資源簡介

倒數(shù)第 1 天 基因、蛋白質(zhì)工程
考點一：科技探索之路
1 ．基因工程是指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造 出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。從技術(shù)操作層面看， 由于基因工程是在 DNA 分子水平上進(jìn)行設(shè)計和施工的，因此又叫作重組 DNA 技術(shù)。（P67）
2 ．1944 年，艾弗里等人通過肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實驗，不僅證明了遺傳物質(zhì)是 DNA，還 證明了 DNA 可以在同種生物的不同個體之間轉(zhuǎn)移。（P68）
3 ．1958 年，梅塞爾森和斯塔爾用實驗證明了 DNA 的半保留復(fù)制。隨后不久，克里克 提出中心法則。（P68）
4 ．1967 年，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在細(xì)菌擬核 DNA 之外的質(zhì)粒有自我復(fù)制能力，并可以在細(xì) 菌細(xì)胞間轉(zhuǎn)移。（P68）
5．1973 年，科學(xué)家證明質(zhì)粒可以作為基因工程的載體，構(gòu)建重組 DNA，導(dǎo)入受體細(xì)胞， 使外源基因在原核細(xì)胞中成功表達(dá)，并實現(xiàn)物種間的基因交流。至此， 基因工程正式問 世。（P69）
6 ．1983 年，科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出世界上第一例轉(zhuǎn)基因煙草。此后， 基因工 程進(jìn)入了迅速發(fā)展的階段。（P69）
7 ．1985 年，穆里斯等人發(fā)明PCR，為獲取目的基因提供了有效手段。（P69）
考點二：重組 DNA 技術(shù)的基本工具
1．切割 DNA 分子的工具是限制性內(nèi)切核酸酶，簡稱限制酶，這類酶主要是從原核生物 中分離純化出來的。它們能夠識別雙鏈 DNA 分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈 中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，產(chǎn)生黏性末端或平末端兩種形式的末端。（P71）
2．DNA 連接酶分為兩類，一類是 E.coli DNA 連接酶，另一類是 T4DNA 連接酶。后者 既可以“縫合”雙鏈 DNA 片段互補(bǔ)的黏性末端，又可以“縫合”雙鏈 DNA 片段的平末端， 但連接平末端的效率相對較低。（P72）
3 ．質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核 DNA 之外， 并具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈 DNA 分子。（P72）
4 ．在基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工 改造的。這些質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因，如四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因等，
便于重組 DNA 分子的篩選。（P72）
5 ．在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外，還有噬菌體、動植物病毒等。它們的來源不同， 在大小、結(jié)構(gòu)、復(fù)制方式以及可以插入外源 DNA 片段的大小上也有很大差別。（P73）
6 ．載體必須具備的條件：①能在受體細(xì)胞中保存下來并能自我復(fù)制；②具有 1 個或多 個限制酶切割位點，以便與外源基因連接。③具有標(biāo)記基因。（P72）
7 ．DNA 不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用這一原理，可以初步分離 DNA 與 蛋白質(zhì)。DNA 在不同濃度的 NaCl 溶液中溶解度不同，它能溶于 2 mol/L 的 NaCl 溶液。 在一定溫度下，DNA 遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定 DNA 的 試劑。（P74“探究·實踐”）
考點三：基因工程的基本操作程序
1 ．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉主要需要四個步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu) 建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。（P76）
2 ．PCR 是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項根據(jù) DNA 半保留復(fù)制的原理，在體外提 供參與 DNA 復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技 術(shù)。（P77）
3 ．PCR 技術(shù)可以分為變性、復(fù)性和延伸三步。（P78）
4．PCR 反應(yīng)過程可以在 PCR 擴(kuò)增儀（PCR 儀）中自動完成，完成以后，常采用瓊脂糖 凝膠電泳來鑒定 PCR 的產(chǎn)物。（P79）
5 ．基因表達(dá)載體要包括以下四個基本的結(jié)構(gòu)： 目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因。 （P80）
6 ．構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代， 同時，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。（P80）
7 ．啟動子位于目的基因的上游，它是 RNA 聚合酶識別和結(jié)合的部位。（P80）
8 ．標(biāo)記基因的作用：鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞 篩選出來。（或供重組 DNA 的鑒定和選擇）。
