資源簡介

第2章　細胞工程
第2節　動物細胞工程
二、動物細胞融合技術與單抗隆抗體
1．動物細胞融合技術（cell fusion technique）就是使兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的技術。融合后形成的雜交細胞具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息。（P48）
2．動物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理相同。誘導動物細胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法等。（P48）
3．細胞融合技術突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能。（P48）
4．制備單克隆抗體需要的技術手段：動物細胞融合和動物細胞培養。制備單克隆抗體的原理：細胞膜的流動性和細胞增殖。（P49）
5．單克隆抗體制備過程示意圖。（P49）
米爾斯坦和科勒制備單克隆抗體過程的示意圖
6．第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細胞，方法是用特定的選擇性培養基培養。經過篩選后未融合的細胞或者融合后具有同種核型的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長。（P49）
7．第二次篩選的目的是篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞，方法是專一抗體檢驗。（P49）
8．抗體——藥物偶聯物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合，實現了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。（P50“思考·討論”）
三、動物體細胞核移植技術和克隆動物
1．動物細胞核移植技術是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，并使這個重新組合的細胞發育成新胚胎，繼而發育成動物個體的技術。（P52）
2．減數分裂Ⅱ中期（MⅡ期）卵母細胞中的“核”其實是紡錘體—染色體復合物。文中所說的“去核”是去除該復合物。（P52“相關信息”）
3．哺乳動物核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植。由于動物胚胎細胞分化程度低，表現全能性相對容易，而動物體細胞分化程度高，表現全能性十分困難，因此動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植。（P52）
4．下面以克隆高產奶牛為例，來說明體細胞核移植的大致過程（如圖）。（P53）
5．目前動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學物質處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。（P54“相關信息”）
知識點默寫
1．動物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理相同。誘導動物細胞融合的常用方法有　　　　　　　　法、電融合法和　　　　　　　　法等。
2．細胞融合技術突破了有性雜交的局限，使　　　　雜交成為可能。
3．制備單克隆抗體需要的技術手段：動物細胞融合和動物細胞培養。制備單克隆抗體的原理：　　　　　　　　和細胞增殖。
4．一種B淋巴細胞只能分泌一種抗體，B淋巴細胞在體外　　　　（填“能”或“不能”）無限增殖；骨髓瘤細胞能　　　　　　；B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合得到的　　　　細胞，既能迅速大量增殖，又能產生專一的抗體。
5．單克隆抗體的制備過程：
6．單克隆抗體的優點：_______________________________________________________
________________________________________________________________________
7．制備單克隆抗體過程中，若僅考慮細胞的兩兩融合，B淋巴細胞和骨髓瘤細胞經細胞融合后產生的細胞有　　　　　　　　　　　　　　　　3種類型，出現不同種類型是因為　　　　　　　　。
8．雜交瘤細胞的特點是________________________________________________
________________________________________________________________________。
9．體細胞核移植過程
10．核移植技術中必須先去掉受體卵母細胞的細胞核的原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
【知識點默寫參考答案】
1．PEG融合　滅活病毒誘導　2.遠緣　3.細胞膜的流動性
4．不能　無限增殖　雜交瘤　5.雜交瘤細胞　能產生所需抗體　6.能準確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發生特異性結合，并且可以大量制備　7.B細胞自身融合、骨髓瘤細胞自身融合、雜交瘤細胞　細胞融合是隨機的　8.既能迅速大量增殖，又能產生專一的抗體　9.MⅡ　顯微操作　電融合　重構胚　重構胚　完成細胞分裂和發育進程　基本相同　10.保證核移植動物的核遺傳物質全部來自供體細胞

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