng)液中的細菌數(shù)目、產(chǎn)物濃度等，還要及時添加必需的培養(yǎng)基組分，以滿足菌種的營養(yǎng)需要。同時還要嚴格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件，C錯誤；
D、發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品有兩類，一類是代謝產(chǎn)物，另一類是菌體本身。產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。如果產(chǎn)品是菌體，可采用過濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來；如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進行提取，D錯誤。
故答案為：B
【分析】
發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術，規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品。它涉及菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等方面。具體包括菌種的選育、擴大培養(yǎng)、培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等環(huán)節(jié)。
5．【答案】B
【知識點】微生物發(fā)酵及其應用；果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、淀粉屬于生物大分子物質(zhì)d，淀粉糖化為小分子糖有利于發(fā)酵過程中酵母菌對糖類的利用，A正確；
B、煎煮是進行消毒，除去發(fā)酵產(chǎn)品中的酵母菌等微生物，利于酒的儲藏，B錯誤；
C、陳儲”是將榨出的酒放入罐內(nèi)存放，有利于黃酒中醇與酸發(fā)生酯化反應，使酒更加芳香，C正確；
D、發(fā)酵過程中“開耙”是為了增加O2的含量，讓酵母菌進行有氧呼吸，增加酵母菌的數(shù)量，有利于活化酵母，D正確。
故答案為：B
【分析】
6．【答案】B
【知識點】尿素分解菌的分離與計數(shù)
【解析】【解答】A、培養(yǎng)基中加了酚紅，圖中的陰影部分實際為紅色，菌落A周圍沒有紅色圈，因此菌落A不能產(chǎn)生分解尿素的脲酶，A錯誤；
B、脲酶催化尿素的分解，產(chǎn)生氨，與酚紅反應呈紅色，菌落C周圍的紅色圈大于菌落B周圍，因此因此菌落C利用尿素的能力大于菌落B，B正確；
C、尿素為微生物提供氮源，培養(yǎng)基中的葡萄糖提供碳源，C錯誤；
D、尿素分解產(chǎn)生NH3也可被植物細胞利用，D錯誤。
故答案為：B
【分析】尿素分離：
7．【答案】A
【知識點】植物組織培養(yǎng)的過程
【解析】【解答】A、人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，體細胞胚、芽可用于制作人工種子，A正確；
B、菊花莖段在生芽培養(yǎng)基中生長的叢狀苗分株后，在無菌條件下一個個轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，B錯誤；
C、植物細胞融合時必須先去除細胞壁，然后加入誘導劑才能促使細胞融合，所以在愈傷組織（其細胞含有細胞壁）培養(yǎng)中直接加入細胞融合的誘導劑，不能導致細胞融合，無法獲得染色體加倍的細胞，C錯誤；
D、胚性細胞發(fā)育成胚狀體的過程是胚胎發(fā)生途徑，經(jīng)過器官發(fā)生和形態(tài)建成，D錯誤。
故答案為：A
【分析】
植物組織培養(yǎng)：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。
8．【答案】D
【知識點】植物組織培養(yǎng)的過程
【解析】【解答】A、細胞膜具有選擇透過性，即活細胞不能被染色，死細胞可被染色，因此可用染色排除法檢測原生質(zhì)體有無活性，A正確；
B、①為去壁過程，過程需在一定濃度的甘露醇溶液中用纖維素酶和果膠酶處理，其中甘露醇的作用是維持一定的滲透壓，B正確；
C、④為再分化過程，該過程需要生長素和細胞分裂素比例合適，C正確；
D、上述過程中細胞通過有絲分裂方式增殖，可以發(fā)生染色體變異和基因突變，但不會發(fā)生基因重組（只發(fā)生在減數(shù)分裂過程中），D錯誤。
故答案為：D
【分析】植物組織培養(yǎng)：
圖示表示對煙草葉肉細胞進行遺傳改良的過程，其中①表示去壁過程，常用酶解法；②表示用紫外線照射進行人工誘變；③表示脫分化過程；④表示再分化過程。
9．【答案】C
【知識點】植物組織培養(yǎng)的過程
【解析】【解答】A、試管苗在初代培養(yǎng)一段時間后營養(yǎng)物質(zhì)消耗殆盡，代謝廢物積累，因而需要繼代培養(yǎng)，A正確；
B、植物生長點不易感染病毒，從植物生長點取外植體進行組培可獲得脫毒植株，B正確；
C、生產(chǎn)人工種子的體細胞胚不一定都是由愈傷組織分化而來，如外植體上直接分化出胚狀體，C錯誤；
D、利用發(fā)酵罐大規(guī)模培養(yǎng)植物細胞可在愈傷組織中獲取細胞產(chǎn)物，D正確。
故答案為：C。
【分析】植物組織培養(yǎng)的流程為：外植體經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，長出芽和根，進而發(fā)育成完整的植株。
