資源簡(jiǎn)介

(共1張PPT)
目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
微生物細(xì)胞
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、
基因槍法、花
粉管通道法
顯微注射技術(shù)
常用方法
生物種類
體細(xì)胞
將含有目的基
因的表達(dá)載體
提純→取受精
卵→顯微注射
→受精卵發(fā)育
→獲得具有新
性狀的動(dòng)物
以農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
法為例：
將目的基因插
入Ti質(zhì)粒的
T-DNA上→農(nóng)桿
菌→導(dǎo)入植物
細(xì)胞→整合到
受體細(xì)胞的DNA
上→表達(dá)
轉(zhuǎn)化過(guò)程
植物細(xì)胞
動(dòng)物細(xì)胞
Ca2+處理法
受體細(xì)胞
受精卵
原核細(xì)胞
Ca2+處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞
→重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)
胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收
DNA分子
國(guó)馳名彎(共1張PPT)
DNA連接酶與DNA聚合酶的比較
DNA連接酶
DNA聚合酶
催化兩個(gè)脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵
不需要模板
需要DNA的一條鏈為模板
游離的DNA片段
單個(gè)的脫氧核苷酸
形成完整的DNA分子
形成DNA的一條鏈
基因工程
DNA復(fù)制
相同點(diǎn)
不
同
點(diǎn)
模板
作用
對(duì)象
作用
結(jié)果
用途
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質(zhì)粒的功能和特點(diǎn)
①能夠自我復(fù)制
②有多個(gè)限制酶
切割位點(diǎn)
③有標(biāo)記基因
限制酶
DNA連接酶
-A
-TGCGC
CGCGT-
A-
載體
目
的
基
因
質(zhì)粒
形成重組DNA分子
堿基互補(bǔ)
作用于
作用于
作用于
具備
條件
國(guó)馳名彎(共1張PPT)
含有正常
基因的細(xì)胞
基因治療的過(guò)程
正常基因
適當(dāng)?shù)幕蜉d體
基因重組
細(xì)胞注入體內(nèi)產(chǎn)生正常的蛋白質(zhì)
重組DNA分子
導(dǎo)入離體細(xì)胞
之
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目的基因的檢測(cè)與鑒定
方 法
檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體DNA分子上是否插入了
目的基因,采用DNA分子雜交技術(shù)
檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，采用分子雜
交技術(shù)
分子
水平
檢測(cè)
導(dǎo)入DNA
分子
轉(zhuǎn)錄
翻譯
除了分子檢測(cè)外，還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平
的鑒定，如做抗蟲(chóng)或抗病接種實(shí)驗(yàn)等
檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，采用抗
原—抗體雜交技術(shù)
個(gè)體水平鑒定
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PCR技術(shù)與DNA復(fù)制的比較
DNA復(fù)制
PCR技術(shù)
解旋酶催化
DNA在高溫作用下變性解旋
細(xì)胞內(nèi)（主要在細(xì)胞核內(nèi)）
細(xì)胞外（主要在PCR擴(kuò)增儀內(nèi)）
DNA解旋酶、普通的DNA
聚合酶等
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）
細(xì)胞內(nèi)溫和條件
需控制溫度，在較高溫度下進(jìn)行
區(qū)
別
解旋
方式
場(chǎng)所
酶
溫度
條件
合成的
對(duì)象
DNA分子
DNA片段或基因
聯(lián)系
①模板：均需要脫氧核苷酸鏈作為模板進(jìn)行物質(zhì)合成
②原料：均為四種脫氧核苷酸
③酶：均需要DNA聚合酶進(jìn)行催化
④引物：均需要引物，使DNA聚合酶從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧
核苷酸
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基因表達(dá)載體的構(gòu)建
質(zhì)粒
同一種限制酶
DNA分子
+
DNA連接酶
重組DNA
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基因工程的概念
基因工程的別名
DNA重組技術(shù)
操作環(huán)境
生物體外
操作對(duì)象
基因
操作水平
DNA分子水平
基本過(guò)程
剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)
結(jié)果
人類需要的新的生物類型
和生物產(chǎn)品
國(guó)馳名彎

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