資源簡介

考點25 發酵工程
——五年（2020—2024年）高考生物學真題專項分類匯編
一、單選題
1．【2024·山東卷】在發酵過程中，多個黑曲霉菌體常聚集成團形成菌球體，菌球體大小僅由菌體數量決定。黑曲霉利用糖類發酵產生檸檬酸時需要充足的氧。菌體內銨離子濃度升高時，可解除檸檬酸對其合成途徑的反饋抑制。下列說法錯誤的是（ ）
A.相同菌體密度下，菌球體越大檸檬酸產生速率越慢
B.發酵中期添加一定量的硫酸銨可提高檸檬酸產量
C.發酵過程中pH下降可抑制大部分細菌的生長
D.發酵結束后，將過濾所得的固體物質進行干燥即可獲得檸檬酸產品
2．【2022·湖北卷】廢水、廢料經加工可變廢為寶。某工廠利用果糖生產廢水和沼氣池廢料生產蛋白質的技術路線如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
A.該生產過程中，一定有氣體生成
B.微生物生長所需碳源主要來源于沼氣池廢料
C.該生產工藝利用微生物厭氧發酵技術生產蛋白質
D.沼氣池廢料和果糖生產廢水在加入反應器之前需要滅菌處理
3．【2023·重慶卷】垃圾分類有利于變廢為寶，減少環境污染。如圖為分類后餐廚垃圾資源化處理的流程設計。下列敘述錯誤的是（ ）
A.壓榨出的油水混合物可再加工，生產出多種產品
B.添加的木屑有利于堆肥體通氣，還可作為某些微生物的碳源
C.X中需要添加合適的菌種，才能產生沼氣
D.為保證堆肥體中微生物的活性，不宜對堆肥體進行翻動
4．【2024·江西卷】井岡霉素是我國科學家發現的一種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種（JGs，一種放線菌，菌體呈絲狀生長）發酵而來，在水稻病害防治等領域中得到廣泛應用。下列關于JGs發酵生產井岡霉素的敘述，正確的是（ ）
A.JGs可發酵生產井岡霉素，因為它含有能夠編碼井岡霉素的基因
B.JGs接入發酵罐前需要擴大培養，該過程不影響井岡霉素的產量
C.提高JGs發酵培養基中營養物質的濃度，會提高井岡霉素的產量
D.稀釋涂布平板法不宜用于監控JGs發酵過程中活細胞數量的變化
5．【2023·浙江卷】某同學想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進行了如下實驗：取泡菜汁樣品，劃線接種于一定NaCl濃度梯度的培養基，經培養得到了單菌落。下列敘述正確的是（ ）
A.培養基pH需偏堿性 B.泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種
C.需在無氧條件下培養 D.分離得到的微生物均為乳酸菌
6．【2021·山東卷】葡萄酒的制作離不開酵母菌。下列說法錯誤的是（ ）
A.無氧條件下酵母菌能存活但不能大量繁殖
B.自然發酵制作葡萄酒時起主要作用的菌是野生型酵母菌
C.葡萄酒的顏色是葡萄皮中的色素進入發酵液形成的
D.制作過程中隨著發酵的進行發酵液中糖含量增加
7．【2023·遼寧卷】細菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細菌形成的。利用空氣微生物采樣器對某市人員密集型公共場所采樣并檢測細菌氣溶膠的濃度（菌落數/m3）。下列敘述錯誤的是（ ）
A. 采樣前需對空氣微生物采樣器進行無菌處理
B. 細菌氣溶膠樣品恒溫培養時需將平板倒置
C. 同一稀釋度下至少對3個平板計數并取平均值
D. 稀釋涂布平板法檢測的細菌氣溶膠濃度比實際值高
8．【2022·遼寧卷】為避免航天器在執行載人航天任務時出現微生物污染風險，需要對航天器及潔凈的組裝車間進行環境微生物檢測。下列敘述錯誤的是（ ）
A.航天器上存在適應營養物質匱乏等環境的極端微生物
B.細菌形成菌膜粘附于航天器設備表面產生生物腐蝕
C.在組裝車間地面和設備表面采集環境微生物樣品
D.采用平板劃線法等分離培養微生物，觀察菌落特征
9．【2023·山東卷】以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時的4個處理：①沸鹽水冷卻后再倒入壇中；②鹽水需要浸沒全部菜料；③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水；④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說法正確的是（ ）