10．【答案】C
【知識點】動物細胞核移植技術
【解析】【解答】A、圖中A細胞為核移植的受體細胞，應該為去核的卵母細胞，B為提供細胞核的體細胞，A正確；
B、由于基因的選擇性表達，因此在早期胚胎發(fā)育的不同時期提取的總mRNA是不同的，B正確；
C、mRNA→cDNA的過程表示逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程獲得的cDNA中沒有啟動子、內(nèi)含子等，不能用于克隆豬基因組的測序，C錯誤；
D、在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù)，進而計算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平，D正確。
故答案為：C。
【分析】1、 體細胞核移植技術 ：將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。原理是動物細胞核的全能性。
2、體細胞核移植過程：
3、體細胞核移植的應用：a、加速家畜的遺傳改良進程，促進優(yōu)良種群繁育；b、轉(zhuǎn)基因克隆動物做生物反應器，生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；c、克隆動物的組織、器官做移植的供體；d、研究克隆動物和克隆細胞可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程。
4、體細胞核移植技術存在的問題：（1）胚胎成活率低；（2）動物健康存在問題；（3）克隆動物食品的安全性問題。
11．【答案】D
【知識點】單克隆抗體的制備過程
【解析】【解答】A、小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白，反復的抗原刺激能多次刺激記憶B細胞，促使其增殖、分化為漿細胞，漿細胞產(chǎn)生抗體，A正確；
B、在HAT培養(yǎng)基上能生長的細胞既能無限增殖、又能產(chǎn)生抗體，由于從小鼠中提取的B細胞有多種，此時在HAT培養(yǎng)基上能生長的細胞，不一定能產(chǎn)生所需的抗體，B正確；
C、克隆化培養(yǎng)過程中，進行專一抗體檢測，從而篩選抗體檢驗陽性的細胞以進行大規(guī)模培養(yǎng)，C正確；
D、可將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔中，在小鼠腹腔中增殖進而從腹水中提取單克隆抗體，實現(xiàn)單克隆抗體的大規(guī)模生產(chǎn)，D錯誤。
故答案為：D
【分析】 單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。
12．【答案】A
【知識點】動物細胞核移植技術
【解析】【解答】A、過程①常對雌牛甲用外源促性腺激素進行超數(shù)排卵處理，A正確；
B、過程②獲取的體細胞要提供細胞核，哺乳動物成熟紅細胞沒有細胞核，B錯誤；
C、過程③是將體細胞注入去核卵母細胞內(nèi)，所以只有2個染色體組，C錯誤；
D、過程④進行早期胚胎培養(yǎng)不需要抑制細胞分化，D錯誤
故答案為：A
【分析】
13．【答案】B
【知識點】單克隆抗體的制備過程
【解析】【解答】A、在HAT培養(yǎng)液中篩選出來的是雜交瘤細胞，可能有多種類型，因此后續(xù)還需要對這些雜交瘤細胞進行單一抗體檢測，進而篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，可見從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體不是單克隆抗體，A錯誤；
B、仙臺病毒處理可使細胞膜發(fā)生一定程度的損傷，進而促進細胞融合，據(jù)此可用滅活的仙臺病毒作為促融劑，B正確；
C、在HAT培養(yǎng)液中能長期存活的細胞為雜交瘤細胞，這些細胞可能產(chǎn)生多種類型的抗體，因而不具有特異性強、靈敏度高的特點，C錯誤；
D、多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能無限增殖，D錯誤。
故答案為：B。
【分析】1、動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性、細胞的增殖，誘導手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產(chǎn)性雜交細胞，主要用于制備單克隆抗體。
2、單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合；③動物細胞培養(yǎng)技術：對雜交瘤細胞進行體內(nèi)、體外培養(yǎng)。
3、制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖；②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。
14．【答案】C
【知識點】基因工程的基本操作程序
【解析】【解答】A、DNA探針是指用放射性同位素或熒光分子標記的DNA單鏈，利用堿基互補配對原則，檢測目的基因是否導入受體細胞中，A錯誤；
B、基因組文庫的基因含有某物種的全部基因，cDNA文庫的基因含有某物種的部分基因，B錯誤；
