資源簡介

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高考生物二輪復習專題學案
13　細胞工程
// 高頻易錯 考前清零 //
1.判斷有關細胞工程說法的正誤
(1)以莖尖為材料利用植物組織培養技術可獲得具有抗病毒特性的新品種。 (　)
(2)植物組織培養利用了植物細胞全能性的原理,可利用滅活的病毒誘導原生質體融合。 (　)
(3)植物組織培養時,應對外植體進行滅菌處理以防止培養基及愈傷組織污染。 (　)
(4)動物體細胞核移植的基礎是動物細胞培養。(　)
(5)動物細胞培養需在培養基中添加血清等天然成分,還需添加瓊脂以便于細胞貼壁生長。 (　)
(6)體外培養多能干細胞時需將細胞置于95%的O2和5% CO2的混合氣體中培養。 (　)
(7)在“抗體—藥物偶聯物”中,單克隆抗體的作用是定位而不是殺傷。 (　)
(8)克隆野生森林貓的細胞核來自供體成纖維細胞,其細胞核基因型與核供體細胞一致。 (　)
(9)重構胚是指人工重新構建的胚胎,具有發育成完整個體的能力。 (　)
2.判斷有關胚胎工程說法的正誤
(1)在體外受精過程中,精子都需要用ATP溶液進行獲能處理后才能用于受精。 (　)
(2)受精卵發育為桑葚胚的過程是在透明帶內完成的,孵化后進入囊胚期階段。 (　)
(3)早期胚胎發育到原腸胚階段,細胞開始逐漸分化。 (　)
(4)進行胚胎分割操作時要將內細胞團和滋養層均等分割,以免影響胚胎的恢復。 (　)
(5)胚胎移植實質上是早期胚胎在相同生理環境條件下空間位置的轉移。 (　)
(6)牛胚胎移植時可用囊胚期滋養層細胞進行性別鑒定。 (　)
// 常考長句 考前規范 //
(1)切取草莓的一定大小的莖尖作為外植體進行植物組織培養,再生的植株有可能不帶病毒,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(2)進行動物細胞培養時, 保持培養環境處于無菌、無毒條件的操作有　　　　　　　　　。
(3)單克隆抗體制備的過程中,需要進行兩次篩選,第一次篩選的目的是　　　　　　　　　　,篩選的方法是　　　　　　　　　　　　,第二次篩選的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　。
(4)同種動物個體間進行胚胎移植前,通常不需要對受體和供體進行免疫檢查,原因是　　　　　　　。
(5)胚胎移植后,經代孕鼠孕育的后代,其遺傳特性與供體保持一致,其原理是　　　 。
考點一　植物細胞工程
1.厘清植物組織培養的關鍵
[提醒]①脫分化階段避光,再分化階段需光。
②生長素與細胞分裂素的比值高時,促進根的分化、抑制芽的形成;比值低時,促進芽的分化、抑制根的形成。
③體內細胞未表現全能性的原因:在特定的時間和空間條件下,基因的表達具有選擇性。
2.厘清植物體細胞雜交技術的關鍵
(1)原理:植物細胞的全能性、細胞膜的流動性。
(2)過程
[提醒]①與再生細胞壁密切相關的細胞器是高爾基體。
②從變異角度看,植物體細胞雜交技術的實質是染色體數目變異,雜種植株的基因型、染色體和染色體組數目均為原兩植物直接相加。
3.植物細胞工程的應用
應用 原理 主要過程 優點
快速 繁殖 植物細胞的全能性 脫分化、再分化 ①保持優良品種的遺傳特性;②高效快速地實現種苗的大量繁殖
作物 脫毒 莖尖病毒極少,植物細胞的全能性 莖尖組織培養 提高作物產量和品質
單倍體 育種 植物細胞的全能性、染色體變異 花藥離體培養、秋水仙素誘導染色體數目加倍 明顯縮短育種年限
突變體 的利用 突變、植物細胞的全能性 愈傷組織誘變處理后組織培養 提高突變率,獲得優良性狀
細胞產 物的工 廠化 生產 植物細胞增殖 從愈傷組織中提取次生代謝物 不占用耕地,幾乎不受季節、天氣等的限制
1.[2023·廣東卷] 人參皂苷是人參的主要活性成分。科研人員分別誘導人參根與胡蘿卜根產生愈傷組織并進行細胞融合,以提高人參皂苷的產率。下列敘述錯誤的是 (　)