A.①主要是為了防止菜料表面的醋酸桿菌被殺死
B.②的主要目的是用鹽水殺死菜料表面的雜菌
C.③是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進入
D.④可檢測到完整發酵過程中亞硝酸鹽含量逐漸降低
10．【2021·江蘇卷】某同學選用新鮮成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相關敘述正確的是（ ）
A.果酒發酵時，每日放氣需迅速，避免空氣回流入發酵容器
B.果酒發酵時，用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日增多
C.果醋發酵時，發酵液產生的氣泡量明顯少于果酒發酵時
D.果醋發酵時，用重鉻酸鉀測定醋酸含量變化時，溶液灰綠色逐日加深
11．【2022·山東卷】青霉菌處在葡萄糖濃度不足的環境中時，會通過分泌青霉素殺死細菌，以保證自身生存所需的能量供應。目前已實現青霉素的工業化生產，關于該生產過程，下列說法錯誤的是（ ）
A.發酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B.可用深層通氣液體發酵技術提高產量
C.選育出的高產菌株經擴大培養后才可接種到發酵罐中
D.青霉素具有殺菌作用，因此發酵罐不需嚴格滅菌
二、多選題
12．【2022·山東卷】啤酒的工業化生產中，大麥經發芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發酵、消毒等工序后，最終過濾、調節、分裝。下列說法正確的是（ ）
A.用赤霉素處理大麥，可使大麥種子無須發芽就能產生α-淀粉酶
B.焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子胚并進行滅菌
C.糖漿經蒸煮、冷卻后需接種酵母菌進行發酵
D.通過轉基因技術可減少啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發酵周期
13．【2021·江蘇卷】為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（ ）
A.將培養基分裝于培養皿中后滅菌，可降低培養基污染的概率
B.涂布用的菌濃度應控制在30～300個/Ml
C.需通過預實驗考察輻射時間對存活率的影響，以確定最佳誘變時間
D.挑取培養基上長出的較大單菌落，純化后進行降解效率分析
14．【2022·江蘇卷】在制作發酵食品的學生實踐中，控制發酵條件至關重要。下列相關敘述錯誤的有（ ）
A.泡菜發酵后期，盡管乳酸菌占優勢，但仍有產氣菌繁殖，需開蓋放氣
B.制作果酒的葡萄汁不宜超過發酵瓶體積的2/3，制作泡菜的鹽水要淹沒全部菜料
C.葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入無菌空氣制作葡萄醋
D.果酒與果醋發酵時溫度宜控制在18~25℃，泡菜發酵時溫度宜控制在30~35℃
三、填空題
15．【2021·河北卷】葡萄酒生產過程中會產生大量的釀酒殘渣（皮渣）。目前這些皮渣主要用作飼料或肥料，同時研究者也采取多種措施拓展其利用價值。
回答下列問題：
（1）皮渣中含有較多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前將原料干燥、粉碎的目的分別是________，萃取效率主要取決于萃取劑的________。萃取過程需要在適宜溫度下進行，溫度過高會導致花色苷________。研究發現，萃取時輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高花色苷的提取率，原因是________。
（2）為了解皮渣中微生物的數量，取10 g皮渣加入90 mL無菌水，混勻、靜置后取上清液，用稀釋涂布平板法將0.1 mL稀釋液接種于培養基上。104倍稀釋對應的三個平板中菌落數量分別為78、91和95，則每克皮渣中微生物數量為_________個。
（3）皮渣堆積會積累醋酸菌，可從中篩選優良菌株。制備醋酸菌初篩平板時，需要將培養基的pH調至_______性，滅菌后須在未凝固的培養基中加入無菌碳酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入碳酸鈣的目的是________。培養篩選得到的醋酸菌時，在缺少糖源的液體培養基中可加入乙醇作為________。