9．花粉管通道法有多種操作方式。例如， 可以用微量注射器將含目的基因的 DNA 溶液 直接注入子房中；可以在植物受粉后的一定時間內(nèi)，剪去柱頭，將 DNA 溶液滴加在花 柱切面上，使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入胚囊。除此之外， 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 常用的方法還有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。（P81）
10 ．轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。 （P81“資料卡”）
11．農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物， 而對大多數(shù)單子葉植物沒有侵染能力。農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有 Ti 質(zhì)粒，當(dāng)它侵染植物細(xì)胞 后，能將 Ti 質(zhì)粒上的T－DNA（可轉(zhuǎn)移的 DNA）轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合 到該細(xì)胞的染色體 DNA 上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這種特點， 如果將目的基因插入 Ti 質(zhì)粒的 T -DNA 中，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞。（P81“資料卡”） 12 ．檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功，首先是分子水平的檢測，包括通過 PCR 等技術(shù) 檢測棉花的染色體 DNA 上是否插入了Bt 基因或檢測 Bt 基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；從 轉(zhuǎn)基因棉花中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交，檢測 Bt 基因是否翻譯 成 Bt 抗蟲蛋白等。其次，還需要進(jìn)行個體生物學(xué)水平的鑒定。例如，通過采摘抗蟲棉 的葉片飼喂棉鈴蟲來確定 Bt 基因是否賦予了棉花抗蟲特性以及抗性的程度。（P82）
13 ．在獲得轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的過程中，還可以通過構(gòu)建基因文庫來獲取目的基因。（P82）
14．將目的基因?qū)雱游锸芫炎畛Ｓ玫囊环N方法是利用顯微注射將目的基因注入動物 的受精卵中，這個受精卵將發(fā)育成為具有新性狀的動物。在基因工程操作中， 常用原核 生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用 Ca2＋處理大腸 桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中 DNA 分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的 基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。（P82）
考點四：基因工程的應(yīng)用
1 ．科學(xué)家將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起，
通過顯微注射的方法導(dǎo)入哺乳動物的受精卵中，由這個受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動物在進(jìn) 入泌乳期后，可以通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥物，這稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生 物反應(yīng)器。（P90）
2．用基因工程的方法，使外源基因得到高效表達(dá)的菌類一般稱為基因工程菌。（P91“相 關(guān)信息”）
3 ． 目前，科學(xué)家正嘗試?yán)没蚬こ碳夹g(shù)對豬的器官進(jìn)行改造，采用的方法是在器官 供體的基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定 基因，然后再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出不會引起免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。
（P91）
考點五：蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用
1 ．蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改 造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的 需求。（P93）
2 ．基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)，這些天然蛋白質(zhì)是生物在長期 進(jìn)化過程中形成的，它們的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人 類生產(chǎn)和生活的需要。（P93）
3 ．蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推 測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→ 獲得所需要的蛋白質(zhì)。（P94）
1 ．將人胰島素 A 鏈上 1 個天冬氨酸替換為甘氨酸，B 鏈末端增加 2 個精氨酸，可制備 出一種人工長效胰島素。下列關(guān)于該胰島素的敘述，錯誤的是( )
A ．進(jìn)入人體后需經(jīng)高爾基體加工 B ．比人胰島素多了 2 個肽鍵
C ．與人胰島素有相同的靶細(xì)胞 D ．可通過基因工程方法生產(chǎn)
2 ．滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實驗中常見的操作。下列敘述正確的是( )
A ．動、植物細(xì)胞 DNA 的提取必須在無菌條件下進(jìn)行
B ．微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C ．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌 D ．可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌 3 ．關(guān)于“DNA 的粗提取與鑒定”實驗，下列說法錯誤的是( )