C、若基因比較小且核苷酸序列已知，則可直接通過人工合成的方法獲取，C正確；
D、運載體上的抗生素抗性基因作為標記基因，可用于檢測目的基因是否導入受體細胞，D錯誤。
故答案為：C
【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
15．【答案】C
【知識點】DNA分子的結構
【解析】【解答】A、結合題圖可知啟動子位于非編碼區(qū)，不會轉(zhuǎn)錄，所以啟動子無法編碼起始密碼子，A錯誤；
B、基因組文庫中含有內(nèi)含子，cDNA文庫中不含內(nèi)含子，B錯誤； C、RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮作用，終止子終止轉(zhuǎn)錄過程，所以在轉(zhuǎn)錄完成后，RNA聚合酶從c~d區(qū)段脫落下來，C正確； D、DNA復制時編碼區(qū)和非編碼區(qū)都會完整復制，但是基因轉(zhuǎn)錄只轉(zhuǎn)錄編碼區(qū)序列，D錯誤。
故答案為：C。
【分析】 原核生物的DNA的編碼區(qū)是連續(xù)的，真核生物DNA的編碼區(qū)是間斷的，即真核生物的DNA的編碼區(qū)有內(nèi)含子和外顯子，復制時同時復制內(nèi)含子和外顯子。原核生物的DNA的編碼區(qū)沒有內(nèi)含子和外顯子一說，全部是有遺傳意義的片段，是完全翻譯。
16．【答案】B
【知識點】基因工程的基本工具（詳細）
【解析】【解答】A、Ti質(zhì)粒的T-DNA片段可以整合在受體細胞的染色體DNA中，故外源基因A必須整合在T-DNA片段內(nèi)，A正確；
B、質(zhì)粒中的潮霉素抗性基因用于篩選導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，故培養(yǎng)水稻細胞時不需要添加潮霉素進行篩選，B錯誤；
C、水稻組織培養(yǎng)過程中需調(diào)節(jié)植物激素的種類和比例，以保證愈傷組織再分化并得到完整的植株，C正確；
D、第一代水稻植株進行減數(shù)分裂時，同源染色體分離，產(chǎn)生的配子細胞可能不含有外源基因A，D正確。
故答案為：B。
【分析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的）
1、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的具體過程：
（1）利用土壤的Ti質(zhì)粒構建基因表達載體，即將目的基因整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上。
（2）將整合了目的基因的Ti質(zhì)粒導入土壤農(nóng)桿菌細胞內(nèi)。
（3）利用土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞，該過程實際上是將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導入植物細胞內(nèi)。
（4）含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒進入植物細胞后，可以把自己的一段基因整合到細胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因。
2、原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。
3、農(nóng)桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。
4、轉(zhuǎn)化：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上 農(nóng)桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。
17．【答案】C
【知識點】PCR技術的基本操作和應用
【解析】【解答】A、凝膠中的DNA分子經(jīng)染色后，對波長為300nm的紫外光吸收性強，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，A正確；
B、染色質(zhì)用核酸酶處理后得到的是部分水解的染色質(zhì)，但若先將染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)去掉后用核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段，說明染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)可能對DNA具有保護作用，B正確；
C、染色質(zhì)是由一定長度的核小體為基本單位構成的，核小體的組成成分是蛋白質(zhì)和DNA，其基本單位是脫氧核糖核苷酸和氨基酸，C錯誤；
D、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構象等有關，D正確。
故答案為：C
【分析】染色質(zhì)是指間期細胞核內(nèi)由DNA、組蛋白、非組蛋白及少量RNA組成的線性復合結構，是間期細胞遺傳物質(zhì)存在的形式。在有絲分裂或減數(shù)分裂過程中，染色質(zhì)會聚縮成棒狀結構，形成染色體。染色質(zhì)和染色體實際上是同一種物質(zhì)在不同細胞周期階段的兩種表現(xiàn)形式，化學組成相同但構型不同。在真核細胞的細胞周期中，大部分時間是以染色質(zhì)的形態(tài)存在。