（4）皮渣堆積過程中也會積累某些兼性厭氧型乳酸菌。初篩醋酸菌時，乳酸菌有可能混入其中，且兩者菌落形態相似。請設計一個簡單實驗，區分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌。（簡要寫出實驗步驟和預期結果）
四、讀圖填空題
16．【2021·廣東卷】中國科學家運用合成生物學方法構建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖）為原料，在實驗室發酵生產PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價值。工藝流程如圖。
回答下列問題：
（1）為提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液體培養基中將蔗糖作為_____，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養（指培養一段時間后，將部分培養物轉入新配的培養基中繼續培養）以獲得目標菌株。培養過程中定期取樣并用_____的方法進行菌落計數，評估菌株增殖狀況。此外，選育優良菌株的方法還有_____等。（答出兩種方法即可）
（2）基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強等特性，研究人員設計了一種不需要滅菌的發酵系統，其培養基鹽濃度設為60g/L，pH為10，菌株H可正常持續發酵60d以上。該系統不需要滅菌的原因是_____。（答出兩點即可）
（3）研究人員在工廠進行擴大培養，在適宜的營養物濃度、溫度、pH條件下發酵，結果發現發酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，說明發酵條件中_____可能是高密度培養的限制因素。
（4）菌株H還能通過分解餐廚垃圾（主要含蛋白質、淀粉、油脂等）來生產PHA，說明其能分泌_____。
五、實驗探究題
17．【2023·北京卷】自然界中不同微生物之間存在著復雜的相互作用。有些細菌具有溶菌特性，能夠破壞其他細菌的結構使細胞內容物釋出。科學家試圖從某湖泊水樣中分離出有溶菌特性的細菌。
（1）用于分離細菌的固體培養基包含水、葡萄糖、蛋白胨和瓊脂等成分，其中蛋白胨主要為細菌提供___________和維生素等。
（2）A菌通常被用做溶菌對象。研究者將含有一定濃度A菌的少量培養基傾倒在固體培養平板上，凝固形成薄層。培養一段時間后，薄層變渾濁（如圖），表明______________________。
（3）為分離出具有溶菌作用的細菌，需要合適的菌落密度，因此應將含菌量較高的湖泊水樣___________后，依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培養一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍會出現___________。采用這種方法，研究者分離、培養并鑒定出P菌。
（4）為探究P菌溶解破壞A菌的方式，請提出一個假設，該假設能用以下材料和設備加以驗證。
主要實驗材料和設備：P菌、A菌、培養基、圓形濾紙小片、離心機和細菌培養箱。
18．【2022·重慶卷】研究發現柑橘精油可抑制大腸桿菌的生長。某興趣小組采用水蒸氣蒸餾法和壓榨法提取了某種橘皮的精油（分別簡稱為HDO和CPO），并研究其抑菌效果的差異。
（1）為便于精油的提取，壓榨前需用______浸泡橘皮一段時間。在兩種方法收集的油水混合物中均加入NaCl，其作用是_______；為除去油層中的水分，需加入_______。
（2）無菌條件下，該小組制備了兩個大腸桿菌平板，用兩片大小相同的無菌濾紙分別蘸取HDO和CPO貼于含菌平板上，37℃培養24h，抑菌效果見如圖。有同學提出該實驗存在明顯不足：①未設置對照，設置本實驗對照的做法是_______，其作用是________；②不足之處還有_________（答兩點）。
（3）若HDO的抑菌效果低于CPO，從提取方法的角度分析，主要原因是_______。
參考答案
1．答案：D