A ．過濾液沉淀過程在 4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止 DNA 降解
B ．離心研磨液是為了加速 DNA 的沉淀
C ．在一定溫度下，DNA 遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色
D ．粗提取的 DNA 中可能含有蛋白質(zhì)
4．人染色體 DNA 中存在串聯(lián)重復(fù)序列，對這些序列進(jìn)行體外擴(kuò)增、電泳分離后可得到 個體的 DNA 指紋圖譜。該技術(shù)可用于親子鑒定和法醫(yī)學(xué)分析。下列敘述錯誤的是( )
A ．DNA 分子的多樣性、特異性及穩(wěn)定性是 DNA 鑒定技術(shù)的基礎(chǔ)
B ．串聯(lián)重復(fù)序列在父母與子女之間的遺傳不遵循孟德爾遺傳定律
C ．指紋圖譜顯示的 DNA 片段屬于人體基礎(chǔ)代謝功能蛋白的編碼序列 D ．串聯(lián)重復(fù)序列突變可能會造成親子鑒定結(jié)論出現(xiàn)錯誤
5．研究者擬構(gòu)建高效篩選系統(tǒng)，將改進(jìn)的苯丙氨酸合成關(guān)鍵酶基因 P1 導(dǎo)入谷氨酸棒桿 菌，以提高苯丙氨酸產(chǎn)量。
(1)如圖是該高效篩選系統(tǒng)載體的構(gòu)建過程。載體 1 中含有 KanR（卡那霉素抗性基因）
和 SacB 兩個標(biāo)記基因，為去除篩選效率較低的 SacB，應(yīng)選擇引物 和
,并在引物的 （5 ' ∕3＇）端引入 XhoⅠ酶識別序列，進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，
產(chǎn)物經(jīng)酶切、連接后環(huán)化成載體 2。
(2)PCR 擴(kuò)增載體 3 中篩選效率較高的標(biāo)記基因 RpsL（鏈霉素敏感基因）時，引物應(yīng)包
含 （EcoRⅠ∕HindⅢ∕XhoⅠ)酶識別序列，產(chǎn)物經(jīng)單酶切后連接到載體 2 構(gòu)建
高效篩選載體 4。
(3)將改進(jìn)的 P1 基因整合到載體 4 構(gòu)建載體 5。將載體 5 導(dǎo)入鏈霉素不敏感（由 RpsL 突
變造成）、卡那霉素敏感的受體菌。為獲得成功導(dǎo)入載體5 的菌株，應(yīng)采用含有
的平板進(jìn)行初步篩選。
(4)用一定的方法篩選出如下菌株：P1 基因脫離載體 5 并整合到受體菌擬核 DNA，且載
體 5 上其他 DNA 片段全部丟失。該菌的表型為 。
A ．卡那霉素不敏感、鏈霉素敏感
B ．卡那霉素敏感、鏈霉素不敏感 C ．卡那霉素和鏈霉素都敏感
D ．卡那霉素和鏈霉素都不敏感
(5)可采用 技術(shù)鑒定成功整合 P1 基因的菌株。之后以發(fā)酵法檢測苯丙氨酸產(chǎn)
量。
6 ．甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組 用甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交相關(guān)研究， 基本過程包括獲取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原 生質(zhì)體融合、篩選融合細(xì)胞、雜種植株再生和鑒定， 最終獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株。回 答下列問題：
(1)根據(jù)研究目標(biāo)，在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前， 應(yīng)檢驗兩種植物的原生質(zhì)
體是否具備 的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況， 通常用不同顏色的原生
質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的
為外植體。
(2)植物細(xì)胞壁的主要成分為 和果膠，在獲取原生質(zhì)體時，常采用相應(yīng)的酶進(jìn)
行去壁處理。在原生質(zhì)體融合前， 需對原生質(zhì)體進(jìn)行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生
質(zhì)體的 失活。對處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用 計數(shù)，確定原生
質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體 1: 1 混合后，通過添加適宜濃度的 PEG 進(jìn)行融合；一定時間
后，加入過量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，稀釋的目的是 。
(3)將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分 散固定在平板中，并獨立生長、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于
。下列各項中能說明這些愈傷組織只能來自于雜種細(xì)胞的理由是哪幾項？
A ．甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無法正常生長、分裂
B ．同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長、分裂
C ．培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細(xì)胞才能正常生長、分裂
D ．雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長、分裂
(4)愈傷組織經(jīng) 可形成胚狀體或芽。胚狀體能長出 ，直接發(fā)育形成
再生植株。
(5)用PCR 技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細(xì)胞核具有特異性 DNA 序列a，乙植物細(xì)胞 質(zhì)具有特異性 DNA 序列b；M1 、M2 為序列 a 的特異性引物，N1 、N2 為序列 b 的特異 性引物。完善實驗思路：
Ⅰ . 提取純化再生植株的總 DNA，作為 PCR 擴(kuò)增的 。
Ⅱ . 將 DNA 提取物加入 PCR 反應(yīng)體系， 為特異性引物，擴(kuò)增序列 a；用同