18．【答案】C
【知識點】誘變育種；植物體細胞雜交的過程及應用；單克隆抗體的制備過程；基因工程的基本操作程序
【解析】【解答】A、基因工程中通過標記基因篩選出的細胞不一定都含有重組質(zhì)粒，也可能含有普通質(zhì)粒，A錯誤；
B、誘變育種的原理是基因突變，基因突變具有多害少利性，因此在誘變育種中需要通過篩選才能得到數(shù)量較少的有利變異，B錯誤；
C、植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的雜種細胞需進行篩選，C正確；
D、單克隆抗體制備過程中對雜交瘤細胞進行一次抗體檢驗后只能獲得少量陽性細胞克隆，D錯誤。
故答案為：C
【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。
19．【答案】D
【知識點】PCR技術的基本操作和應用
【解析】【解答】A、引物使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，即熒光基因R連接在探針的5’端，A錯誤；
B、 在反應過程中，dNTP為新鏈的合成提供能量，即新鏈的合成需要消耗能量，B錯誤；
C、TaqDNA聚合酶能夠催化脫氧核苷酸在DNA的3'端延伸，C錯誤；
D、 若熒光信號達到設定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴增次數(shù)少，故Ct值越小，說明樣品中特定DNA序列的含量越多，D正確。
故答案為：D。
【分析】 PCR技術：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。
2、原理：DNA復制。
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、PCR反應過程是：變性→復性→延伸
過程 說明
變性 當溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈
復性 溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合
延伸 72℃左右時，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新鏈由5'端向3'端延伸
6、結果：上述三步反應完成后，一個DNA分子就變成了兩個DNA分子，隨著重復次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應過程都是在PCR擴增儀中完成的。
20．【答案】A
【知識點】生物武器
【解析】【解答】A、生物武器包括病毒、病菌、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，與常規(guī)武器相比，生物武器成本低廉、容易獲得，A錯誤；
B、生物武器包括致病菌，病毒.生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，其中起傷害作用的微生物、毒素稱為生物戰(zhàn)劑，B正確；
C、生物武器可是生物或生物產(chǎn)物，可直接或間接通過生物必需品等進行散布，C正確；
D、生物武器傳播快，毒性大，可以對軍隊或平民造成大規(guī)模殺傷后果，D正確。
故答案為：A
【分析】生物武器包括致病菌，病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，生物武器中使用的病原菌有可能會通過食物、生活必需品等散布，造成殺傷性后果，因此要禁止生物武器。
生物武器的特點：單位面積效應大；有特定的傷害對象；具有傳染性；危害時間久；不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；使用者本身易受傷害；生物武器造價低，技術難度不大，隱秘性強，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。
21．【答案】（1）（系列）梯度稀釋；1.7×108
（2）中性或微堿性；使培養(yǎng)基不透明，從而培養(yǎng)形成的產(chǎn)植酸酶菌落的周圍形成透明圈；E
【知識點】微生物的分離和培養(yǎng)；培養(yǎng)基對微生物的選擇作用
【解析】【解答】（1）10g土壤樣品轉(zhuǎn)入90mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)（系列）梯度稀釋后，分別取0.1mL茵懸液涂布在固體培養(yǎng)基上。茵落計數(shù)時為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù)。菌液稀釋了104倍，取液0.1mL，根據(jù)計算公式10g土壤樣品中此菌數(shù)量=（168+175+167）÷3÷0.1×104×10=1.7X108個。
（2）制備產(chǎn)磷酸酶的細菌菌株初篩平板時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性。固體培養(yǎng)基中加入植酸鈣會導致培養(yǎng)基不透明，微生物發(fā)酵產(chǎn)生的酶能水解植酸鈣形成透明圈，滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無菌植酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入植酸鈣的目的是使培養(yǎng)基不透明，從而使產(chǎn)植酸酶的細菌菌落周圍出現(xiàn)透明圈，方便鑒別產(chǎn)植酸酶的細菌。A~E五種菌株中，E的透明圈最大，故E是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株。
