資源簡介

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第二節細胞工程
第二章 細胞工程
二 動物細胞融合技術與單克隆抗體
第二課時
單克隆抗體
單克隆抗體的應用
1．為什么要號召新冠感染痊愈者捐獻自己的血漿？這樣的血漿對新冠感染患者有什么作用呢？
血漿中有新冠病毒的抗體, 可以用于治療新冠感染患者。
但一個捐獻者的200-300毫升的血漿，如果合格，一般也只能治療2-3個患者。
眾志成城 抗疫情
一、單克隆抗體
抗體：能夠與抗原發生特異性結合的免疫球蛋白
能產生抗體的細胞是漿細胞
單克隆
由一個細胞經過無性繁殖(多次有絲分裂)形成的一個細胞群
單克隆抗體
由一個漿細胞經過無性繁殖形成的一個細胞群產生的化學性質單一，特異性強的抗體
漿細胞
記憶B細胞
B淋巴細胞
增殖分化
受抗原刺激
1、抗體的傳統生產方法:
抗原
反復注射動物
從動物的血清中分離抗體
缺點：
產量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低
怎樣才能獲得大量的單一性抗體呢？
B淋巴細胞盡管可以產生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每一個B細胞只分泌一種特異性抗體
做為科學家的你，如何設計生產方案？
B淋巴細胞
骨髓瘤細胞
雜交瘤細胞
細胞
融合
G. Kohler
C. Milstein
英國科學家米爾斯坦和柯勒于1975年設計和實踐了這個想法，并獲得成功。摘得1984年諾貝爾生理及醫學獎。
能產生單一抗體
其壽命僅有幾天，無法長期體外培養
動物細胞培養技術
無限增殖
產生抗體
無限增殖
單克隆抗體的制備過程：
2、單克隆抗體制備過程：
B淋巴細胞
骨髓瘤細胞
融合
多種細胞
①B淋巴細胞培養幾天后死亡
②由于培養基中缺乏相應的營養物，骨髓瘤細胞死亡
雜交瘤細胞
選擇培養基培養
用培養液稀釋
多孔細胞培養板
陽性檢測和克隆化培養
第一次篩選：
用特定的選擇培養基篩選出多種雜交瘤細胞
第二次篩選：
篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞
注射到小鼠體內
體外培養
由單個雜交瘤細胞通過克隆，所產生的化學性質單一、特異性強的抗體
單克隆抗體
培養液
腹水
免疫原理
動物細胞融合技術
（原理：細胞膜流動性）
動物細胞培養技術
（原理：有絲分裂）
二、單克隆抗體的應用
1、特點：特異性強，靈敏度高，產量高
2、應用：
診斷試劑
準確，高效，快速
用于治療疾病
用于運載藥物
“生物導彈”＝單克隆抗體＋藥物
資料1 用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”，在妊娠第8天就可以作出診斷，這比原來的診斷方法提前了10d左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對胎兒造成不利影響。該方法檢測的準確率在90%以上。
在受精后不久，胎盤滋養層細胞就會分泌人絨毛膜促性腺激素(HCG)，是由受孕婦女體內胎盤產生的一種糖蛋白類激素，在孕婦的尿液中大量存在。而在非妊娠婦女尿液中幾乎不含有。
思考·討論
1、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經培養可產生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（ ）
A.經過免疫的B淋巴細胞 B.沒經過免疫的T淋巴細胞
C.經過免疫的T淋巴細胞 D.沒經過免疫的Ｂ淋巴細胞
2.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（ ）
A. 誘導融合的方法完全相同 B.所用的技術手段基本相同
C. 操作步驟基本相同 D. 都能形成雜種細胞
隨堂演練
3. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養基上不能存活增殖的細胞是（ ）
①淋巴細胞 ②小鼠骨髓瘤細胞 ③B淋巴細胞自身融合細胞　④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 ⑤雜交瘤細胞
A.②④ B.①③⑤ C.①②③④ D.②③
4.“生物導彈”是指（ ）
A.單克隆抗體 　　　　　　　　 B.雜交瘤細胞
C.產生特定抗體的B淋巴細胞　　 D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物
隨堂演練
5.新型冠狀病毒表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細胞ACE2受體結合，入侵細胞后可引起肺炎。針對此環節研發單克隆抗體是治療新冠肺炎的研究熱點之一，下列相關敘述錯誤的是
A.①過程需多次向小鼠體內注射S蛋白，以便于從
脾臟中獲得致敏的B淋巴細胞
B.②過程可通過電融合法使兩個細胞融合
C.經③過程篩出的細胞既能無限增殖又能產生識別
S蛋白的單克隆抗體
D.S蛋白的單克隆抗體能夠阻斷病毒入侵正常細胞以減弱對機體的毒害
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課后實踐
查閱資料撰寫關于單克隆抗體小論文

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