樣的方法擴(kuò)增序列 b。
Ⅲ . 得到的 2 個 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng) 后，若每個 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)
了預(yù)期的 個條帶，則可初步確定再生植株來自于雜種細(xì)胞。
7 ．蛋白酶抑制劑基因轉(zhuǎn)化是作物抗蟲育種的新途徑。某研究團(tuán)隊將胰蛋白酶抑制劑 （NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPinlA）的基因單獨或共同轉(zhuǎn)化棉花，獲得了轉(zhuǎn)基 因植株。回答下列問題：
(1)蛋白酶抑制劑的抗蟲機(jī)制是 。
(2) 是實施基因工程的核心。
(3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時，必須將目的基因插入到質(zhì)粒的 上，此方法的不足之處
是 。
(4)為檢測目的基因在受體細(xì)胞基因組中的整合及其轉(zhuǎn)錄和翻譯，可采用的檢測技術(shù)有
（寫出兩點即可）。
________
(5)確認(rèn)抗蟲基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)后，還需進(jìn)一步做抗蟲的 以鑒定其抗性
程度。下圖為三種不同遺傳操作產(chǎn)生的轉(zhuǎn)基因棉花抗蟲實驗結(jié)果， 據(jù)結(jié)果分析
（NaPI”StPinlA”NaPI＋StPinlA”）轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳，其原因是 。
(6)基因突變可產(chǎn)生新的等位基因，在自然選擇的作用下，昆蟲種群的基因頻率會發(fā)生
。導(dǎo)致昆蟲朝著一定的方向不斷進(jìn)化。提此推測， 胰蛋白酶抑制劑轉(zhuǎn)基因作物
長期選擇后，某些害蟲具有了抗胰蛋白酶抑制劑的能力，其分子機(jī)制可能是
（寫出兩點即可）。
8 ．以我國科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊將 OSNL（即 4 個基因 Oct4／Sox2／Nanog／Lin28A 的縮寫）導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞（CEFs），誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS）， 再誘導(dǎo) iPS 分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs），然后將 iPGCs 注射到孵化 2.5 天的白羽 雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實驗流程如圖。回答下列問題。
(1)CEFs 是從孵化 9 天的黑羽雞胚中分離獲得的，為了獲得單細(xì)胞懸液，雞胚組織剪碎
后需用 處理。動物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添
加 等天然成分，以滿足細(xì)胞對某些細(xì)胞因子的需求。
(2)體外獲取 OSNL 的方法有 （答出 1 種即可）。若要在 CEFs 中表達(dá)外
源基因的蛋白，需構(gòu)建基因表達(dá)載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟
動子和 等。啟動子是 識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)
動 。
(3)iPS 細(xì)胞和iPGCs 細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是 。
(4)誘導(dǎo) iPS 細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是 。
(5)該實驗流程中用到的生物技術(shù)有 （答出 2 點即可）。
9 ．水蛭是我國的傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有 良好的抗凝血作用。擬通過蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)， 提高其抗凝血活性。回答下列 問題:
(1)蛋白質(zhì)工程流程如圖所示，物質(zhì)a 是 ，物質(zhì) b 是 。在生產(chǎn)過程中， 物
質(zhì) b 可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是 。
(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有 、
和利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增。PCR 技術(shù)遵循的基本原理是 。
(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后， 分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血 活性，結(jié)果如圖所示。推測兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的 （填“種類”或“含量”）有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是
。
(4)若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血
活性差異，簡要寫出實驗設(shè)計思路 。
10．新冠疫情出現(xiàn)后，病毒核酸檢測和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用。回答下 列問題。
(1)新冠病毒是一種 RNA 病毒，檢測新冠病毒 RNA（核酸檢測）可以采取 RT-PCR 法。 這種方法的基本原理是先以病毒 RNA 為模板合成 cDNA，這一過程需要的酶是______， 再通過PCR 技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA 片段。根據(jù)檢測結(jié)果判斷被檢測者是否感染新冠病毒。
(2)為了確保新冠病毒核酸檢測的準(zhǔn)確性，在設(shè)計 PCR 引物時必須依據(jù)新冠病毒 RNA 中 的______來進(jìn)行。PCR 過程每次循環(huán)分為 3 步，其中溫度最低的一步是______。