解析：發酵工程在氧氣充足的條件下，黑曲霉可以利用糖類發酵產生檸檬酸，在相同菌體密度下，菌球體越大，越不容易獲得氧氣，檸檬酸產生速率越慢，A正確。由題目所給信息“菌體內銨離子濃度升高時，可解除檸檬酸對其合成途徑的反饋抑制”可推出發酵中期添加一定量的硫酸銨可提高檸檬酸產量，B正確。大部分細菌適合在中性或弱堿性環境中生存，發酵過程中pH下降可抑制大部分細菌的生長，正確。如果發酵產品是微生物細胞本身，可在發酵結束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，即可得到產品。如果產品是代謝物，可根據產物的性質采取適當的提取、分離和純化措施來獲得產品。檸檬酸屬于代謝物，故D錯誤。
2．答案：A
解析：A、據圖可知，該生產過程中有釀酒酵母的參與，酵母菌呼吸作用會產生二氧化碳，故該生產過程中，一定有氣體生成，A正確；B、糖類是主要的能源物質，微生物生長所需的碳源主要來源于果糖生產廢水，B錯誤；C、分析圖示可知，該技術中有連續攪拌反應器的過程，該操作的可以增加微生物與營養物質的接觸面積，此外也可增大溶解氧含量，故據此推測該生產工藝利用微生物的有氧發酵技術生產蛋白質，C錯誤；D、沼氣生產利用的是厭氧微生物，在連續攪拌反應器中厭氧微生物會被抑制，因此沼氣池廢料無需滅菌，D錯誤。故選A。
3．答案：D
解析：A、壓榨出的油水混合物可再加工，生產出多種產品，有利于實現物質的循環再生和能量的多級利用，A正確；B、添加的木屑有利于堆肥體通氣，木屑也可作為某些微生物的碳源，B正確；C、X中需要添加合適的菌種，通過分解有機物才能產生沼氣，C正確；D、為保證堆肥體中微生物的活性，可以對堆肥體進行翻動，D錯誤。故選D。
4．答案：D
解析：A、基因表達的產物是蛋白質，而井岡霉素是JGs發酵生產的一種氨基寡糖類抗生素，A錯誤；
B.JGs接入發酵罐前需要擴大培養，該過程會影響JGs的數量，進而影響井岡霉素的產量，B錯誤；
C.在一定范圍內提高JGs發酵培養基中營養物質的濃度，會提高井岡霉素的產量，但若濃度過大，反而會降低井岡霉素的產量，C錯誤；
D.JGs是一種放線菌，菌體呈絲狀生長，形成的菌落難以區分，因此稀釋涂布平板法不宜用于監控JGs發酵過程中活細胞數量的變化，D正確。
故選D。
5．答案：C
解析：培養乳酸菌的培養基應偏酸性，A項錯誤；劃線接種時，泡菜汁無需進行多次稀釋，B項錯誤；乳酸菌是厭氧菌，需在無氧條件下培養，C項正確；泡菜汁中還有酵母菌等，因此分離得到的微生物不只有乳酸菌，D項錯誤。
6．答案：D
解析：酵母菌是兼性厭氧型生物，有氧和無氧條件下都能存活，但是有氧呼吸釋放的能量多，酵母菌繁殖速度快，無氧呼吸釋放能量少，酵母菌不能大量繁殖，A正確；自然發酵制作葡萄酒時，菌種主要來自葡萄皮上的野生型酵母菌，B正確；葡萄酒的顏色是發酵過程中葡萄皮中的色素進入發酵液形成的，C正確；葡萄酒制作利用的原理是酵母菌的無氧呼吸，前期氧氣充足，酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖，后期缺乏氧氣，酵母菌進行無氧呼吸產生酒精，細胞呼吸以葡萄糖為底物，因此隨著發酵的進行，發酵液中的糖含量減少，D錯誤。
7．答案：D
解析：為防止雜菌污染，采樣前需要對空氣微生物采樣器進行滅菌，A正確；細菌氣溶膠樣品恒溫培養時，為防止冷凝水滴落造成污染和水分大量蒸發，應將培養皿倒置，B正確；對微生物計數時，在同一稀釋度下，應至少對3個平板進行重復計數，然后求出平均值，C正確；使用稀釋涂布平板法對微生物進行計數時，統計的數值往往比實際值低，原因是當兩個或多個菌體連在一起時在平板上觀察到的只是一個茵落，D錯誤。
8．答案：D
解析：A、航天器處于外太空等極端環境中，其上可能存在適應營養物質匱乏等環境的極端微生物，A正確；B、細菌形成菌膜可粘附于航天器設備表面產生生物腐蝕，故需要潔凈的組裝車間，B正確；C、在組裝車間地面和設備表面可采集環境微生物樣品，C正確；D、航天器及潔凈的組裝車間微生物很少，不需要用到平板劃線法分離微生物，D錯誤。
故選：D。
9．答案：C
解析：A、沸鹽水冷卻后再倒入壇中主要是為了防止乳酸菌被殺死，A錯誤；B、鹽水需要浸沒全部菜料主要目的是創造一個無氧的環境，有利于乳酸菌的發酵，B錯誤；C、蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水目的是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進入，保證壇內處于無氧環境，C正確；D、泡菜腌制過程中，亞硝酸鹽含量先升高，后降低，D錯誤。故選：C。