A.細胞融合前應去除細胞壁
B.高Ca2+—高pH溶液可促進細胞融合
C.融合的細胞即為雜交細胞
D.雜交細胞可能具有生長快速的優勢
2.[2023·山東卷] 利用植物細胞培養技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養使其增殖,可獲得植物細胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是 (　)
A.利用該技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產物
B.植物細胞體積小,故不能通過該技術進行其產物的工廠化生產
C.次生代謝物是植物所必需的,但含量少,應選擇產量高的細胞進行培養
D.該技術主要利用促進細胞生長的培養條件提高單個細胞中次生代謝物的含量
1.[2023·湖南長郡中學模擬] 科研人員利用野生型清水紫花苜蓿和里奧百脈根為材料培育抗鼓脹病的新型牧草,研究主要流程如圖。下列說法錯誤的是(　)
注:IOA可抑制植物細胞呼吸第一階段,R-6G可阻止線粒體的功能。
A.將兩種細胞分別置于較高滲透壓環境下,有利于去除細胞壁獲得兩種植物的原生質體
B.異源融合體因代謝互補可恢復生長并獲得再生能力
C.③過程誘導生芽的培養基中BA(細胞分裂素類似物)與NAA的濃度比值低于②過程
D.通過圖示技術獲得的再生植株發生了染色體變異
2.草莓是無性繁殖的作物,它感染的病毒很容易傳播給后代。病毒在草莓體內逐年積累,會導致產量降低,品質變差。如圖是育種工作者選育高品質草莓的流程圖。下列說法正確的是 (　)
A.通常采用70%的酒精和5%次氯酸鈉溶液對甲進行滅菌處理
B.B過程常采用顯微注射法將SMYELV-CP導入草莓細胞
C.A、B、C過程都屬于細胞工程的操作,體現了植物細胞的全能性
D.判斷兩種選育方法的效果時,只有方法二需要進行病毒接種實驗
考點二　動物細胞工程
1.掌握動物細胞培養的條件與過程
(1)條件
[注意]特殊條件
①添加血清等天然成分以補充合成培養基缺乏的營養物質。
②氣體環境是指95%空氣和5%CO2的混合氣體,其中空氣中的氧氣是細胞代謝所必需的,二氧化碳的主要作用是維持培養液的pH。
(2)過程
[注意]區分傳代培養與原代培養的關鍵是是否進行過分瓶培養。
(3)干細胞
種類 胚胎干細胞(ES細胞) 成體干細胞
來源 早期胚胎 成體組織或器官
特點 全能性 組織特異性
2.厘清單克隆抗體制備的過程
3.克隆動物的培育過程
[注意](1)卵母細胞作為細胞核移植受體細胞的理由:營養豐富;體積大,易操作;細胞質中含有激發細胞核全能性表達的物質。
(2)體細胞核移植技術的原理是動物體細胞核具有全能性。克隆動物的產生是無性繁殖。
1.[2023·北京卷] 甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH,有關制備過程的敘述不正確的是 (　)
A.需要使用動物細胞培養技術
B.需要制備用PTH免疫的小鼠
C.利用抗原—抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞
D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞
2.[2023·湖北卷] 某病毒對動物養殖業危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體,以期快速檢測該病毒,其主要技術路線如圖所示。
回答下列問題:
(1)與小鼠骨髓瘤細胞融合前,已免疫的脾細胞(含漿細胞)　　　　(填“需要”或“不需要”)通過原代培養擴大細胞數量;添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合,該過程中PEG對細胞膜的作用是　　 。