(3)某人同時進(jìn)行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測（檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體），若 核酸檢測結(jié)果為陰性而抗體檢測結(jié)果為陽性，說明______（答出 1 種情況即可）；若核 酸檢測和抗體檢測結(jié)果均為陽性，說明______。
(4)常見的病毒疫苗有滅活疫苗、蛋白疫苗和重組疫苗等。已知某種病毒的特異性蛋白 S （具有抗原性）的編碼序列（目的基因）。為了制備蛋白疫苗，可以通過基因工程技術(shù) 獲得大量蛋白 S。基因工程的基本操作流程是______。
參考答案：
1 ．A
【分析】基因工程只能生產(chǎn)已有的蛋白質(zhì)，人工長胰島素 A 鏈有氨基酸的替換，B 鏈增加 了兩個氨基酸，需要通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)。
【詳解】A、胰島素作用于細(xì)胞表面的受體，不需要經(jīng)高爾基體的加工，A 錯誤；
B、人工長效胰島素比人胰島素的 B 鏈上多了兩個精氨酸，氨基酸與氨基酸之間通過肽鍵連 接，故多 2 個肽鍵，B 正確；
C、人工胰島素和人胰島素作用相同，都是降血糖的作用，故靶細(xì)胞相同，C 正確； D、人工長效胰島素是對天然蛋白質(zhì)的改造，需要通過基因工程生產(chǎn)，D 正確。
故選 A。
2 ．D
【分析】使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌， 常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺 死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。
【詳解】A、動、植物細(xì)胞 DNA 的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A 錯誤；
B、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng) 不能加入抗生素，B 錯誤；
C 、一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C 錯誤；
D、可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌， 以防止雜菌污
染，D 正確。 故選 D。
3 ．B
【分析】DNA 的粗提取與鑒定的實驗原理是：①DNA 的溶解性，DNA 和蛋白質(zhì)等其他成 分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以 將 DNA 溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA 不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白 質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和 DNA 進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下 DNA 遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色。
【詳解】A、低溫時 DNA 酶的活性較低，過濾液沉淀過程在 4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止 DNA 降解，A 正確；
B、離心研磨液是為了使細(xì)胞碎片沉淀，B 錯誤；
C、在沸水浴條件下，DNA 遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色，C 正確；
D、細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精， 可能有蛋白質(zhì)不溶于酒精，在 95%的冷酒精中與 DNA 一塊兒析出，故粗提取的 DNA 中可能含有蛋白質(zhì)，D 正確。
故選 B。
4 ．BC
【分析】1、基因的概念：基因是具有遺傳效應(yīng)的 DNA 片段，是決定生物性狀的基本單位。 2 、DNA 分子的多樣性：構(gòu)成 DNA 分子的脫氧核苷酸雖只有 4 種，配對方式僅 2 種，但其 數(shù)目卻可以成千上萬，更重要的是形成堿基對的排列順序可以千變?nèi)f化，從而決定了 DNA 分子的多樣性（n 對堿基可形成 4n 種）。
3 、DNA 分子的特異性：每個特定的 DNA 分子中具有特定的堿基排列順序，而特定的排列 順序代表著遺傳信息，所以每個特定的 DNA 分子中都貯存著特定的遺傳信息，這種特定的 堿基排列順序就決定了 DNA 分子的特異性。
【詳解】A 、DNA 分子的多樣性、特異性及穩(wěn)定性是 DNA 鑒定技術(shù)的基礎(chǔ)，A 正確；
B、串聯(lián)重復(fù)序列在染色體上， 屬于核基因，在父母與子女之間的遺傳遵循孟德爾遺傳定律， B 錯誤；
C、指紋圖譜由串聯(lián)重復(fù)序列擴(kuò)增獲得， 串聯(lián)重復(fù)序列是廣泛分布于真核生物核基因組中的 簡單重復(fù)非編碼序列，C 錯誤；
D、串聯(lián)重復(fù)序列突變后， 分離得到的指紋圖譜可能會發(fā)生改變，可能會造成親子鑒定結(jié)論 出現(xiàn)錯誤，D 正確。
故選 BC。
5 ．(1) 1 4 5 '
(2)XhoⅠ
(3)卡那霉素 (4)B
(5)PCR
【分析】PCR 反應(yīng)過程:變性→復(fù)性→延伸。變性：當(dāng)溫度上升到 90℃以上時，雙鏈 DNA 解聚為單鏈，復(fù)性：溫度下降到 50℃左右，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈 DNA 結(jié) 合，延伸：72℃左右時，Taq 酶有最大活性，可使 DNA 新鏈由5'端向3'端延伸。
【詳解】（1）據(jù)圖可知，根據(jù)引物箭頭方向可知，要想復(fù)制 KanR（卡那霉素抗性基因），
需要引物 1 和 4，因此為去除篩選效率較低的 SacB，應(yīng)選擇引物 1 和 4。PCR 時，在引物作 用下，DNA 聚合酶從引物 3'端開始延伸 DNA 鏈，即 DNA 的合成方向是從子鏈的 5'端向 3' 端延伸的，因此在引物的 5'端引入 XhoⅠ酶識別序列。
（2）據(jù)圖可知，載體 4 中 RpsL（鏈霉素敏感基因）的兩側(cè)具有 XhoⅠ酶識別序列，載體 3 中不含 XhoⅠ酶識別序列，如果將載體 2 和載體 3 連接形成高效篩選載體 4 時，需要的引物 應(yīng)該含有 XhoⅠ酶識別序列。