10．答案：C
解析：A、酒精發酵是利用酵母菌的無氧呼吸，隨著果酒發酵的進行，裝置內會產生氣體（二氧化碳），容器內壓強大于外界，所以空氣不會回流，A錯誤；
B.果酒發酵時，發酵液中的葡萄糖不斷被消耗，因此用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量
變化，磚紅色沉淀逐日減少，B錯誤；C、以酒精為底物進行醋酸發酵，酒精與氧氣發生反應產生醋酸和水，幾乎沒有氣泡產生，發酵液產生的氣泡量明顯少于果酒發酵時，C正確；
D.重鉻酸鉀用于檢測酒精，不能用于測定醋酸含量，D錯誤。
11．答案：D
解析：本題考查發酵工程的有關知識。因青霉菌處在葡萄糖濃度不足的環境中時，會通過分泌青霉素殺死細菌，故碳源不宜使用葡萄糖，不利于青霉素的產生，A項正確；青霉菌的代謝類型為異養需氧型，可用深層通氣液體發酵技術，保證其有氧呼吸，提高產量，B項正確；選育出的高產菌株數量較少，故需經擴大培養純化后才可接種到發酵罐中，C項正確；為了防止細菌、真菌等微生物的污染，獲得純凈的青霉素，發酵罐仍然需嚴格滅菌，D項錯誤。
12．答案：ACD
解析：本題考查發酵工程的有關知識及植物激素的作用、基因工程的應用等。赤霉素能促進種子萌發，故用赤霉素處理大麥，可誘導α-淀粉酶相關基因的表達，促進α-淀粉酶的合成，使大麥種子無須發芽就能產生α-淀粉酶，A項正確；焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子胚并保持酶的活性，不是為了滅菌，B項錯誤；糖漿經蒸煮、冷卻后再接種酵母菌進行發酵，防止高溫殺死菌種，C項正確；雙乙酰是啤酒發酵過程中酵母菌自身代謝出的副產物，是啤酒成熟的限制性指標，過高會導致啤酒變質，通過轉基因技術可減少啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發酵周期，D項正確。
13．答案：AB
解析：A、培養基應先滅菌再分裝于培養皿中，A符合題意；
B.涂布用的菌濃度應控制在106倍，以避免菌種重疊而不能得到單菌落，B符合題意；
C.輻射劑量和誘變時間都是正式實驗的無關變量，可通過預實驗確定，C不符合題意；
D.石油降解菌能分解石油獲得碳源，形成菌落，挑取培養基上長出的較大單菌落，給純化
后進行降解效率分析，以獲得能高效降解石油的菌種，D不符合題意。
14．答案：ACD
解析：乳酸菌屬于厭氧菌，開蓋放氣會影響乳酸菌發酵，因此不能開蓋放氣，A錯誤。制作果酒的葡萄汁不宜超過發酵瓶體積的2/3，以防止發酵過程中發酵液溢出；制作泡菜的鹽水要淹沒全部菜料，防止菜料與空氣接觸，B正確。醋酸發酵的溫度高于果酒發酵的溫度，因此制作好葡萄酒后，除需通入無菌空氣外，還需要適當提高發酵裝置的溫度，C錯誤。果醋發酵時溫度宜控制在30~35℃，D錯誤。
15．答案：（1）降低含水量、使原料與萃取劑充分接觸，提高溶解度；性質和使用量；分解；纖維素酶和果膠酶可破壞細胞壁，有利于提高花色苷的提取率
（2）8.8×106
（3）中性或微堿；使醋酸菌菌落周圍出現透明圈，根據透明圈來篩選優良菌株；碳源
（4）實驗步驟：將平板置于無氧環境下繼續培養，觀察菌落形態和透明圈大小。
預期結果：若菌落繼續生長，且透明圈增大，則為兼性厭氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能繼續生長，透明圈不再擴大，則為醋酸菌菌落。
解析：本題考查發酵工程的相關知識。
（1）萃取前將原料干燥的目的是降低含水量，粉碎的目的是使原料與萃取劑充分接觸，提高溶解度，萃取效率主要取決于萃取劑的性質和使用量。萃取過程需要在適宜溫度下進行，溫度過高會導致花色苷分解。纖維素酶和果膠酶會催化纖維素和果膠水解，破壞細胞壁，有利于提高花色苷的提取率。
（2）平板上菌落數平均為（78+91+95）/3=88，每克皮渣中微生物數量為88/0.1×104=8.8×106。
（3）醋酸菌屬于細菌，故制備醋酸菌初篩平板時，需將培養基的pH調至中性或微堿性。碳酸鈣能夠與醋酸反應，使醋酸菌菌落周圍出現透明圈，在平板上可根據碳酸鈣透明圈來篩選優良菌株，碳酸鈣透明圈越大，說明菌株產生醋酸的能力越強。培養篩選得到的醋酸菌時，在缺少糖源的液體培養基中，乙醇可作為碳源。
（4）乳酸菌屬于兼性厭氧型，醋酸菌屬于需氧型，故可將平板置于無氧環境中繼續培養，觀察平板上形成的菌落。
16.