(2)在雜交瘤細胞篩選過程中,常使用特定的選擇培養基(如HAT培養基),該培養基對　　　　和　　　 生長具有抑制作用。
(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交,其目的是 　 。
(4)構建重組質粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是　　　　。
動物細胞培養、單克隆抗體制備及應用
1.[2023·山東日照三模] 乳腺癌、胃癌細胞表面有大量的HER2蛋白,T細胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人員將上述三種蛋白作為抗原分別制備單克隆抗體,然后將其在體外解偶聯后重新偶聯制備得到三特異性抗體,簡稱三抗(如圖)。下列說法錯誤的是 (　)
A.同時注射3種抗原蛋白,可刺激B細胞增殖分化為分泌三抗的漿細胞
B.利用抗原—抗體雜交的原理篩選圖示三抗時需要3種相應抗原蛋白
C.與植物原生質體融合相比,制備單抗時可采用滅活的病毒進行誘導融合
D.與單抗相比,三抗增加了兩個特異性抗原結合位點,對癌細胞的殺傷更強
動物細胞核移植技術和克隆動物
2.[2023·江蘇鹽城模擬] 我國科學家成功地用iPS細胞克隆出了活體小鼠,部分流程如圖所示,其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶,TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列說法正確的是 (　)
A.組蛋白乙酰化和去甲基化可以使生物的表型發生可遺傳變化
B.①過程的小分子化合物誘導小鼠成纖維細胞突變為iPS細胞
C.②過程中去核前應保證卵母細胞培養至減數第一次分裂中期
D.③過程中可以使用有活性的病毒處理,目的是誘導細胞融合
3.[2023·遼寧錦州質檢] 研究人員通過體細胞克隆技術,將分散在國內不同區域養殖場、適應性好、抗逆性強、超高產的“超級奶牛”種質資源集中起來,便于進行良種奶牛繁殖。下列相關敘述錯誤的是 (　)
A.結合胚胎移植和胚胎分割技術,可快速培育出“超級奶牛”群體
B.運用克隆技術集中“超級奶牛”種質資源,有利于發揮生物多樣性的直接價值
C.“超級奶牛”的成功克隆,說明奶牛體細胞具有發育為完整個體的能力
D.體細胞克隆技術在新領域的應用,可避免從國外引進活牛的生物安全風險
考點三　胚胎工程
1.準確記憶哺乳動物的早期胚胎發育過程
2.胚胎移植與胚胎分割的操作流程
3.區分試管嬰兒和設計試管嬰兒
(1)設計試管嬰兒比試管嬰兒多出的是過程④(遺傳學診斷)。
(2)試管嬰兒主要解決不孕夫婦的生育問題,設計試管嬰兒用于白血病、貧血癥等疾病的治療。
(3)兩者都是體外受精,并進行體外早期胚胎培養,都要經過胚胎移植,都是有性生殖。
1.[2021·遼寧卷] 下圖是利用體細胞核移植技術克隆優質奶牛的簡易流程圖。有關敘述正確的是 (　)
A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質共同決定
B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體
C.過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理
D.過程③將激活后的重組細胞培養至原腸胚后移植
2.[2023·天津卷] 根據下圖,正確的是 (　)
A.子代動物遺傳性狀和受體動物完全一致
B.過程1需要MⅡ期去核卵母細胞
C.過程2可以大幅改良動物性狀
D.過程2為過程3提供了量產方式,過程3為過程1、2提供了改良性狀的方式
1.[2023·重慶模擬] 如圖是科研人員利用胚胎工程技術培育高產奶牛的過程,結合實驗過程分析,下列說法錯誤的是 (　)