（3）基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因，有利于目的基因的初步檢測，據(jù)題意可知，載體 5 中含 有 RpsL（鏈霉素敏感基因）和 KanR（卡那霉素抗性基因），將載體 5 導(dǎo)入鏈霉素不敏感（由 RpsL 突變造成）、卡那霉素敏感的受體菌。為獲得成功導(dǎo)入載體 5 的菌株，應(yīng)采用含有卡那 霉素的平板進(jìn)行初步篩選。
（4）據(jù)題意可知，載體 5 導(dǎo)入的時鏈霉素不敏感（由 RpsL 突變造成）、卡那霉素敏感的受 體菌，受體菌中 P1 基因脫離載體 5 并整合到受體菌擬核 DNA，且載體 5 上其他 DNA 片段 全部丟失，因此該菌的表型為卡那霉素敏感、鏈霉素不敏感，B 正確，ACD 錯誤。
故選 B。
（5）通過 PCR 技術(shù)可以檢測目的基因是否插入受體細(xì)胞的染色體 DNA 中或目的基因是否 轉(zhuǎn)錄出了 mRNA，因此可采用 PCR 技術(shù)鑒定成功整合 P1 基因的菌株。
6 ．(1) 再生 葉
(2) 纖維素 細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核 血細(xì)胞計數(shù)板 降低 PEG 濃度，使其失去融 合作用
(3) 同一個雜種融合原生質(zhì)體 ABD
(4) 再分化 根和芽
(5) 模板 M1 、M2 凝膠電泳 1
【分析】1、植物組織培養(yǎng)過程：離體的植物組織經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，經(jīng)過再分化愈 傷組織又能重新分化為有結(jié)構(gòu)的組織和器官，最終形成完整的植株。
2、植物體細(xì)胞雜交可以克服植物有性雜交不親和性、打破物種之間的生殖隔離，操作過程 包括:原生質(zhì)體制備、原生質(zhì)體融合、雜種細(xì)胞篩選、雜種細(xì)胞培養(yǎng)、雜種植株再生以及雜 種植株鑒定等步驟。
【詳解】（1）在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前， 應(yīng)檢驗兩種植物的原生質(zhì)體是否具
備再生的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況， 通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲 植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的葉為外植體。
（2）植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，在獲取原生質(zhì)體時，常采用相應(yīng)的酶進(jìn)行去 壁處理。甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)， 乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)，在原生質(zhì)體 融合前，需對原生質(zhì)體進(jìn)行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核失活， 融合后具有甲植物的細(xì)胞核基因和乙植物的細(xì)胞質(zhì)基因。對處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用 血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)，確定原生質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體 1: 1 混合后，通過添加適宜濃度的 PEG 進(jìn)行融合；一定時間后，加入過量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，稀釋的目的是降低 PEG 濃度,使其失 去融合作用。
（3）將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分 散固定在平板中，并獨立生長、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于同一個雜 種融合的原生質(zhì)體。未融合的原生質(zhì)體因為細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核的失活，無法正常生長、分裂； 同種融合的原生質(zhì)體也因為甲原生質(zhì)體細(xì)胞質(zhì)或乙原生質(zhì)體細(xì)胞核失活而不能生長、分裂； 只有雜種細(xì)胞才具備有活性的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，可以生長、分裂， 因此這些愈傷組織只能來 自于雜種細(xì)胞。故選 ABD。
（4）愈傷組織經(jīng)再分化可形成胚狀體或芽。胚狀體能長出根和芽， 直接發(fā)育形成再生植株。
（5）Ⅰ . 提取純化再生植株的總 DNA，作為 PCR 擴(kuò)增的模板。
Ⅱ . 將 DNA 提取物加入 PCR 反應(yīng)體系，M1 、M2 為特異性引物，擴(kuò)增序列 a；用同樣的方法 擴(kuò)增序列 b。
Ⅲ . 得到的 2 個 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳后，若每個 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期 的 1 個條帶，則可初步確定再生植株來自于雜種細(xì)胞。
7 ．(1)調(diào)節(jié)害蟲胰蛋白酶活性，從而使害蟲不能正常消化食物達(dá)到抗蟲的目的
(2)#基因表達(dá)載體的構(gòu)建##表達(dá)載體的構(gòu)建#
(3) T-DNA 該方法不適用與單子葉植物
(4)基因--DNA 分子雜交技術(shù)、mRNA--分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)
(5) 效果 NaPI＋StPinlA
飼喂 NaPI＋StPinlA 轉(zhuǎn)基因的蟲體質(zhì)量最小、棉鈴數(shù)量最多
(6) 定向改變 由于害蟲發(fā)生基因突變后，在胰蛋白酶抑制劑的選擇下，抗性基因 頻率逐漸增高，從而提升了其抗胰蛋白酶抑制劑的能力，或胰蛋白酶抑制劑基因發(fā)生突變后 不能編碼處胰蛋白酶抑制劑