（1）答案：唯一碳源；稀釋涂布平板（或血細胞計數）；誘變育種、基因工程育種
解析：蔗糖可作為微生物培養的唯一碳源，活細胞計數的方法主要采取稀釋涂布平板法，通過統計平板中的菌落來計算樣品中的菌落數。常見育種方法有雜交育種、誘變育種、單倍體育種、多倍體育種、轉基因育種，對于優良菌株的選育還能采取誘變育種、雜交育種和轉基因育種的方法。
（2）答案：鹽濃度為60g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長繁殖受抑制
解析：由題意可知，該發酵系統的環境為高濃度鹽和高pH，在鹽濃度為60 g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長繁殖受抑制，因此不需要滅菌。
（3）答案：氧氣的濃度
解析：根據題干中“產生少量乙醇”可知，發酵過程中氧氣不充足，細胞進行了無氧呼吸產生乙醇。
（4）答案：蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等
解析：菌株H可分解含有蛋白質、淀粉、油脂等餐廚的垃圾，因此可推測菌株H能分泌水解其相應的酶，即蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶
17．答案：（1）氮源、碳源
（2）A菌能在培養平板中生長繁殖
（3）稀釋；溶菌圈
（4）假設P菌通過分泌某種化學物質使A菌溶解破裂
解析：（1）蛋白胨主要為細菌提供氮源、碳源和維生素等。
（2）將含有一定濃度A菌的少量培養基傾倒在固體培養平板上，凝固形成薄層。培養一段時間后，薄層變渾濁，表明A菌能在培養平板中生長繁殖。
（3）將含菌量較高的湖泊水樣稀釋后，依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培養一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍會出現溶菌圈。
（4）略。
18．答案：（1）石灰水；增加鹽的濃度，促進油水分層；無水Na2SO4
（2）選用相同大小的無菌濾紙蘸取蒸餾水貼于含菌平板上，相同條件下一起培養；排除濾紙紙片影響大腸桿菌生長的干擾；a.實驗平板數目數據過少，具有偶然性；b.濾紙分別蘸取HDO和CPO，無法保證HDO和CPO的含量相等
（3）HDO是采用水蒸氣蒸餾法，高溫可能破壞HDO的結構，影響其生理作用，導致其抑菌效果低
解析：（1）為了提高出油率以及防止壓榨時滑脫，壓榨前需用石灰水浸泡橘皮一段時間。水蒸氣蒸餾法和壓榨法收集的油水混合物中均加入NaCl，其作用是增加鹽的濃度，促進油水分層，最后在除去油層中的水分時，需要加入無水Na2SO4進行吸水。
（2）該實驗設計中，未設置對照組，實驗組的處理是用兩片大小相同的無菌濾紙分別蘸取HDO和CPO貼于含菌平板上，37℃培養24h，則對照組的設計應該遵循單一變量原則，使用相同大小的無菌濾紙滴加等量蒸餾水貼于含菌平板上，相同條件下一起培養，其目的是排除濾紙紙片對大腸桿菌生長的干擾；實驗中存在的不足之處在于使用的平板數目較少，應該多設計幾組實驗，避免出現偶然誤差，并且蘸取HDO和CPO于濾紙上無法確保兩種液體含量一致，應用移液管在兩張濾紙上分別滴加相同體積的HDO和CPO。
（3）HDO是采用水蒸氣蒸餾法，CPO采用的是壓榨法，高溫可能破壞HDO的結構，影響其生理作用，導致其抑菌效果低。

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