A.①是人工授精,卵母細胞需在體外培養到MⅡ期才可進行
B.②是胚胎培養,中途需加入胰蛋白酶處理并進行傳代
C.③是胚胎分割,利用細胞全能性提高了胚胎的利用率
D.④是胚胎移植,受體母牛應提前注射激素使其處于發情期
2.[2023·山東師大附中模擬] 基因組印記(通過甲基化實現受精卵中來自雙親的兩個等位基因一個表達另一個不表達)阻礙了哺乳動物孤雌生殖的實現。某研究團隊利用甲基化酶、去甲基化酶和基因編輯技術,改變了小鼠生殖細胞的“基因組印記”,使其“變性”,然后將一個第二極體注入修飾后的次級卵母細胞(類似受精作用),最終創造出“孤雌生殖”的小鼠。實驗過程如下圖所示。下列相關敘述正確的是 (　)
A.體外培養卵母細胞時,為防止污染,需將培養皿置于二氧化碳培養箱中進行培養
B.甲基化可能會關閉基因的活性,對某些基因進行去甲基化處理有利于其表達
C.“孤雌小鼠”的誕生過程沒有精子參與,其基因型與提供卵母細胞的雌鼠相同
D.移植后的囊胚進一步擴大,會導致滋養層破裂,胚胎從其中伸展出來
高考生物二輪復習專題學案
13　細胞工程（參考答案）
【高頻易錯·考前清零】
1.(1)×　(2)×　(3)×　(4)√　(5)×　(6)×　(7)√ (8)√　(9)√
[解析] (1)以根尖、莖尖為材料,利用植物組織培養技術可獲得脫毒苗,但不一定抗病毒。
(2)滅活病毒可用于誘導動物細胞融合,不能用于誘導植物原生質體融合。
(3)植物組織培養時,應對外植體進行消毒處理,培養基需要進行滅菌處理,這樣可以防止雜菌污染。
(5)動物細胞培養需在培養基中添加血清等天然成分,不需要添加瓊脂,需要用液體培養基。
(6)體外培養多能干細胞時需將細胞置于95%的空氣和5% CO2的混合氣體中培養。
2.(1)×　(2)×　(3)×　(4)×　(5)√　(6)√
[解析] (1)精子獲能是獲得受精的能力,而不是獲得能量,獲能液常見的有效成分有肝素、Ca2+載體等。
(2)受精卵發育為桑葚胚的過程是在透明帶內完成的,孵化后進入原腸胚階段。
(3)囊胚期細胞開始逐漸分化。
(4)胚胎分割時要將內細胞團均等分割。
【常考長句·考前規范】
(1)植物頂端分生區附近(如莖尖)病毒極少,甚至無病毒
(2)對培養液和所有培養用具進行滅菌處理;在無菌環境下進行操作;定期更換培養液
(3)篩選出雜交瘤細胞　用特定的選擇培養基進行培養　從雜交瘤細胞中篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞
(4)受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應
(5)胚胎與代孕鼠子宮建立的僅是生理和組織上的聯系,其遺傳特性在孕育過程中一般不會發生變化
考點一
【高考曾經這樣考】
1.C　[解析] 在進行體細胞雜交之前,必須先利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁獲得原生質體,再誘導原生質體融合,A正確。人工誘導原生質體融合的方法基本可以分為兩大類——物理法和化學法,物理法包括電融合法、離心法等;化學法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等,B正確。人參根與胡蘿卜根產生愈傷組織并進行細胞融合,只考慮細胞的兩兩融合,細胞會發生同種細胞融合與異種細胞融合,只有異種細胞融合得到的融合細胞才是雜交細胞,C錯誤。由于基因表達間的相互作用,雜交細胞可能具有生長快速的優勢,D正確。
2.A　[解析] 有些產物不能或難以通過化學合成途徑得到,故利用植物細胞培養技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產物,A正確;利用植物細胞培養技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養使其增殖,可獲得植物細胞的某些次生代謝物,故可通過該技術進行植物細胞產物的工廠化生產,B錯誤;次生代謝物不是植物生長所必需的,其含量少,可以通過增加細胞的數量來增加次生代謝產物的產量,C錯誤;細胞產物的工廠化生產主要是利用促進細胞分裂的培養條件使細胞數量增加,以提高細胞次生代謝物的產量,不能提高單個細胞中次生代謝物的含量,D錯誤。