【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、 終止子和標(biāo)記基因等。
（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)?入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最 有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定：
分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA 是否插入目的基因；②檢測目的基因 是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。
個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
【詳解】（1）蛋白酶抑制劑的抗蟲機(jī)制是調(diào)節(jié)害蟲胰蛋白酶活性，從而使害蟲不能正常消化 食物達(dá)到抗蟲的目的。
（2）基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的 Ti 質(zhì)粒上的T-DNA 可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合 到受體細(xì)胞染色體的 DNA 上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到 Ti 質(zhì)粒的 T-DNA 上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA 上。 其不足之處是該方法不適用與單子葉植物。
（4）目的基因是否整合的檢測，在分子水平上可通過檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA 是否 插入目的基因、是否能轉(zhuǎn)錄處目的基因?qū)?yīng)的 mRNA、是否能合成目的基因所控制合成的 蛋白質(zhì)等；在個體水平可檢測抗蟲性、抗病性、活性等。即可利用基因--DNA 分子雜交技 術(shù)、mRNA--分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)等。
（5）抗蟲鑒定：確認(rèn)抗蟲基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)后，還需進(jìn)一步做抗蟲的效果以鑒定 其抗性程度。由圖可知，NaPI＋StPinlA 轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳，因為飼喂 NaPI＋StPinlA 轉(zhuǎn)基因的蟲體質(zhì)量最小、棉鈴數(shù)量最多。
（6）在自然選擇的作用下，種群的基因頻率會發(fā)生定向改變，導(dǎo)致生物朝一定方向不斷進(jìn) 化。由于害蟲發(fā)生基因突變后， 在胰蛋白酶抑制劑的選擇下，抗性基因頻率逐漸增高，從而 提升了其抗胰蛋白酶抑制劑的能力，或胰蛋白酶抑制劑基因發(fā)生突變后不能編碼處胰蛋白酶 抑制劑。
8 ．(1) 胰蛋白酶、膠原蛋白酶等 動物血清
(2) PCR 技術(shù)、人工合成法 終止子 RNA 聚合酶 目的基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)
(3)基因的選擇性表達(dá)
(4)誘導(dǎo) iPS 細(xì)胞的技術(shù)是將已經(jīng)分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞（iPS），再誘 導(dǎo) iPS 分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs）的技術(shù)，而細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物的一個細(xì)胞 的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞內(nèi)，使這個重組的細(xì)胞發(fā)育為胚胎，繼而發(fā)育為動物個體的技 術(shù)
(5)基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)
【分析】胚胎干細(xì)胞（ES 細(xì)胞）具有自我更新及多向分化潛能，為發(fā)育學(xué)、遺傳學(xué)、人類 疾病的發(fā)病機(jī)理與替代治療等研究提供非常寶貴的資源。iPS 細(xì)胞技術(shù)是借助基因?qū)爰夹g(shù) 將某些特定因子基因?qū)雱游锘蛉说捏w細(xì)胞，以將其重編程或誘導(dǎo)為 ES 細(xì)胞樣的細(xì)胞，即 iPS 細(xì)胞。
【詳解】（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)時，雞胚組織剪碎后需用胰蛋白酶處理，以獲得單細(xì)胞懸液。動 物細(xì)胞培養(yǎng)時一般需要在合成培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，以滿足細(xì)胞對某些細(xì)胞因子的 需求。
（2）OSNL 為目的基因，體外獲取目的基因可通過 PCR 技術(shù)大量擴(kuò)增或通過人工合成法來 合成。基因表達(dá)載體中除目的基因外，還必須有啟動子、終止子、復(fù)制原點和標(biāo)記基因等。 啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNA 片段，位于基因的首端，它是 RNA 聚合酶識別和結(jié)合的 部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。
（3）據(jù)圖可知，由 iPS 細(xì)胞誘導(dǎo)形成 iPGCs 細(xì)胞經(jīng)過了細(xì)胞分化，該過程遺傳物質(zhì)沒有改 變，導(dǎo)致其細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是基因的選擇性表達(dá)。
（4）誘導(dǎo) iPS 細(xì)胞的技術(shù)是將已經(jīng)分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞（iPS），
再誘導(dǎo) iPS 分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs）的技術(shù)，而細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物的一個