【分析】稀釋涂布平板法：

22．【答案】（1）滅活病毒
（2）B；C
（3）克隆化培養(yǎng)
（4）是；人們對動物細胞所需要的營養(yǎng)物質(zhì)沒有完全搞清楚；特異性強、靈敏度高、可大量制備
【知識點】動物細胞工程的常用技術與應用；單克隆抗體的制備過程
【解析】【解答】（1）動物細胞融合一般用滅活的病毒進行生物誘導。
（2）A、細胞融合方法有物理法、聚乙二醇的化學法、生物法（滅活的病毒），而該培養(yǎng)對細胞融合沒有影響，A錯誤；
B、B淋巴細胞的復制次數(shù)有限，不能在培養(yǎng)基上長期存活，該培養(yǎng)基能淘汰B淋巴細胞，B正確；
C、骨髓瘤細胞是b通路缺陷型，剩下的a通路被阻斷也被抑制，不能合成DNA，該培養(yǎng)基能淘汰骨髓瘤細胞，C正確；
D、加入DNA合成a通路阻斷劑后，雜交細胞還具有b通路，因此不能阻斷雜交細胞DNA合成，D錯誤。
故答案為：BC
（3）根據(jù)教材內(nèi)容，選擇出雜交瘤細胞后，還需要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。
（4）由于人們對動物細胞所需要的營養(yǎng)物質(zhì)沒有完全搞清楚，因此在雜交瘤細胞（動物細胞）的體外培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加血清、血漿等一些天然物質(zhì)。雜交瘤技術制備單克隆抗體的最大優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備。
【分析】細胞融合方法有物理法、聚乙二醇的化學法、生物法)滅活的病毒。
單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。
23．【答案】（1）動物體細胞核移植技術
（2）促性腺；超數(shù)排卵
（3）精子獲能；精核和卵核的融合
（4）方法Ⅰ的培育為有性生殖過程，方法Ⅱ的培育為無性生殖過程
【知識點】動物細胞核移植技術；胚胎工程的概念及其技術
【解析】【解答】（1）①過程將去核卵母細胞和良種奶牛的細胞核融合得到重組胚胎，故該技術為動物體細胞核移植技術。
（2）過程②為獲得更多的卵子，常需要用促性腺激素處理，可使B牛超數(shù)排卵。
（3）A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過相應的生理變化后，才具備受精的能力，才能與B牛的卵子結合完成受精作用，這個過程叫精子獲能。完成受精的實質(zhì)是精核與卵核融合，即受精完成的標志是精核與卵核融合。
（4）方法提是采用體外受精技術獲得試管牛E，方法II是采用核移植技術獲得克隆牛F，因此兩者培育優(yōu)良種牛的本質(zhì)區(qū)別是方法l的培育為有性生殖過程，方法II的培育為無性生殖過程。
【分析】胚胎工程培育牛：
動物細胞核移植：
24．【答案】（1）Taq酶；BamHⅠ、Hind III
（2）基因Leu、基因GFP；亮氨酸；不顯示
（3）顯微注射；胚胎移植
【知識點】PCR技術的基本操作和應用；基因工程的操作程序（詳細）
25．【答案】（1）構建重組DNA；防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化/防止目的基因與質(zhì)粒反向連接
（2）便于農(nóng)桿菌入侵植物組織
（3）生長素；根的分生組織
（4）PCR技術；抗原-抗體雜交
（5）利用L1蛋白作為抗原制備單克隆抗體、制備疫苗等
【知識點】PCR技術的基本操作和應用；基因工程的基本操作程序
【解析】【解答】（1）獲得轉(zhuǎn)基因煙草的核心步驟是基因表達載體的構建即構建重組DNA，為防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化/防止目的基因與質(zhì)粒反向連接，該過程一般用兩種酶進行酶切。
（2）可利用農(nóng)桿菌侵染切割的煙草葉片，切割的目的是便于農(nóng)桿菌入侵植物組織。
（3）由于在再分化過程中，生長素與細胞分裂素的比例增大，有利于根的形成，所以與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時，可根據(jù)實際情況適當添加生長素，促進從狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織，并進一步分化形成根的分生組織，最終形成根。
（4）提取再生植株的DNA，采用PCR技術可擴增相關基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。也可以用抗原-抗體雜交法檢測再生植株是否表達出相應的L1蛋白。
（5）利用轉(zhuǎn)基因煙草植株生產(chǎn)的L1蛋白在醫(yī)學或生物工程領域的用途：利用L1蛋白作為抗原制備單克隆抗體、制備疫苗等。
【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
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