【重點熱點題組練】
1.C　[解析] 將兩種細胞分別置于較高滲透壓環境下,有利于去除細胞壁獲得兩種植物的原生質體,避免原生質體在酶解過程中受到損傷,同時也不至于導致原生質體吸水漲破,A正確;結合圖示信息可推測,異源融合體因代謝互補可恢復生長并獲得再生能力,B正確;③過程為再分化過程,誘導生芽的培養基中BA(細胞分裂素類似物)與NAA的濃度比值高于②過程,這樣有利于誘導生芽,C錯誤;圖示技術為植物體細胞雜交技術,其原理是染色體變異,D正確。
2.D　[解析] 植物組織培養過程中,需要用體積分數為70%的酒精和質量分數為5%的次氯酸鈉溶液對甲(外植體)進行消毒,不是滅菌,保證植物組織培養的成功,A錯誤;B過程表示將目的基因(SMYELV-CP)導入植物細胞(草莓細胞),常采用農桿菌轉化法,顯微注射法是將目的基因導入動物細胞常用的方法,B錯誤;B和C表示通過轉基因技術獲得抗病毒草莓,屬于基因工程技術的操作,C錯誤;無病毒苗應根據植株性狀檢測,不需要接種病毒,抗病毒苗需要通過病毒接種的方式來判斷選育的效果,因此只有方法二需要進行病毒接種實驗,D正確。
考點二
【高考曾經這樣考】
1.D　[解析] 單克隆抗體制備過程中需要對骨髓瘤細胞等進行培養,即需要使用動物細胞培養技術,A正確;該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH,故應用PTH刺激小鼠,使其產生相應的B細胞,B正確;抗原與抗體的結合具有特異性,可利用抗原—抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞,C正確;由于一種B細胞經分化形成漿細胞后通常只能產生一種抗體,故篩選出的單個雜交瘤細胞無法分泌多種抗體,D錯誤。
2.(1)不需要　使細胞接觸處質膜的脂類分子發生疏散和重組,從而導致質膜相互親和,促進融合
(2)未融合的親本細胞　融合的具有同種核的細胞
(3)通過抗體檢測呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細胞
(4)④
[解析] (1)漿細胞是高度分化的細胞,不能增殖,所以不需要通過原代培養擴大細胞數量。(2)在雜交瘤細胞篩選過程中,用特定的選擇培養基進行篩選,在該培養基上,未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡,只有融合的雜交瘤細胞才能生長。(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交,運用了抗原—抗體雜交技術,抗體檢測呈陽性的細胞為所需的雜交瘤細胞。(4)DNA連接酶能連接DNA片段,脫氧核苷酸的磷酸基團位于5'端,—OH位于3'端,并且DNA連接酶能催化合成磷酸二酯鍵,即將一條脫氧核苷酸單鏈的5'端的磷酸基團與另一條脫氧核苷酸單鏈的3'端的—OH相連,④符合題意,故選④。
【重點熱點題組練】
1.A　[解析] 同時注射3種抗原會刺激B細胞增殖分化形成不同的漿細胞,進而產生三種抗體,一種漿細胞只能產生一種抗體,并不能產生三抗,A錯誤;由于抗體具有特異性,所以利用抗原—抗體雜交的原理篩選圖示三抗時需要3種相應抗原蛋白,B正確;與原生質體融合相比,動物細胞融合特有的融合方式是用滅活的病毒進行誘導,C正確;與單克隆抗體相比,三抗增加了兩個T細胞特異性結合位點,可將T細胞帶至腫瘤處,促進T細胞對腫瘤的殺傷,因此三抗對癌細胞的殺傷更強,D正確。