細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞內(nèi)，使這個重組的細(xì)胞發(fā)育為胚胎，繼而發(fā)育為動物個體 的技術(shù)。
（5）由圖可知，該實驗流程中將 OSNL 基因?qū)腚u胚成纖維細(xì)胞利用了基因工程技術(shù)，誘 導(dǎo)多能干細(xì)胞過程利用了動物細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)。
9 ．(1) 氨基酸序列多肽鏈 mRNA 密碼子的簡并性
(2) 從基因文庫中獲取目的基因 通過 DNA 合成儀用化學(xué)方法直接人工合成 DNA 雙鏈復(fù)制
(3) 種類 提取的水蛭蛋白的酶解時間和處理的酶的種類不同，導(dǎo)致水蛭蛋白空間 結(jié)構(gòu)有不同程度破壞
(4)取 3 支試管，分別加入等量的蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天 然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一種動物（如家兔）血液，立即將等量的血液加入
1 、2 、3 號三支試管中，靜置相同時間，統(tǒng)計三支試管中血液凝固時間
【分析】1、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)的結(jié) 構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列；
2、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修 飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活 的需求。也就是說， 蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包 含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。
【詳解】（1）據(jù)分析可知，物質(zhì) a 是氨基酸序列多肽鏈，物質(zhì) b 是 mRNA。在生產(chǎn)過程中， 物質(zhì) b 可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是密碼子的簡并性，即一種氨基酸可 能有幾個密碼子。
（2）蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有從基因文庫中 獲取目的基因、通過 DNA 合成儀用化學(xué)方法直接人工合成和利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增。PCR 技 術(shù)遵循的基本原理是 DNA 雙鏈復(fù)制。
（3）將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，據(jù)圖可知，水解產(chǎn)物中的肽含量隨著 酶解時間的延長均上升，且差別不大；而水解產(chǎn)物中抗凝血活性有差異，經(jīng)酶甲處理后，隨 著酶解時間的延長，抗凝血活性先上升后相對穩(wěn)定，經(jīng)酶乙處理后，隨著酶解時間的延長， 抗凝血活性先上升后下降，且酶甲處理后的酶解產(chǎn)物的抗凝血活性最終高于經(jīng)酶乙處理后的 酶解產(chǎn)物的抗凝血活性，差異明顯，據(jù)此推測兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與 肽的種類有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是提取的水蛭蛋白的酶解時間和酶的種類不同，導(dǎo)致 水蛭蛋白空間結(jié)構(gòu)有不同程度破壞。
（4）若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血 活性差異，實驗設(shè)計思路為：取 3 支試管，分別加入等量的蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上 述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一種動物（如家兔）血液，立即將等量的血液加入
1 、2 、3 號三支試管中，靜置相同時間，統(tǒng)計三支試管中血液凝固時間
10.(1)新冠病毒是一種RNA病毒，檢測新冠病毒RNA（核酸檢測）可以采取RT PCR法。這種方法的基本原理是先以病毒RNA為模板合成cDNA，即逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，再通過PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA片段。根據(jù)檢測結(jié)果判斷被檢測者是否感染新冠病毒。
(2)為了確保新冠病毒核酸檢測的準(zhǔn)確性，在設(shè)計PCR引物時必須依據(jù)新冠病毒RNA中的特異性核苷酸序列（或基因）來進(jìn)行。PCR過程每次循環(huán)分為三步，即變性（高溫使DNA解旋）、復(fù)性（低溫使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈）、延伸（中溫下，DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成），其中溫度最低的一步是復(fù)性。
(3)某人同時進(jìn)行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測（檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體），若核酸檢測結(jié)果為陰性而抗體檢測結(jié)果為陽性，說明該人曾經(jīng)感染過新冠病毒，但已康復(fù)；若核酸檢測和抗體檢測結(jié)果均為陽性，說明該人正在感染新冠病毒。
(4)基因工程的基本操作流程是：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。
故答案為：(1)逆轉(zhuǎn)錄酶
(2)特異性核苷酸序列（或 基因）；復(fù)性
(3)該人曾經(jīng)感染過新冠病毒，但已康復(fù)；該人正在感染新冠病毒
(4)目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定

展開更多......

收起↑