2.A　[解析] 組蛋白乙酰化和去甲基化屬于表觀遺傳,表觀遺傳可以使生物體在基因的堿基序列保持不變的情況下,表型發生可遺傳變化,A正確;分析題圖可知,小鼠成纖維細胞在四種小分子化合物誘導下轉變為iPS細胞,但是這個過程不是基因突變,而是類似于植物細胞脫分化的過程,B錯誤;②過程代表給卵母細胞去核,處于減數第二次分裂中期的卵母細胞,其細胞質中含有激發細胞核全能性表達的物質,因此去核操作一般要在卵母細胞培養至減數第二次分裂中期再進行,C錯誤;③過程代表將iPS細胞注入去核的卵母細胞中,此過程可以用電融合法、滅活病毒誘導法、PEG融合法來誘導細胞融合,不能使用有活性的病毒,D錯誤。
3.C　[解析] 胚胎分割能夠得到多個基因型相同的個體,胚胎移植是胚胎工程的最后一個技術環節,結合胚胎移植和胚胎分割技術,可快速培育出“超級奶牛”群體,A正確;直接價值是對人類有食用、藥用和作為工業原料等實用意義的,以及有旅游觀賞、科學研究和文學藝術創作等非實用意義的價值,運用克隆技術集中“超級奶牛”種質資源,有利于發揮生物多樣性的直接價值,B正確;“超級奶牛”的成功克隆,說明奶牛體細胞的細胞核具有發育為完整個體的能力,即體細胞細胞核具有全能性,C錯誤;體細胞克隆技術屬于無性繁殖技術,該技術在新領域的應用,可避免從國外引進活牛的生物安全風險,如活牛可能攜帶某些傳染病等,D正確。
考點三
【高考曾經這樣考】
1.B　[解析] 分析圖示可知,后代丁細胞核遺傳物質來源于甲牛,細胞質遺傳物質來源于乙牛和甲牛,故后代丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質共同決定,A錯誤;過程①是供體動物細胞培養的過程,需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體,其中CO2的作用主要是維持培養液的pH,B正確;過程②常使用顯微操作去核法對乙牛提供的卵母細胞進行處理,C錯誤;過程③將激活后的重組細胞培養至桑葚胚或囊胚后進行移植,D錯誤。
2.D　[解析] 子代動物的遺傳性狀與受體(只提供子宮)無關,A錯誤;核移植過程中需要處于MⅡ中期的去核卵母細胞,而過程1是培育試管動物,需要培育到適宜時期(桑葚胚或囊胚時期)進行胚胎移植,B錯誤;過程2得到的是克隆動物,是無性生殖的一種,不能大幅改良動物性狀,C錯誤;過程2克隆技術可得到大量同種個體,為過程3提供了量產方式,過程3是轉基因技術,轉基因技術可導入外源優良基因,為過程1、2提供了改良性狀的方式,D正確。
【重點熱點題組練】
1.B　[解析] ①是人工授精,卵母細胞需在體外培養到MⅡ中期才可進行,且精子也需要進行獲能培養,A正確;②是胚胎培養,該過程中不需要加入胰蛋白酶處理并進行傳代,因為這里進行的是體外胚胎培養,不是動物細胞培養過程,B錯誤;③是胚胎分割,利用細胞全能性提高了胚胎的利用率,C正確;④是胚胎移植,受體母牛應提前注射激素使其處于發情期,這樣可以實現相同生理條件下的胚胎轉移,可提高移植胚胎的存活率,D正確。
2.B　[解析] 體外培養卵母細胞時,將培養皿置于二氧化碳培養箱中,是為了維持培養液的pH,A錯誤;由題干可知,基因組印記是通過甲基化使一個基因不表達,對某些基因進行去甲基化處理有利于其表達,然后促進了細胞的全能性的表現,獲得孤雌小鼠,B正確; “孤雌小鼠”是由修飾后的次級卵母細胞(完成減數第二次分裂后)和一個第二極體結合后發育形成的,同時由于在配子形成過程中會經歷減數分裂的基因重組,或發生基因突變,將導致“孤雌小鼠”的基因型不一定與提供卵母細胞的雌鼠相同,C錯誤;囊胚進一步擴大,會導致透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來,這一過程叫作孵化,D錯誤。
21世紀教育網 www.21cnjy.com 精品試卷·第 2 頁 （共 2 頁）
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